抗体亲和层析柱论文_李坤,詹少德,吴志华,陈红兵

导读:本文包含了抗体亲和层析柱论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:层析,亲和,抗体,单克隆抗体,多糖,空肠,过敏原。

抗体亲和层析柱论文文献综述

李坤,詹少德,吴志华,陈红兵[1](2016)在《利用自制免疫亲和层析柱纯化抗Ara h 2抗体》一文中研究指出目的 :近年来,抗体已经被广泛应用于体内/外的科学研究中,不仅应用于细胞内/外蛋白的识别与定位,在以抗原抗体特异性反应作为理论基础的免疫亲和分离或检测分析中,高效价的抗体更是一种不可或缺的重要工具。本研究利用自制免疫亲和层析柱(Immunoaffinity Chromatography Columns,IAC)纯化抗Ara h 2的多克隆抗体。方法 :首先利用离子交换层析柱从花生中纯化得到Ara h 2蛋白,以此作为抗原,采用多点皮下注射的方式免疫日本大耳兔,获得高效价血清备用。然后利用纯化的Ara h 2制备免疫亲和层析柱,并对多克隆抗体进行纯化,并与商业购买的已被成功用于纯化多克隆抗体的抗体亲和免疫球蛋白G琼脂糖高速流动树脂(Mab Affinity Protein G Agarose High Flow Resin,MPG)进行比较。结果 :尽管自制免疫亲和层析柱的柱容量只有商购MPG柱的40%左右,但在纯化效率上,自制柱的纯化因子为126.6,高于MPG的77.3。结论 :实验数据表明,与商购MPG柱相比,自制免疫亲和层析柱纯化出来的目标抗体效价较高。此外,与商购MPG柱相比,自制柱的制备成本低廉,可广泛适用于实验室抗体纯化工作。(本文来源于《第十一届全国免疫学学术大会壁报交流集》期刊2016-11-04)

梁明,刘楠,刘吉华,余伯阳[2](2006)在《以鲁斯可皂苷元为配基的亲和层析柱的制备及其在纯化抗体中的应用》一文中研究指出目的:以鲁斯可皂苷元(ruscogenin,RUS)为配基制备亲和层析柱,并应用于免疫亲和纯化抗血清。方法:将鲁斯可皂苷元衍生为带有两个-COOH臂的丁二酸单酯衍生物(succinylatedruscogenin,RUS-2HS),与带有10碳原子链的琼脂糖凝胶EAHSepharose4B偶联,制成亲和层析柱;以制备的亲和层析柱纯化人工合成抗原RUS-2HS-BSA(牛血清白蛋白)免疫家兔产生的抗血清,得到特异性较高的抗体,并检测纯化抗体的纯度及特异性。结果:成功将RUS-2HS作为配体偶联至亲和介质上,偶联量为4.24mg.mL-1,偶联率为53.25%;竞争性抑制试验显示纯化抗体交叉反应率下降,特异性提高;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示单一蛋白质条带,其相对分子质量约为51.2kD。结论:建立了以小分子天然活性产物为配基制备亲和柱的方法,应用于抗血清的纯化,获得的特异性抗体为探索该类难检测的活性成分的药理作用机制提供新的技术手段。(本文来源于《中国天然药物》期刊2006年05期)

刘卫刚,张建中,刘瑞春,何俊瑛,李春岩[3](2004)在《脂多糖亲和层析柱吸附抗脂多糖抗体的研究》一文中研究指出吉兰 巴雷综合征 (Guillain Barresyndrome,GBS)是一种自身免疫病 ,临床采用的血浆交换虽可去除患者血浆中抗空肠弯曲菌 (Campylobacterjejuni,Cj)脂多糖 (Lipopolysaccharide ,LPS)抗体(本文来源于《免疫学杂志》期刊2004年02期)

刘瑞春,何俊瑛,刘卫刚,张建中,李春岩[4](2004)在《LPS亲和层析柱吸附抗LPS抗体的实验研究》一文中研究指出目的:制作LPS亲和层析柱(affinity chromatography columu)并观察它对急性运动轴索型神经病(acute motoraxonal neuropathy,AMAN)患者血浆中的抗脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)抗体的吸附。方法:以致AMAN空肠弯曲菌(campylobacter jejuni,Cj)Penner 0:19型的LPS作为配体与CNBr-activated Sepharose 4 Fast Flow亲和介质偶联制作亲和层析柱;利用间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)检测过柱前后样本以及抗体经洗脱后,洗脱液中所含抗LPS抗体滴度。结果:阳性的抗LPS抗体血浆流过LPS亲和层析柱后,12/13管流出液中抗LPS抗体变为阴性;抗体经洗脱后,在洗脱液中检出高滴度的抗LPS抗体。结论:LPS亲合层析柱是一种去除AMAN病人血浆中抗LPS抗体较为理想的方法。(本文来源于《脑与神经疾病杂志》期刊2004年01期)

