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葫芦素B对IL-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响

论文摘要

目的明确葫芦素B对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤及胞外基质代谢紊乱的影响。方法用不同浓度(0.5、1、5、10、20μmol/L)的葫芦素B处理小鼠软骨细胞,随后用IL-1β(10μg/L)处理。采用CCK-8法检测细胞活性,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)及Caspase-3的活性,确定葫芦素B最佳处理浓度。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞胞外基质代谢相关的Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及蛋白多糖aggrecan、基质金属蛋白酶(MMP)-3及MMP-13的mRNA水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测MMP-3、MMP-13、前列腺素E2(PGE2)的水平,同时检测一氧化氮(NO)的产生;采用Western blot分析葫芦素B对IL-1β介导的软骨细胞中核因子(NF)-κB信号通路活化的影响。结果葫芦素B剂量依赖性地减弱IL-1β对软骨细胞存活的抑制效应(P<0.05),同时抑制IL-1β诱导的LDH释放、细胞凋亡及Caspase-3活性(P<0.05),10μmol/L是其最佳实验剂量。与IL-1β处理组相比,葫芦素B处理可减缓IL-1β对CollagenⅡ、aggrecan的mRNA表达抑制效应(P<0.05)。此外,葫芦素B还可抑制IL-1β诱导的MMP-3及MMP-13的mRNA表达及释放(P<0.05),降低炎性介质NO、PGE2的产生(P<0.05)。同时,IL-1β可明显上调软骨细胞中p-IκB、p-p65 NF-κB的表达,而葫芦素B则可抑制上述分子的表达(P<0.05)。结论葫芦素B可能通过阻断NF-κB信号通路的激活抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤及代谢紊乱,提示其具有潜在的抗骨关节炎的功效。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要试剂与仪器
  •   1.2 细胞的培养和处理
  •   1.3 CCK-8检测细胞活力
  •   1.4 流式细胞术检测细胞凋亡
  •   1.5 LDH检测
  •   1.6 Caspase-3活性分析
  •   1.7 qRT-PCR检测mRNA水平
  •   1.8 ELISA分析
  •   1.9 NO浓度检测
  •   1.1 0 Western blot检测蛋白表达
  •   1.1 1 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1CuB抑制IL-1β诱导的软骨细胞损伤
  •   2.2CuB对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响
  •   2.3CuB对IL-1β诱导的软骨细胞中CollagenⅡ和aggrecan mRNA表达的影响
  •   2.4CuB对IL-1β诱导的软骨细胞分解代谢相关的MMPs表达的影响
  •   2.5CuB抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎性介质NO、的释放
  •   2.6CuB对IL-1β诱导的NF-κB信号通路活化的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王西彬,左瑞庭

    关键词: 软骨细胞,骨关节炎,白细胞介素,炎性介质,葫芦素

    来源: 天津医药 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 外科学

    单位: 河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)脊柱科,河南省中医院(河南中医药大学第二附属医院)风湿科

    分类号: R684.3

    页码: 1210-1214

    总页数: 5

    文件大小: 804K

    下载量: 74

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/3557b36892c2d1982992023a.html