导读:本文包含了纺锤体组装论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:纺锤,减数,细胞,检查点,激酶,小鼠,蛋白。
纺锤体组装论文文献综述
周晴,王思敏,王倩,翁静,梁元晶[1]（2019）在《小鼠卵母细胞减数分裂过程中新型微管蛋白ε-tubulin稳定表达并与纺锤体的组装和维持相关》一文中研究指出目的研究新型微管蛋白ε-tubulin在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的蛋白表达、亚细胞定位及其与纺锤体的相关性。方法用Western blot法检测ε-tubulin在小鼠卵母细胞减数分裂各个时期的蛋白表达;免疫荧光染色分析ε-tubulin在减数分裂进程中的亚细胞定位模式及其与纺锤体的相关性。结果ε-tubulin在小鼠卵母细胞减数分裂各个时期均有稳定的蛋白表达,在减数分裂前期均匀分布在细胞核中,在生发泡破裂后直到第二次减数分裂中期始终保持与纺锤体微管的共定位特性,并持续存在于染色体上。ε-tubulin对纺锤体毒性药物Taxol和Nocodazole敏感并呈现出与微管一致的反应性。结论小鼠卵母细胞内新型微管蛋白ε-tubulin稳定表达并与纺锤体的组装和维持相关。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2019年04期）
唐峰,张羽,孙少琛[2]（2017）在《Kif4a在小鼠卵母细胞中对于纺锤体组装以及染色体排列的调控》一文中研究指出作为驱动蛋白家族中的一员,Kif4a已经被报道参与有丝分裂中一系列细胞内进程,例如染色体的凝集以及胞质分裂。然而,Kif4a在减数分裂中的作用尚未可知。在此次研究中,我们通过敲低实验来探索Kif4a在卵母细胞减数分裂中的作用。通过免疫荧光染色,我们发现Kif4a在小鼠卵母细胞减数分裂中富集在纺锤体周围。此后,通过mopholino显微注射特异性敲低Kif4a,我们发现极体排出异常。进一步的研究表明Kif4a在小鼠卵母细胞中可能影响纺锤体的形态以及染色体的排列,而这有可能是由于Kif4a对于微管蛋白乙酰化水平的调控导致的。我们还发现在敲低Kif4a的卵子中非整倍体细胞增多,而这有可能是由于微管与动粒链接缺失导致的。通过westernblot,我们发现在老化老鼠卵子中,Kif4a蛋白量下降,这表明Kif4a与老化引发的非整倍细胞现象有关。综上,这些结果表明Kif4a通过调控纺锤体的组装以及染色体的正确分离从而调控小鼠卵母细胞的减数分裂,并且Kif4a的缺失可能与老化卵子中的非整倍细胞现象有关。(本文来源于《中国生理学会生殖科学专业委员会—中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会暨“生殖科学专业委员会第二次学术交流会”和“生殖生物学分会第十六次学术年会”论文集》期刊2017-08-25）
谢旺清[3]（2017）在《MERIT40-Tankyrase1相互作用对纺锤体组装影响的研究》一文中研究指出高等真核细胞通过有丝分裂复制后的两条染色体通过染色体分离的方式精确分配到两个子代细胞中,对维持基因组稳定性起着常重要的作用。有丝分裂依赖于微管为基础的双极纺锤体的组装和功能。细胞内多种蛋白翻译后修饰参与了这个过程的严密调控,包括磷酸化、泛素化和ADP核糖基化等。其中,泛素化是最为重要的一种蛋白质翻译后修饰,可调控蛋白质分子的定位、转运和相互作用,参与包括有丝分裂在内的诸多生物学过程。与其它翻译后修饰一样,泛素化是一个动态可逆的过程,泛素分子或泛素链可以被去泛素化酶水解,从而调控蛋白分子的泛素化水平和功能。BRISC是一个K63连接特异的去泛素化酶,由MERIT40、BRCC36、BRCC45和ABRO1组成,参与细胞内多个生物过程,如抗病毒免疫调控、炎性反应和纺锤体组装等。