型氨基酸氧化酶论文_张宁

导读:本文包含了型氨基酸氧化酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:氧化酶,氨基酸,精神分裂症,酪氨酸,选择性,戊酸,丝氨酸。

型氨基酸氧化酶论文文献综述

张宁[1](2018)在《基于光漂白进样—激光诱导荧光检测毛细管电泳系统的手性氨基酸高效分离及D型氨基酸氧化酶酶分析》一文中研究指出随着分离技术的不断发展,手性分离在分析化学、医药、环境和生命科学领域得到了越来越多的研究。氨基酸(amino acids,AAs)作为一种重要的手性化合物,一直被认为只有L型氨基酸(L-AAs)在自然界中存在,直到20世纪70年代,才在人体中发现了少量D型氨基酸(D-AAs)的存在。由于D-AAs在生命细胞的许多过程中起到重要作用,同时其在人体中的水平受D型氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAAO)的调节,其水平紊乱会导致许多疾病的发生。因此,D-AAs的含量及DAAO的活性研究在生物分析科学中尤为重要。但是,在生物体中,DAAO具有广泛的底物特异性和大量的L-AAs的存在都将会影响DAAO活性检测的可靠性和准确性。为了解决这个问题,最有效的方式就是手性分离氨基酸对映体。在众多分离的方法中,毛细管电泳(CapillaryElectrophoresis,CE)凭借其分离效率高,样品用量少和设备经济等优势被广泛的应用于氨基酸对映体的手性分离。为了减少手性分离的分析时间,提高DAAO酶分析效率,本论文主要进行了如下工作:(1)我们应用搭建的光漂白进样-激光诱导荧光检测毛细管电泳(OGCE-LIF)系统实现了氨基酸对映体的手性分离。为了提高手性分离的效率,我们对影响分离的实验条件进行了考察和优化,包括HP-β-CD的浓度,硼砂缓冲溶液的浓度,缓冲溶液的pH及分离电压等。在最优的OGCE-LIF分离条件下,实现五对OPA/NAC衍生的氨基酸对映体的高效分离,检出限达到1.3μM。该方法具有较高的重现性,15次重复分析的迁移时间的相对标准偏差低于1.5%,样品峰高的相对标准偏差低于2.7%。实验结果表明OGCE-LIF系统能够实现氨基酸对映体的高灵敏度,高重复性的快速分离,可以应用于手性氨基酸连续定量分析。(2)我们应用OGCE-LIF系统实现了DAAO对于单底物和多底物的酶反应分析,同时基于反应速率方程对DAAO平行氧化两种不同底物的催化反应进行了动力学分析,解释了实验测量结果。研究表明:在L型氨基酸大量存在时,OGCE-LIF系统可以实现对DAAO酶反应的高效分析,借助该系统快速手性分离多对氨基酸对映体的优势,可实现多底物DAAO催化反应研究,这对于复杂的生物样品中的D-AAs含量检测和DAAO酶反应分析提供了有利的途径。(本文来源于《东北师范大学》期刊2018-05-01)

魏绿,曹力强,席真[2](2017)在《D-氨基酸氧化酶对映选择性的调控》一文中研究指出地球生命,无论是动物或植物,均毫无例外地选择L-氨基酸和D-核糖分别组建蛋白质和核酸生物大分子。其同型手性的起源原因至今仍是未解之谜,被美国《科学》杂志列为本世纪125个最重要的科学难题之一。生命要维持正常,必须将生命不需要的D-氨基酸和L-核糖从食品中剔除掉。对于D-氨基酸来说,这个重要的工作由D-氨基酸氧化酶(DAAO)来进行。它是一种蛋白酶,可高效专一地选择D-氨基酸作为底物催化氧化成(本文来源于《第十届全国化学生物学学术会议论文摘要集(墙报)》期刊2017-09-23)

刘庆菊,陈莉,吴丽,何裕建,李向军[3](2017)在《pH对D-氨基酸氧化酶对映选择性的影响》一文中研究指出氨基酸是蛋白质的基本结构单位,人体蛋白质的氨基酸均为L构型,人体直接利用L-氨基酸来进行各项生命活动。但研究发现,在生物的组织和血液中存在D-氨基酸, D-氨基酸对生物体具有一定的毒性,已有文献报道D-氨基酸与人的衰老、白内障、老年痴呆症等关系密切,并且越来越多的研究证明,氨基酸L型与D型之间比例的变化,与生物体的多种生理病理机制、疾病以及衰老有着密切的关联[1],有关氨基酸对映体与人类某些疾病的发生发展关系的研究已成为生命科学前沿领域的研究热(本文来源于《第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集》期刊2017-05-19)

