论文摘要
为建立快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的ELISA方法,本研究以纯化的PRRSV全病毒为包被抗原,利用抗北美型PRRSV M蛋白的特异性单克隆抗体为竞争抗体,经条件优化,建立了特异性检测北美型PRRSV的竞争ELISA（C-ELISA）方法。结果显示,最佳抗原包被量为660 ng/孔,待检血清样本稀释度为1∶2,竞争抗体最佳稀释度为1∶8。ELISA结果判定标准:血清样本抑制率PI≥25.65%时判定为阳性,PI<25.65%判定为阴性。特异性试验结果显示,该方法仅能检测北美型PRRSV,与PRV、PCV2、CSFV、PEDV、TGEV等猪病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法能检测出128倍稀释的阳性血清;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%。利用该方法对黑龙江地区收集的546份临床血清样品进行检测,PRRSV抗体阳性率达95.1%,与商品化IDEXX PRRSV试剂盒的符合率为95.8%。本研究建立的C-ELISA方法为PRRS的流行病学调查、临床上疫苗评估及免疫前后抗体水平监测提供了有效的检测手段。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李宛生,李敏华,杨建伟,田志军,王倩,冷超粮
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒,北美型,蛋白,竞争
来源: 中国预防兽医学报 2019年12期
年度: 2019
分类: 农业科技
专业: 畜牧与动物医学
单位: 南阳师范学院,北京爱德士元亨生物科技有限公司,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室
基金: 中国博士后科学基金面上项目(2017M610137),黑龙江省自然科学基金优秀青年项目(YQ2019C032),国家自然科学基金项目(31502097)
分类号: S858.28
页码: 1221-1226
总页数: 6
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标签：猪繁殖与呼吸综合征病毒论文; 北美型论文; 蛋白论文; 竞争论文;