但它在纺锤体组装中的作用和机制还不是十分清楚。我们通过免疫荧光、免疫共沉淀、Pull Down、western blot等实验研究发现:(1)Tankyrase 1与MERIT40、BRCC36相互作用并定位于纺锤极;(2)RXXPEG是MERIT40纺锤极定位、MERIT40与Tankyrase 1相互作用必需的;(3)Tankyrase 1的亚结构域ARC V在Tankyrase 1与MERIT40-BRCC36相互作用中起主要作用;(4)MERIT40的RXXPEG突变体R28A呈现有丝分裂表型缺陷(5)Tankyrase 1在有丝分裂期可以被K63连接泛素化修饰,其修饰水平受MERIT40去泛素化酶复合物负性调控。RXXPEG突变削弱或破坏MERIT40与Tankyrase 1的相互作用,引起Tankyrase 1的K63连接泛素化水平显着增高,这可能进一步导致其PAR修饰酶活性失调,最终影响细胞纺锤体组装功能。(本文来源于《深圳大学》期刊2017-06-30）
武孟娟[4]（2017）在《裂殖酵母中蛋白磷酸酶PP2A参与纺锤体组装检验点沉默功能的研究》一文中研究指出在细胞进行有丝分裂的过程中,染色体需要精确地被分离到两个子细胞内以维持基因组的稳定性。一旦动粒和微管发生错误连接或者动粒受到两端微管的拉力不均衡时,细胞就会激活SAC并阻止细胞进入后期,直至所有的染色体都被来自两极的微管正确连接,并发生双极定向之后,SAC才能失活,进而解除对细胞中后期转换的抑制,促使姐妹染色单体的分离和有丝分裂的退出。已有研究表明,在裂殖酵母细胞中磷酸酶PP1(Dis2)通过与动粒蛋白Spc7相互作用在纺锤体组装检验点沉默中发挥作用。通过测量细胞中纺锤体微管的长度来统计细胞群体中被阻断在前中期的细胞的比例,以及利用荧光显微镜观察APC的底物CyclinB的降解情况,我们验证了蛋白磷酸酶PP1(Dis2)对于纺锤体组装检验点沉默确实是必需的。通过对裂殖酵母中PP2A不同亚基缺失突变体的研究,我们发现PP2AB56缺失的菌株也表现出微弱的纺锤体组装检验点沉默的缺陷,虽然这种效应远远不及PP1(Dis2)缺失的菌株明显。这可能与PP2A在后期的活性较低是相关联的。考虑到裂殖酵母细胞中两个磷酸酶发挥活性的时期的不同,我们猜测如果将PP2A强制定位于动粒是否会代替PP1(Dis2)发挥作用,结果发现,仅仅过表达而不需要强制定位PP2A就可以部分补偿Dis2缺失带来的的纺锤体组装检验点沉默缺陷,而且这种效应随着PP2A B56过表达强度的增强而逐渐增强。我们认为,在裂殖酵母中蛋白磷酸酶PP1(Dis2)通过动粒蛋白Spc7及驱动蛋白K1p5-K1p6复合物定位于动粒在纺锤体组装检验点沉默中发挥作用。而在其缺失的情况下,磷酸酶PP2A也能代替其在纺锤体组装检验点沉默中发挥作用。因而,与哺乳动物中的情况不同,裂殖酵母PP2A可能只是辅助PP1在锤体组装检验点沉默中发挥作用。(本文来源于《厦门大学》期刊2017-04-01）
易子云[5]（2017）在《Kif2a调节小鼠卵母细胞纺锤体组装和减数分裂成熟进程的研究》一文中研究指出目的和意义:Kif2a作为微管解聚酶,在有丝分裂中的双极纺锤体的形成,染色体联会与分离,纺锤体极联合中起到重要作用。到目前为止,Kif2a是否参与减数分裂过程中调节纺锤体组装、染色体运动及分离等仍未知。本研究中,我们研究了 Kif2a在小鼠卵母细胞减数分裂过程中表达、定位和功能。方法:取6-8周ICR雌性小鼠的GV期卵母细胞体外培养;首先对各期卵母细胞进行免疫印迹检测Kif2a蛋白表达、免疫荧光检测Kif2a定位;接着用免疫荧光试验检测Taxol和Nocodazole处理后的中期卵母细胞,以明确Kif2a与微管动力的关系;对卵母细胞进行Kif2asiRNA显微注射,抑制其蛋白表达后采用染色体铺片、冷处理、免疫荧光、免疫印迹等方法研究其在减数分裂成熟中具体作用。叁次独立重复的实验用平均数±标准差表示。