贻贝足丝蛋白的汞、镉抗性及富集机制

贻贝足丝蛋白的汞、镉抗性及富集机制

论文摘要

为探究贻贝足丝蛋白黏附重金属的机理及分子机制,对翡翠贻贝足丝蛋白进行转录组测序分析,使用Trinity软件从头组装,获得73 571个UniGenes.翡翠贻贝足部的Uni Genes注释到基因本体(gene ontology,GO)数据库,共获得9 466个注释结果,通过基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库注释后,发现有955个UniGenes被注释到关于黏着斑蛋白的通路中,推测足丝蛋白吸附重金属的功能与其密切相关.由于Pvfp6半胱氨酸、组氨酸和酪氨酸含量高,该蛋白可能对重金属有结合作用.将pvfp6基因克隆到p ET-30a表达载体,转到大肠杆菌BL21 (DE3)表达.结果表明,含有pET-30a-pvfp6质粒的宿主具有一定的抗汞和抗镉能力,能分别在含Hg2+质量浓度为5 mg/L,或者含Cd2+质量浓度为160 mg/L的培养基中生长;重组菌对Hg2+和Cd2+的平衡富集量均高于对照组p ET-30a,分别为109. 89 mg/g和19. 27 mg/g.研究表明,足丝蛋白Pvfp6赋予了重组菌具有一定的抗汞和抗镉的能力,且富集能力增强.该研究可为海洋环境中重金属污染的生物治理奠定实验基础.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •     1.1.1 菌株与载体
  •     1.1.2 主要试剂
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 翡翠贻贝足部组织转录组测序
  •     1.2.2 编码基因pvfp6的PCR扩增及质粒的提取
  •     1.2.3 pvfp6基因工程菌的构建
  •     1.2.4 重组质粒的验证与蛋白表达
  •     1.2.5 重组菌对Hg2+和Cd2+生长抗性及富集研究
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 高通量测序以及转录组的筛选与功能注释
  •   2.2 基因pvfp6的PCR扩增及连接
  •   2.3 pvfp6基因重组子的验证
  •   2.4 Pvfp6蛋白的表达
  •   2.5 P6重组菌对Hg2+和Cd2+的抗性与富集
  • 结语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 凌文康,黄慧炜,刘冰,邓旭

    关键词: 基因工程,翡翠贻贝,足丝蛋白,基因克隆,转录组学,生物吸附,重金属

    来源: 深圳大学学报(理工版) 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅱ辑,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,海洋学,环境科学与资源利用

    单位: 深圳大学生命与海洋科学学院

    基金: 国家自然科学基金资助项目(51578339)~~

    分类号: X55;X174

    页码: 361-366

    总页数: 6

    文件大小: 685K

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