刘庆菊,黄金成,陈莉,吴丽,李向军[4](2017)在《离子液体中D-氨基酸氧化酶的对映选择性翻转》一文中研究指出作为一种新型的绿色溶剂,离子液体引起广泛关注。本文研究了十种离子液体中D-氨基酸氧化酶(DAAO)对映选择性翻转现象与可能机理。研究发现3-甲基咪唑甲酸根盐离子液体中,DAAO的对映选择性发生翻转,可以对L-丙氨酸,L-脯氨酸等L-氨基酸产生活性。(本文来源于《中国化学会第十九届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文汇编》期刊2017-03-30)

宋晓强[5](2016)在《D-氨基酸氧化酶的修饰及其双酶体系研究》一文中研究指出高效多酶催化体系在生物领域被广泛研究,深入研究及完善多酶催化体系具有很大的发展潜力并创造价值。本文通过无缝连接直接融合和内含肽介导融合构建多酶催化体系,即DAAO和VHb复合酶催化体系、DAAO、VHb和TH复合酶催化体系。通过对这两种复合酶催化体系的研究,为多酶催化在工业应用方面提供有用的参考价值。1、本文首先利用分子生物学、基因工程操作手段,采用两种不同方式成功构建DAAO和VHb融合表达菌,即表达菌BL21(DE3) /pET28a-DAAO-VHb、BL21(DE3)/pETDuet-l-VHb-IN-IC-DAAO。研究确定表达菌最佳复合酶诱导条件。表达菌BL21 (DE3)/pET28a-DAAO-VHb最佳为诱导条件为在25℃、装液量为50%时,以0.1 mM IPTG浓度诱导8 h。表达菌BL21 (DE3)/pETDuet-1-VHb-IN-Ic-DAAO最佳诱导条件为在25℃、装液量为40%时,以0.1 mMIPTG浓度诱导8h。在最佳诱导条件下培养菌体,通过His-tag纯化的方法得到纯酶。通过复合酶比酶活测定,复合酶p28-DV、DU-DV比酶活与单DAAO酶相比分别提高1.8倍和2.13倍。圆二色谱分析蛋白二级结构,复合酶DU-DV组分α-螺旋含量高于p28-DV含量,与比酶活测定结果保持一致。2、相似的原理及技术手段被用于构建VHb、TH、DAAO复合酶表达菌,即BL21 (DE3)/pET28a-DAAO-VHb-TH、BL21 (DE3)/pETDuet-1-TH-IN-IC-DAAO-VHb、BL21(DE3)/pETDuet-1-VHb-TH-IN-IC-DAAO。研究确定表达菌最佳诱导条件。菌BL21(DE3)/pETDuet-1-TH-IN-IC-DAAO-VHb没有表达目的蛋白。表达菌BL21 (DE3)/pET28a-DAAO-VHb-TH最佳诱导条件为在25℃、装液量为50%时,以0.1 mMIPTG浓度诱导8h。表达菌BL21 (DE3)/pETDuet-1-VHb-TH-IN-Ic-DAAO最佳为诱导条件为在25℃、装液量为30%时,以0.4 mM IPTG浓度诱导8h。在其最佳诱导条件下培养之后收集菌体,通过多聚组氨酸标签纯化法得到纯酶,对其酶活进行了测定。剪接产物DU-VTD具有底物L-Tyr催化活性,而融合蛋白p28-DVT没有底物L-Tyr催化活性。综上所述,就本章实验而言,不同融合构建方式不单影响蛋白差异表达,还会影响复合酶活性。与无缝连接融合技术相比,内含肽介导融合方式对复合酶的结构影响更小,更有利于构建酶连续催化体系。(本文来源于《北京化工大学》期刊2016-05-27)