用SPSS 17.0软件进行差异分析,采用独立样本T检验。P<0.05被定义为差异有显着统计学意义。用ZEN(2012)软件进行荧光强度数据分析。实验结果:一、Kif2a作为微管解聚酶调节减数分裂纺锤体的组装和染色体排列Western blot结果示:Kif2a在减数分裂成熟各时期均有表达,GV期表达水平较低,从GV期到MⅠ期逐渐上升,MⅡ期有所下降。免疫荧光显示:GV期Kif2a定位于生发泡内。GVBD后,Kif2a聚拢于染色体周围,且染色体着丝粒上检测到较弱信号。MⅠ期和MⅡ期,Kif2a主要定位于纺锤体,并于纺锤体两极及染色体着丝粒处富集。TⅠ期,Kif2a富集于细胞中体上。染色体铺片显示,MⅠ期和MⅡ期Kif2a信号位于染色体内着丝粒处。Taxol处理后,纺锤体微管蛋白高度聚集,并在胞内形成大量胞质星体。免疫荧光发现,Kif2a信号和α-tubulin信号出现重迭,且高度集中在异常的纺锤体极、胞质星体和着丝粒上。以上定位提示,Kif2a可能参与调控纺锤体组装和染色体运动。利用siRNA干扰Kif2a表达后,导致纺锤体严重缺陷(大多数为无极、单极,其次为多极和变宽的纺锤体);影响卵母细胞纺锤体向皮质迁移;并出现染色体排列异常(延迟分裂和完全排列异常的染色体)。γ-tubulin作为MTOC相关蛋白,是参与减数分裂中微管成束和纺锤体组装的重要蛋白。在Kif2a降调组,γ-tubulin从纺锤体的两极脱落且不规则散布于纺锤体微管或分散于胞浆中。由此推断,Kif2a可能参与纺锤体极聚集。冷处理后,在Kif2a降调组MⅠ期卵母细胞纺锤体中的α-tubulin荧光强度较强,显着高于对照组;说明Kif2a通过其微管解聚酶活性,发挥对微管的解聚作用,参与纺锤体组装调节。二、Kif2a参与小鼠卵母细胞减数分裂进程调控降调Kif2a影响纺锤体组装,引起小鼠卵母细胞第一次减数分裂Pro-MⅠ/MⅠ期阻滞、第一极体排出率下降、大极体排出率增加。我们进一步探究:染色体是否可以发生正确分离。染色体铺片发现,实验组同源染色体未分离;而对照组同源染色体已经分离,提示减数分裂已进入后期完成阶段。接下来研究了纺锤体检验点(SAC)的重要成分Bub3的分布。Kif2a降调组卵母细胞即使培养10小时,仍阻滞于Pro-MⅠ/MⅠ期,并在染色体上检测到Bub3信号,提示SAC被激活;而对照组卵母细胞进入AI期,且未检测到Bub3信号。CyclinB1的降解和MPF活性缺失是卵母细胞突破MI期进入后期的必要条件。我们将Kif2a降调组和对照组卵母细胞培养10小时,对CyclinB1进行免疫印迹检测。Kif2a降调后,CyclinB1水平较对照组显着升高,提示:Kif2a降调引起CyclinB1降解异常,从而引起中/后期转化受阻。将Kif2a降调组和对照组细胞培养8.5小时后进行鬼笔环肽-FITC染色发现,对照组染色体位于细胞边缘且检测到微丝帽形成。Kif2a降调组染色体位于细胞中央,未检测到微丝帽形成。可见Kif2a敲减引起微丝帽形成受损。结论:我们研究结果显示:Kif2a可能作为微管解聚酶和微管组织中心相关蛋白,在小鼠卵母细胞减数分裂过程中纺锤体的组装与迁移、染色体排列、微丝帽形成和第一极体排出中起到重要作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2017-03-20）
杨笑柳,剧世强,芮荣[6]（2016）在《Aurora-A抑制对猪卵母细胞MⅠ期纺锤体组装的影响》一文中研究指出引言/目的纺锤体是细胞分裂过程中形成的重要细胞器,其结构在进化上高度保守,是染色体正确排列和分离的基础,在细胞分裂后期染色体分离过程中具有重要作用。非动力蛋白和动力蛋白在丝/苏氨酸蛋白酶磷酸化的作用下被激活,从而促进纺锤体在时空上的编排。Aurora激酶是一类丝/苏氨酸激酶,主要有Aurora-A、-B和-C叁种。Aurora-A在有丝分裂进程中发挥了重要的调节作用,但在哺乳动物卵母细胞减数分裂进程中的作用和机制迄今(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十八届学术研讨会暨中日韩第四届动物繁殖学术交流会论文集》期刊2016-08-18）
