姜广涛（黑龙江省鹤岗矿业集团有限责任公司肿瘤医院154100）
【关键词】结核病免疫检验临床意义【中图分类号】R52【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）36-0065-02结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病。结核菌可能侵入人体全身各种器官，但主要侵犯肺脏，称为肺结核病。结核病又称为痨病和“白色瘟疫”，是一种古老的传染病，自有人类以来就有结核病。
1结核分枝杆菌抗体(TBAb)1.1测定方法：标记免疫(酶标或金标)测定抗体；核酸分子杂交、PCR测定抗原。
1.2标本准备：血清，静脉血3ml不抗凝，或5ml红帽真空管或黄帽真空管静脉采血。
1.3参考范围：正常为阴性。
1.4临床意义：活动性肺结核和肺外结核多呈阳性，免疫功能低下者可呈阴性；其他分枝杆菌感染，麻风病也可呈阳性。对结核病诊断标记免疫法的敏感性约70％，特异性约95％；PCR的敏感性约99％，特异性约98％。不同方法有差异，须结合临床判断。
2嗜肺军团菌(LP)2.1检测方法：抗原检测：DFA、IFA、DNA探针或PCR；抗体检测：IFA、MA、ELISA。
2.2标本准备：抗原检测清水漱口后咯出气管深部痰，或留取支气管肺泡冲洗液、胸水、尿，或取肺组织活体检验。抗体检测：血清，静脉血3ml或5ml红帽真空管或黄帽真空管静脉采血。
2.3参考范围：抗原测定DFA法阴性。抗体测定ELISA法IgM－Ab阴性；IFA法小于和等于256倍稀释度，MA法小于和等于16倍稀释度。增高4倍值有意义。
2.4临床意义：1976年美国在费城召开退伍军人大会期间暴发的人群肺炎，证明由一种G一杆菌引起，特命名为嗜肺军团菌。已知军团菌有42个种、64个血清型。其中嗜肺军团菌的15个血清型是引起军团菌病的主要致病菌。嗜肺军团菌肺炎约占人群肺炎的1％～5％，是医院感染的重要病原体之一。非嗜肺军团菌如博兹曼军团菌(L.bozemanni)也可引起军团菌肺炎爆发流行。儿童军团菌感染有流感样前驱症状，随后发热，耳痛和皮疹较为常见。成人表现为流感样发热(Pontiac热)、眩晕、头痛、咳嗽、疲劳、关节痛和腹痛，可伴有低钠血症和血清CK升高。
严重者可发生MODS。细菌学培养需要特殊条件，混有杂菌不易生长，分离纯培养困难。病因学诊断主要靠抗原检测或血清学检测。直接免疫荧光抗体法(DFA)用荧光素标记抗体检测抗原，特异性和敏感性均较高，为快速诊断法。抗体检测缺乏快速法，间接荧光抗体法(IFA)特异性为75％左右，与鹦鹉热、拟杆菌(类杆菌)感染有交叉反应；免疫缺陷综合征如AIDS，因抗体多不升高，不易检出。微量凝集法(MA)为检测早期IgM抗体的过筛试验。德国推出检测尿广谱军团菌抗原的试剂盒，尿经浓缩后可提高敏感性。核酸分子杂交法被认为是目前鉴定军团菌的金标准。
3幽门螺杆菌(Hp)3.1检验方法：细菌学检验：普通染色(HE、Giemsa、银染色)或单克隆抗体组化染色，细菌分离培养。快速尿素酶试验(RUT)：Hp有强尿素酶活性，能分解尿素产生氨使指示剂变色。13C/14C－尿素呼吸试验(UBT)：口服13C/14C尿素在胃经Hp分解产生13CO2/14CO2由肺呼出，用闪烁计数仪测定，不适用于孕妇和儿童。15N－尿氨排泄试验口服15N尿素在胃经Hp分解产生15NH3由尿排泄，用闪烁计数仪测定[1]。ELISA、胶体金标记免疫检测卡或免疫印迹试验检测血清Hp抗体(HpAb)或粪便Hp抗原(HpSA)。
3.2标本准备：胃黏膜：纤维胃镜采取近幽门胃窦病变部位黏膜，用于细菌学检验、组织化学染色、尿素酶试验；由于Hp在胃内分布不均匀，应在胃体和胃窦部多点取材。UBT不受细菌分布影响，阳性率可高于RUT。检测前2周服用抗生素、铋剂或质子泵抑制剂等会影响检验结果。血清：注射器或红帽真空管静脉采血5ml，用于HpAb检测。粪便：干净容器取新鲜粪便立即送检，用于HpSA检验。
3.3参考范围：正常为阴性。
3.4临床意义：Hp由Warren－Marshall从胃活检材料分离培养成功的G－螺旋状短杆菌。已知Helicobacter菌属有9个种类。根据是否产生毒素分为两种类型：Hp－I和Hp－Ⅱ。Hp－I为产细胞毒素型，可产生空泡细胞毒素A(vacuolatingcytotoxinA，vacA)是一种Mw为87kD的蛋白及细胞毒素相关基因A蛋白(cytotoxinassociatedgeneA，cagA)Mwl28kD。cagA仅存在于vacA阳性的菌株中，称cagA(+)Hp。是Hp致病性的标志，是慢性活动性胃炎和胃癌的重要致病因素，胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的主要致病因素，也是溃疡病发病的相关因素之一。Hp感染一方面降低胃黏膜对胃酸、胃蛋白酶侵袭的抵抗能力，另一方面刺激胃泌素分泌，增强胃黏膜侵袭性因素的作用。经验证明根除Hp治疗[2]，可缩短溃疡愈合时间和降低溃疡病复发率。Hp－Ⅱ为不产细胞毒素型，cagA阴性，称cagA(－)Hp。用单克隆抗体法可加以区别。
细菌学检验和尿素酶试验需用胃活检标本。尿素酶试验简便快速，敏感性约76％～100％，特异性约63％～100％。粪便抗原检测不受空肠弯曲菌和大肠弯曲菌的干扰，敏感性约98％，特异性约88％，与13C/14c尿素呼吸试验一致率达95.6％。PCR法需用胃黏膜活检材料，有假阳性和假阴性；假阳性由于污染所致，假阴性则因存在PCR阻断物或标本取材制备不当，口腔产尿素酶菌也有干扰。
参考文献[1]胡忠义.结核病免疫学诊断进展.中国防痨杂志，2002，24（增刊）：19-21.[2]黎明强;伍传仁.结核病防治研究新进展.职业与健康.2009年第03期.