孙建[6](2016)在《D-氨基酸氧化酶定向固定在血红素修饰的碳纳米管上模拟多酶催化体系》一文中研究指出D-氨基酸氧化酶(DAAO)催化D-型氨基酸生成其对应的α-酮酸,并伴有副产物过氧化氢产生(H2O2)。在该实验中,D-氨基酸氧化酶被修饰连接上一段类弹性蛋白(ELP),并将该已修饰的酶蛋白固定到多壁碳纳米管上(MWCNTs)。多壁碳纳米管首先被羟高铁血红素(hematin)所修饰,再将ELP修饰的DAAO (ELP-DAAO)固定到已在碳纳米管上的hematin上,这种定向的固定方式使的ELP-DAAO分子和hematin分子在空间上以分子水平上的距离相靠近。这种分子距离上的靠近使的ELP-DAAO催化产生的H2O2能迅速地被hematin所分解。同时,生成的氧气(O2)又充分地被用来氧化DAAO的辅酶一一还原态的黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),并产生H2O2。从而在ELP-DAAO和hematin之间形成一个从H2O2→O2→H2O2的循环。实验结果表明,该循环作为催化体系的推动力加速主反应的进行。从酶的动力学研究结果可以看出,ELP-DAAO/hematin-CNT催化体系所展现的催化效率是游离ELP-DAAO的叁倍多。由此,我们的研究成功构建了一个高效的模拟多酶催化的体系。另外,实验过程中对于该催化体系的构建,运用到了高分辨透射电镜(TEM)、红外光谱(FT-IR)、紫外可见光光谱(UV-vis)、X-射线电子能谱(XPS)等手段对其进行了全程表征,实验结果充分的表明了该催化体系被成功地构建了。最后,对于该种高效的酶固定催化体系的进一步研究。一方面关于固定载体,我们可以用其它的纳米或微米材料来替代MWCNTs。另一方面对于在本实验中用到的DAAO也可以被其它的氧化酶来替换,从而形成更多更广泛的模拟多酶催化体系。(本文来源于《北京化工大学》期刊2016-05-22)

谢谨,谢东升,傅磊,郭欣,何宛[7](2016)在《D-型氨基酸氧化酶抑制剂的发展》一文中研究指出D-型氨基酸氧化酶(D-Amino acid oxidase,DAAO)抑制剂可以阻止D-型氨基酸(主要是D-型丝氨酸)的降解和过氧化氢的生成,在治疗精神分裂症阴性症状和认知障碍与镇痛等方面均表现出较好的疗效。从第一个DAAO抑制剂芳香羧酸类的苯甲酸到经过烯醇互变的α-羟基酮喹类抑制剂喹诺林-2,3-二酮,DAAO抑制剂结构上总共经历了3代变化,抑制剂与酶之间的相互作用模式逐渐加强,其抑制活性升高了数万倍,脂溶性增加,酸性减弱,理化性质逐渐优化。本文就近10年DAAO抑制剂的结构发展与生物活性之间的关系进行综述。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年13期)

马金莲,应晗笑,王璟,曹伟佳,吴昊[8](2016)在《L-氨基酸氧化酶的诱导表达及生物催化合成5-氨基戊酸的研究》一文中研究指出L-氨基酸氧化酶可以催化L-氨基酸生成酮酸等化学品,具有重要的应用前景。本研究成功将来源于红球菌(Rhodococcus opacus)的氨基酸氧化酶在大肠杆菌中表达,并首次用于生物催化合成5-氨基戊酸。结果表明:L-氨基酸氧化酶诱导表达最适温度为25℃,最适诱导剂浓度0.5 mmol/L,最适诱导时间为7 h,诱导时最佳细胞量为0.246 g/L。催化合成5-氨基戊酸时,最适底物L-赖氨酸(Lys)浓度17 mmol/L,最适p H为7.0,最适温度为37℃,最适时间为24 h,最适补加0.5%H_2O_2,添加酶与黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)的最适摩尔比为1∶1,最终5-氨基戊酸产量达到16.71 mmol/L。本研究成功的实现了单酶(LAAO)合成5-氨基戊酸,为简便生物合成5-氨基戊酸奠定基础。(本文来源于《食品工业科技》期刊2016年07期)

平军娇,杜宝国,蒋廷云,吴勇,沈玉双[9](2015)在《丝氨酸消旋酶及D构象氨基酸氧化酶与精神分裂症的研究进展》一文中研究指出长期以来,一直认为组成人类蛋白质的氨基酸为L-氨基酸,D-氨基酸只在细菌和无脊椎动物内合成。2002年Fujii[1]研究报道显示,研究者将质谱和气相色谱技术应用于手性氨基酸检测和分离,发现在高等动物中枢神经系统中存在区域性的高浓度的内源性D-丝氨酸(D-Ser)。D-Ser主要分布于哺乳动物的前脑区,存在于哺乳动物脑内灰质区中突触旁边的Ⅱ型星(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2015年18期)