杨笑柳,剧世强,崔盼盼,陈长超,芮荣[7]（2016）在《Aurora-A抑制对猪卵母细胞MⅠ期纺锤体组装的影响》一文中研究指出[目的]本试验旨在探究Aurora-A抑制对猪卵母细胞成熟和纺锤体组装的影响及潜在机制。[方法]猪GV期卵母细胞分组进行体外成熟培养,在各组中分别添加0、1、3和5μmol·L~(-1)Aurora-A特异性抑制剂MLN8054,观察其对卵母细胞发育与成熟的影响及纺锤体结构的变化;免疫印迹检测磷酸化Aurora-A和TACC3的表达。[结果]Aurora-A抑制导致猪卵母细胞成熟明显受阻(P<0.05),且主要阻滞在Pro-MⅠ期及MⅠ期;MⅠ期纺锤体形态明显异常,出现单极或多极纺锤体,异常率显着上升(P<0.05)。Aurora-A抑制后,猪卵母细胞磷酸化Aurora-A和酸性卷曲转化相关蛋白3(TACC3)表达水平显着下降(P<0.05)。[结论]MLN8054处理后,猪卵母细胞减数分裂进程和纺锤体组装受阻,并抑制了磷酸化Aurora-A和其下游蛋白磷酸化TACC3的表达。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2016年04期）
崔城,秦鑫,纪晓菁,杨裕鑫,于秉治[8]（2015）在《14-3-3ε调节小鼠受精卵纺锤体组装》一文中研究指出目的:研究14-3-3ε蛋白调节小鼠受精卵纺锤体组装的作用。方法:采用间接免疫荧光实验检测1-细胞期受精卵14-3-3ε和α-微管蛋白的亚细胞定位;利用显微注射方法将14-3-3εsi RNA注射入1-细胞期受精卵,观察小鼠受精卵纺锤体形态及检测Polo样激酶1(Plk1)的活性。结果:14-3-3ε和α-微管蛋白在G1期、S期和G2期卵中主要共定位于细胞质,M期卵14-3-3ε主要位于细胞质皮质。小鼠受精卵注射14-3-3εsi RNA后导致异常形态纺锤体形成及Plk1活性下降。结论:14-3-3ε蛋白在调节小鼠受精卵纺锤体组装中发挥重要作用。(本文来源于《生殖与避孕》期刊2015年05期）
白圆圆[9]（2015）在《ROS激活纺锤体组装检查点的作用机制研究》一文中研究指出氧自由基具有非常强的氧化作用。活性氧簇(Reactive Oxygen Species,ROS)是这一类物质的统称,主要包括过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子和羟基自由基等。通常情况下,人们会把ROS与疾病和衰老联系,因为它能够氧化细胞中许多组分,包括核酸、脂质和蛋白质等,而这些物质的氧化最终会导致细胞死亡与癌变。许多研究报道称,ROS与许多病症相关,包括缺血型再灌注损伤、动脉粥样硬化、激素缺陷导致的癌症和慢性炎症等等除了与一些疾病相关。ROS是细胞内正常的代谢副产物,已有报道其在细胞周期中的作用及影响。本课题就ROS在有丝分裂时期的作用做了初步探讨,首次提出了活性氧簇(主要是H2O2)对于有丝分裂纺锤体组装检查点(Spindle Assembly Checkpoint,SAC)的激活。细胞增殖过程是通过细胞周期往复进行的。细胞的有丝分裂时期与间期组成了整个细胞周期。间期主要进行有丝分裂相关物质的积累,为细胞有丝分裂做准备。有丝分裂是细胞周期中最重要的生命活动,细胞经过有丝分裂来实现细胞的增殖,将染色体平均分配到两个子代细胞中,维持了遗传物质的稳定性。细胞增殖是细胞生命活动中最重要的特征之一,为了使其顺利进行,细胞内存在一系列的调控机制,使这一过程在严格的监控下无差错的完成。纺锤体组装检查点(SAC)是存在于有丝分裂前中期到中期的过渡阶段,是细胞有丝分裂时期的最重要的检查机制。