韩亮,曾国华,赵丽欣,杨桂云,刘淑玲[5](1998)在《抗人α2a型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制》一文中研究指出应用鼠-鼠杂交瘤细胞技术建立了叁系稳定分泌抗重组人α2a型干扰素(rHu-IFN-α2a)单克隆抗体细胞系1A5、1B5和27A7。细胞连续传代和在液氮中冻存后复苏,分泌抗体能力不变,并且维持在较高水平,细胞培养上清效价1∶256~1∶4096,腹水1∶26×105~1∶27×108。Ig亚类测定,1A5和1B5McAb为IgG1,27A7为IgG2a。叁系McAb均识别rHu-IFN-α2a和-α2b,与rHu-IFN-α1和正常大肠菌体裂解液无反应。竞争ELISA试验,叁系McAb分别针对rHu-IFN-α2a上三个不同表位。同McAb建立双抗体夹心ELISA对rHu-IFN-α2a和-α2b均可检测到150pg/ml,约10IU/ml的敏感度。用提纯的单抗制备亲和层析柱,单抗偶联率95%以上。叁系单抗亲和层析柱均可将粗制rHu-IFN-α2a提纯到97%以上纯度。平均回收率为:1A5单抗柱902%,1B5单抗柱953%,27A7单抗柱947%。比活性平均值依次为194×108IU/mg,197×108IU/mg和164×108IU/mg,残余鼠IgG量均符合规程要求。纯化rHu-IFN?(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊1998年04期)

佟志刚,赵武红[6](1996)在《促黄体生成素与促甲状腺激素单克隆抗体亲和层析柱的制备》一文中研究指出促黄体生成素与促甲状腺激素单克隆抗体亲和层析柱的制备佟志刚,赵武红(天津医科大学病理生理学教研室,天津300070)亲和层析技术广泛应用于生物分子的分离和纯化。在脑垂体激素的纯化中,由于垂体诸激素的分子量相接近,化学结构相似,而导致纯化困难。本文中我...(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊1996年04期)

曾国华,韩亮,赵丽欣,崔云泽[7](1992)在《人α_1型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制》一文中研究指出应用杂交瘤技术建立了稳定分泌抗rHu-IFN-α_1的单克隆抗体细胞系,体外连续传代8个月以上,在BALB/c鼠体内连续传代6个月以上,分泌抗体能力不变,特异性专一。11D_2单抗为IgG_2b,17D_9单抗为IgG_1。采用不同方法提纯抗体均得到90%纯度。11D_2单抗中和效价为1024,17D_9单抗为65534。制备亲和层析柱的最佳抗体浓度为5mg/ml,凝胶与抗体体积比为1:2,偶联率均达到95%~98%。11D_2单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α_1干扰素不易被洗脱,不适宜制备亲和层析柱。17D_9单抗亲和层析柱提纯粗制rHu-IFN-α_1结合的抗原容易被洗脱,适宜制备亲和层析柱。粗制rHu-IFN-α_1经17D_9单抗层析柱后,获得了电泳纯级制品,比原纯度增加15倍,平均收率93%,比活性平均值为6.5×10~6IU/mg。残余鼠IgG量符合规程要求。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊1992年01期)

旷双远,褚兴棣,钱耕荪[8](1992)在《单克隆抗体亲和层析柱在测定酱油与乳腐中黄曲霉霉素B_1的应用》一文中研究指出本文介绍了单克隆抗体系和层析在简单、快速及有效地分离酱油及乳腐中黄曲霉霉素B_1(AFB_1)的方法。两食品经氯仿粗提后,挥干氯仿,用5%甲醇水(体积比)溶解残余物,加至单抗亲和层析柱,PBS溶液洗除杂质,最后用80%甲醇水洗脱并挥干。用TLC方法测定AFB_1含量。按10μg/L量加入酱油测定回收率,所得回收率为81.1%。本方法最低检出极限为0.2μg/L。在56份酱油样品,45份乳腐样品的AFB_1测定中,我们发现酱油中AFB_1污染水平最高,其中最高者为188μg/L,16%的酱油样品高于20μg/L。(本文来源于《肿瘤》期刊1992年01期)

孙凌云,张杏书,葛民泽,费如珍,徐愤[9](1991)在《抗人C_1抑制物单克隆抗体亲和层析柱分离的C_1抑制物性质初探》一文中研究指出我们用淋巴细胞杂交瘤技术获得了一株分泌抗人C_1抑制物(C_1 inhibitor)单克隆抗体(McAb)。用此McAb制备的亲和层析柱分离了具有强的溶血抑制活性的人C_1 INH,分子量为102000。重复分离的C_1 INH电泳图像提示C_1 INH存在抗原性相同,而分子量不同的两种成份。(本文来源于《免疫学杂志》期刊1991年03期)