张翠,郭积芳,孙悦,王芳霞,杨章民[10](2015)在《中介蝮蛇毒L-氨基酸氧化酶基因的生物信息学分析》一文中研究指出采用生物信息学方法,对中介蝮蛇毒L-氨基酸氧化酶(GI-LAO)基因进行了分析。结果表明:GI-LAO基因所包含的开放阅读框为1 515bp,编码504个氨基酸残基;GI-LAO一级结构与白眉蝮GH-LAO的相似性最高,达99%;N-端的18个氨基酸残基为信号肽,成熟肽含486个氨基酸残基,相对分子质量为55.1kDa,理论等电点为6.55;该蛋白含有两个结构域:FAD结合域(56-123位氨基酸残基)和催化结构域(61~499位氨基酸残基);与白眉蝮GH-LAO序列比对发现,有4个氨基酸位点存在差异(分别是20、56、99和467位氨基酸残基),用SIFT软件分析表明,这四个位点对其功能无影响;该基因编码的氨基酸序列有2个活性位点(H242和R343),2个N-糖基化位点(N190和N379),5个位点(R108、H241、Y390、G482和W483)与底物结合有关,4个保守半胱氨酸残基形成两对二硫键(C28—C191和C349—C430);叁维结构建模结果表明,GI-LAO形成同源二聚体,每个单体由22个α-螺旋,22个β-折迭股和一些无规则卷曲、转角等形成叁个结构域:FAD结合域,底物结合域以及α-螺旋域;在GI-LAO蛋白的进化分析中,中介蝮GI-LAO与白眉蝮GHLAO的亲缘关系最近。(本文来源于《陕西师范大学学报(自然科学版)》期刊2015年05期)

型氨基酸氧化酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

地球生命,无论是动物或植物,均毫无例外地选择L-氨基酸和D-核糖分别组建蛋白质和核酸生物大分子。其同型手性的起源原因至今仍是未解之谜,被美国《科学》杂志列为本世纪125个最重要的科学难题之一。生命要维持正常,必须将生命不需要的D-氨基酸和L-核糖从食品中剔除掉。对于D-氨基酸来说,这个重要的工作由D-氨基酸氧化酶(DAAO)来进行。它是一种蛋白酶,可高效专一地选择D-氨基酸作为底物催化氧化成

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

型氨基酸氧化酶论文参考文献

[1].张宁.基于光漂白进样—激光诱导荧光检测毛细管电泳系统的手性氨基酸高效分离及D型氨基酸氧化酶酶分析[D].东北师范大学.2018

[2].魏绿,曹力强,席真.D-氨基酸氧化酶对映选择性的调控[C].第十届全国化学生物学学术会议论文摘要集(墙报).2017

[3].刘庆菊,陈莉,吴丽,何裕建,李向军.pH对D-氨基酸氧化酶对映选择性的影响[C].第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集.2017

[4].刘庆菊,黄金成,陈莉,吴丽,李向军.离子液体中D-氨基酸氧化酶的对映选择性翻转[C].中国化学会第十九届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文汇编.2017

[5].宋晓强.D-氨基酸氧化酶的修饰及其双酶体系研究[D].北京化工大学.2016

[6].孙建.D-氨基酸氧化酶定向固定在血红素修饰的碳纳米管上模拟多酶催化体系[D].北京化工大学.2016

[7].谢谨,谢东升,傅磊,郭欣,何宛.D-型氨基酸氧化酶抑制剂的发展[J].现代生物医学进展.2016

[8].马金莲,应晗笑,王璟,曹伟佳,吴昊.L-氨基酸氧化酶的诱导表达及生物催化合成5-氨基戊酸的研究[J].食品工业科技.2016

[9].平军娇,杜宝国,蒋廷云,吴勇,沈玉双.丝氨酸消旋酶及D构象氨基酸氧化酶与精神分裂症的研究进展[J].国际检验医学杂志.2015

[10].张翠,郭积芳,孙悦,王芳霞,杨章民.中介蝮蛇毒L-氨基酸氧化酶基因的生物信息学分析[J].陕西师范大学学报(自然科学版).2015

论文知识图

2-11氧化酶法在25°C,pH...4-6星星草氧化还原敏感分泌型过氧化物...利用Knockin技术构建per1a的转基因鱼系...4根据BC-216SrDNA序列构建的...荧光假单胞菌基因片段图血红素的结构图

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

型氨基酸氧化酶论文_张宁
下载Doc文档

猜你喜欢