其功能在于确保有丝分裂中期启动前所有染色体都被纺锤丝正确捕捉。细胞从有丝分裂前期到后期进行过程中,经过SAC的监控,当所有染色体被正确捕捉,一切工作妥当安排后,细胞才能顺利进入有丝分裂后期直至走出有丝分裂。当SAC信号产生后,作用于效应分子Cdc20,SAC蛋白Bu Rd1,Bu Rd3和Mad2与Cdc20结合形成有丝分裂检查点复合物(Mitotic Checkpoint Complex,MCC),MCC与后期促进复合物/周期体(Anaphase-promoting Complex/Cyclosome,APC/C)相互作用,使后者呈关闭构象而不能结合底物,导致后续进程不能顺利进行。SAC信号的产生主要来源于未被纺锤体正确捕捉的染色体,染色体上与纺锤体结合的动粒组分发生变化、微管组装异常以及动粒微管的结合受到影响,是细胞中SAC信号持续激活的源头。本文主要从动粒-微管的连接这一方面讨论ROS对SAC信号的激活,而CPC是这一过程中重要的复合物。CPC(Chromosomal passenger complex)参与有丝分裂时期的许多细胞活动,其早期主要定位于染色体,与一系列周期蛋白共同参与有丝分裂早期的调控,而后移位至纺锤体中心区域,参与调控胞质分离。CPC是由其核心激酶原件Aurora B与其它叁个负责调控与定位的蛋白(INCENP、Survivin和Borealin)组成。INCENP是CPC复合物组装的连接体,其氨基末端是复合物定位所必需的,与Survivin和Borealin的相关组分组成一个叁体束,共同决定CPC在着丝粒(有丝分裂早期)和纺锤体中心区域(有丝分裂后末期)的定位。而Aurora B是CPC误链接的动粒与微管。在有丝分裂时期,细胞需要精确的染色体分离过程,这需要动粒与纺锤体微管双向并且正确的结合。CPC复合物通过其激酶单元Aurora B在动粒-微管结合的错配与修复中发挥重要的作用。CPC复合物发挥动粒-微管错连修复作用的同时,产生许多未连接的动粒,这一信号被SAC识别,激活了SAC信号通路。本课题探讨了ROS激活SAC进而引起细胞有丝分裂时期阻滞的现象和机理,发现ROS处理细胞后,细胞停滞在有丝分裂早期而不继续向后进行胞质分裂。在探究其机理的过程中,我们发现,ROS的作用对微管的组装没有影响,但阻碍了CPC复合物中Aurora B激酶部分功能的发挥,故而我们推测,ROS影响了Aurora B的部分激酶活性,妨碍了它在动粒微管连接中的功能,从而激活SAC。主要本课题首次提出了ROS对于SAC激活的作用,进而对有丝分裂进程产生影响,并且在探寻其机理的过程中,从另外一个角度研究了Aurora B激酶在细胞有丝分裂时期的功能。研究目的:本课题旨在揭示在细胞有丝分裂过程中ROS的作用,探究ROS对于细胞除了DNA氧化损伤外的影响,并寻找其作用机制。大部分的文献报道都聚焦于ROS对于细胞的氧化损伤,以及与疾病发生的关系。我们主要探究了ROS对于细胞周期进程的影响,越过它在间期对DNA氧化损伤,阐述了ROS在有丝分裂时期对有丝分裂进程的影响,并初步探究了它的效应靶点。研究内容:本课题研究了ROS对于细胞有丝分裂进程的影响,分析相关的现象并探究其作用机理。主要研究了H2O2对于细胞有丝分裂状态和相关组分的影响,并分析了与SAC激活相关的CPC复合物的功能。最终将目光定于Aurora B激酶的活性,探究了ROS的作用机理。实验方法:实验中我们用H2O2与VK3作为ROS的来源刺激细胞,对细胞核进行染色后用荧光显微镜观察核的状态,并统计细胞的有丝分裂比例,以此来研究ROS对于细胞有丝分裂进程影响的现象。并MTT试剂盒检测了不同细胞对于H2O2的耐受状况。在探究机理过程中,我们用免疫荧光实验方法观察微管组装以及Aurora B的定位,用免疫印迹的方法分析相关蛋白的分子水平以及修饰水平。