寿成超,董志伟,刘培楠[10](1990)在《经蛋白A连接于琼脂糖的单克隆抗体亲和层析柱用于抗独特型抗体的纯化》一文中研究指出以Sepharose CL-4B-Pro A吸附胃癌单克隆抗体(McAb)PD4,继之以交联剂二甲基庚二亚胺二盐酸盐(dimethyl pimelimidate dihydrochloride)处理,形成亲和介质(柱Ⅰ)。该亲和介质用于纯化抗PD4独特型抗体(aIdAb)具有明显的优点。与Sepharose CL-4B-PD4(柱Ⅱ)相比,前者的结合容量为后者的1.78~1.94倍。采用柱Ⅰ纯化的aIdAb,当其与McAb PD4的分子比分别为1:1及4:1时可50%或100%地抑制McAb PD4与靶细胞的结合,但采用柱Ⅱ获得的aIdAb,只有当分子比达到2:1及8:1时,才能达到同等的抑制效应。这可能是由于Pro A与McAb PD4的Fc片断结合,使后者的Fab端得以充分暴露,因而有更多的机会与aIdAb结合。(本文来源于《生物化学杂志》期刊1990年01期)

抗体亲和层析柱论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:以鲁斯可皂苷元(ruscogenin,RUS)为配基制备亲和层析柱,并应用于免疫亲和纯化抗血清。方法:将鲁斯可皂苷元衍生为带有两个-COOH臂的丁二酸单酯衍生物(succinylatedruscogenin,RUS-2HS),与带有10碳原子链的琼脂糖凝胶EAHSepharose4B偶联,制成亲和层析柱;以制备的亲和层析柱纯化人工合成抗原RUS-2HS-BSA(牛血清白蛋白)免疫家兔产生的抗血清,得到特异性较高的抗体,并检测纯化抗体的纯度及特异性。结果:成功将RUS-2HS作为配体偶联至亲和介质上,偶联量为4.24mg.mL-1,偶联率为53.25%;竞争性抑制试验显示纯化抗体交叉反应率下降,特异性提高;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示单一蛋白质条带,其相对分子质量约为51.2kD。结论:建立了以小分子天然活性产物为配基制备亲和柱的方法,应用于抗血清的纯化,获得的特异性抗体为探索该类难检测的活性成分的药理作用机制提供新的技术手段。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗体亲和层析柱论文参考文献

[1].李坤,詹少德,吴志华,陈红兵.利用自制免疫亲和层析柱纯化抗Arah2抗体[C].第十一届全国免疫学学术大会壁报交流集.2016

[2].梁明,刘楠,刘吉华,余伯阳.以鲁斯可皂苷元为配基的亲和层析柱的制备及其在纯化抗体中的应用[J].中国天然药物.2006

[3].刘卫刚,张建中,刘瑞春,何俊瑛,李春岩.脂多糖亲和层析柱吸附抗脂多糖抗体的研究[J].免疫学杂志.2004

[4].刘瑞春,何俊瑛,刘卫刚,张建中,李春岩.LPS亲和层析柱吸附抗LPS抗体的实验研究[J].脑与神经疾病杂志.2004

[5].韩亮,曾国华,赵丽欣,杨桂云,刘淑玲.抗人α2a型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制[J].微生物学免疫学进展.1998

[6].佟志刚,赵武红.促黄体生成素与促甲状腺激素单克隆抗体亲和层析柱的制备[J].细胞与分子免疫学杂志.1996

[7].曾国华,韩亮,赵丽欣,崔云泽.人α_1型基因工程干扰素单克隆抗体及亲和层析柱的研制[J].中国生物制品学杂志.1992

[8].旷双远,褚兴棣,钱耕荪.单克隆抗体亲和层析柱在测定酱油与乳腐中黄曲霉霉素B_1的应用[J].肿瘤.1992

[9].孙凌云,张杏书,葛民泽,费如珍,徐愤.抗人C_1抑制物单克隆抗体亲和层析柱分离的C_1抑制物性质初探[J].免疫学杂志.1991

[10].寿成超,董志伟,刘培楠.经蛋白A连接于琼脂糖的单克隆抗体亲和层析柱用于抗独特型抗体的纯化[J].生物化学杂志.1990

论文知识图

可溶性蛋白的亲和层析纯化图谱介导的人T细胞IL-2基因表达调控的信...抗人C1q单克隆抗体亲和层析柱进...HSP70抗体亲和层析柱分离HSP70...不同浓度海藻糖封闭液与传统封闭液对...不同浓度海藻糖封闭液与传统封闭液对...

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