实验结果:在H2O2处理下,以Hela s3为代表的一些细胞发生了有丝分裂期阻滞(不同的细胞对于H2O2的敏感程度不同)。VK3同样能对细胞产生与H2O2类似的作用。Aurora B激酶受到H2O2的影响较为显着,有丝分裂时期在着丝粒上定位减弱,磷酸化水平降低等。同时我们发现,与Aurora B共同组成CPC复合物的INCENP蛋白的磷酸化水平亦在H2O2影响下发生下调。实验结论:本课题研究了ROS对于细胞有丝分裂进程的影响,初步得出结论:ROS影响了Aurora B激酶在动粒-微管结合过程中的功能,激活有丝分裂纺锤体组装检查点(SAC),进而引起细胞有丝分裂期阻滞。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2015-05-27）
凌有国[10]（2015）在《Mps1调控纺锤体组装检查点和胞质分裂机理研究》一文中研究指出有丝分裂过程可以分为有丝分裂前期、前中期、中期、后期和末期。在细胞的有丝分裂前期和有丝分裂中期之间存在一种叫纺锤体组装检查点(Spindle assembly checkpoint, SAC)的安全监督机制。该检查点的功能是确保染色体被纺锤体正确的捕捉并排列到有丝分裂中期板上；当存在未被纺锤体正确捕捉的染色体时,SAC便会激活,阻止有丝分裂中期向有丝分裂后期的启动。SAC功能缺陷会导致非整倍体(Aneuploidy)的产生,而非整倍体是肿瘤细胞的普遍现象,对肿瘤发生具有促进作用。因此,SAC功能的正确行使对于基因组稳定性的维持具有重要作用。单极纺锤体蛋白激酶1(Monopolar spindle 1, Mpsl)最初是在出芽酵母(Saccharomyces cerevisiase)中被发现,因其等位基因突变体中有单极纺锤极体形成而命名。Mps1是一个双特异性的蛋白激酶,可以底物磷酸化丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸,同时也能自身磷酸化。Mpsl的转录水平受E2F转录因子家族调控,其亚细胞定位受细胞周期调控：在G1期Mpsl主要定位在细胞质中,有丝分裂期Mps1则主要定位在着丝粒上。目前研究认为Mps1存在于SAC信号通路的上游,是SAC的必需基因,同时Mpsl也参与染色体中期排列、胞质分裂、中心体复制、DNA损伤等功能。Mpsl在多种人类肿瘤中高表达,研究表明利用特异性siRNA敲除Mps1或通过小分子化合物抑制Mps1激酶活性均能有效杀死肿瘤细胞而对正常细胞影响微弱；因此Mpsl很有可能成为新的抗肿瘤治疗靶标。研究报道Mpsl在多种肿瘤中高表达,然而高水平的Mpsl与肿瘤发生的关系目前并不清楚。我们发现Mpsl在结肠癌组织和多种肿瘤细胞中高表达,包括HelaS3,MCF-7,HepG2,SMMC7701以及SW480等肿瘤细胞。进一步我们通过构建在SW480中稳定过表达Flag-Mpsl的细胞系,以此细胞系为模型研究发现过表达Mpsl对SAC的激活功能影响微弱但对SAC的维持功能影响显着；与该结果一致的是,过表达Mpsl促进肿瘤细胞基因组不稳定性。这提示高水平Mpsl通过削弱SAC功能进而促进肿瘤发生。既然过表达Mps1削弱SAC功能并且促进基因组不稳定性,那么SAC是否为肿瘤细胞生存所必需?我们通过Mpsl特异性抑制化合物Reversine抑制Mpsl有丝分裂前中期后的激酶活性后,检测SW480、HT29、HCT116和LOVO这四种肿瘤细胞的生存能力,发现抑制Mpsl有丝分裂前中期后的激酶活性促进肿瘤细胞的死亡。随后我们利用CyclinB有丝分裂中期后降解的特性,将引导CyclinB有丝分裂中期后降解的功能序列10-107与Mpsl序列融合构建质粒degMps1,作为对照组同时将CyclinB序列10-107缺失D-box后与Mpsl序列融合构建质粒nondegMps1,进一步分别构建degMps1、nondegMps1在SW480中稳定过表达细胞系,以此细胞系为模型研究发现Mpsl有丝分裂中期后的缺失不影响肿瘤细胞的生存能力以及SAC功能。因此,SAC是肿瘤细胞存活不可缺少的元件。进一步研究我们发现通过Reversine抑制Mpsl激酶活性促进肿瘤细胞多核巨核化,而Mpsl有丝分裂中期后的缺失并不影响肿瘤细胞胞质分裂功能,有意思的是,Mpsl有丝分裂中期后的缺失促进PLK1和AuroraB的磷酸化,这提示抑制Mps1激酶活性通过缺失SAC促进肿瘤细胞多核巨核化。(本文来源于《安徽大学》期刊2015-05-01）
纺锤体组装论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
作为驱动蛋白家族中的一员,Kif4a已经被报道参与有丝分裂中一系列细胞内进程,例如染色体的凝集以及胞质分裂。然而,Kif4a在减数分裂中的作用尚未可知。在此次研究中,我们通过敲低实验来探索Kif4a在卵母细胞减数分裂中的作用。通过免疫荧光染色,我们发现Kif4a在小鼠卵母细胞减数分裂中富集在纺锤体周围。此后,通过mopholino显微注射特异性敲低Kif4a,我们发现极体排出异常。进一步的研究表明Kif4a在小鼠卵母细胞中可能影响纺锤体的形态以及染色体的排列,而这有可能是由于Kif4a对于微管蛋白乙酰化水平的调控导致的。我们还发现在敲低Kif4a的卵子中非整倍体细胞增多,而这有可能是由于微管与动粒链接缺失导致的。通过westernblot,我们发现在老化老鼠卵子中,Kif4a蛋白量下降,这表明Kif4a与老化引发的非整倍细胞现象有关。综上,这些结果表明Kif4a通过调控纺锤体的组装以及染色体的正确分离从而调控小鼠卵母细胞的减数分裂,并且Kif4a的缺失可能与老化卵子中的非整倍细胞现象有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
纺锤体组装论文参考文献
[1].周晴,王思敏,王倩,翁静,梁元晶.小鼠卵母细胞减数分裂过程中新型微管蛋白ε-tubulin稳定表达并与纺锤体的组装和维持相关[J].基础医学与临床.2019
[2].唐峰,张羽,孙少琛.Kif4a在小鼠卵母细胞中对于纺锤体组装以及染色体排列的调控[C].中国生理学会生殖科学专业委员会—中国动物学会生殖生物学分会第二次联合学术年会暨“生殖科学专业委员会第二次学术交流会”和“生殖生物学分会第十六次学术年会”论文集.2017
[3].谢旺清.MERIT40-Tankyrase1相互作用对纺锤体组装影响的研究[D].深圳大学.2017
[4].武孟娟.裂殖酵母中蛋白磷酸酶PP2A参与纺锤体组装检验点沉默功能的研究[D].厦门大学.2017
[5].易子云.Kif2a调节小鼠卵母细胞纺锤体组装和减数分裂成熟进程的研究[D].南方医科大学.2017
[6].杨笑柳,剧世强,芮荣.Aurora-A抑制对猪卵母细胞MⅠ期纺锤体组装的影响[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十八届学术研讨会暨中日韩第四届动物繁殖学术交流会论文集.2016
[7].杨笑柳,剧世强,崔盼盼,陈长超,芮荣.Aurora-A抑制对猪卵母细胞MⅠ期纺锤体组装的影响[J].南京农业大学学报.2016
[8].崔城,秦鑫,纪晓菁,杨裕鑫,于秉治.14-3-3ε调节小鼠受精卵纺锤体组装[J].生殖与避孕.2015
[9].白圆圆.ROS激活纺锤体组装检查点的作用机制研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2015
[10].凌有国.Mps1调控纺锤体组装检查点和胞质分裂机理研究[D].安徽大学.2015
论文知识图
![信号通路[24]](http://image.cnki.net/GetImage.ashx?id=1013224237.nh0014&suffix=.jpg)
