反义蜡质基因论文_周玲艳,姜大刚,李静,周海,庄楚雄

导读:本文包含了反义蜡质基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蜡质,基因,水稻,直链,淀粉,转基因,杆菌。

反义蜡质基因论文文献综述

周玲艳,姜大刚,李静,周海,庄楚雄[1](2013)在《水稻蜡质合成相关基因OsCER4自身启动子驱动的反义RNA转化植株获得》一文中研究指出水稻OsCER4基因编码脂肪醛脱羧酶,与拟南芥CER1基因高度同源,是否参与植物表面蜡质合成尚不清楚,为了探讨其功能,扩增了OsCER4基因起始密码子ATG上游约2 kb的序列作为该基因的启动子,以常规技术将启动子和OsCER4基因反义片段克隆到pCAMBIA双元载体1380中,采用农杆菌介导法转化粳稻品种中花11,并进行了转化苗OsCER4蛋白的表达量变化分析.结果表明,成功构建了由OsCER4自身启动子驱动的反义RNA载体,并通过农杆菌介导法成功转入水稻中花11中,多数OsCER4基因反义转化植株为阳性转化植株,后代分离比符合3∶1,反义RNA转化植株在蛋白水平上的表达量下降.(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2013年01期)

杨瑞,张红梅,任永刚,周永国,李建粤[2](2010)在《反义蜡质基因不同整合位点对降低稻米直链淀粉含量的影响及整合位点分析》一文中研究指出本研究以含有反义蜡质基因双拷贝整合转化子Sh3为材料,通过后代分离获得由单拷贝及仍然呈双拷贝整合转基因植株后,采用TAIL-PCR对这些后代进行T-DNA整合位点分析。结果显示,两个外源基因分别整合在Sh3转化子基因组中第3号染色体9127056~91266603bp处和第4号染色体9977226~9976939bp处。检测由Sh3转化子后代分离获得外源基因单拷贝以及双拷贝整合植株糙米直链淀粉含量,结果显示,非转基因对照糙米直链淀粉平均含量为12.83%,外源基因整合在第3和第4染色体上的单拷贝植株糙米直链淀粉平均含量分别为5.31%和11.83%,双拷贝整合植株糙米直链淀粉含量平均为3.8%。通过本研究不仅明确了反义蜡质基因不同整合位点对于降低糙米直链淀粉含量程度有不同的影响,同时也获得了一个能够使转基因水稻糙米直链淀粉含量降低较明显的位点。(本文来源于《分子植物育种》期刊2010年04期)

杨瑞[3](2010)在《利用含有双份反义蜡质基因拷贝的表达载体改良水稻食味品质的研究》一文中研究指出稻米食味品质是水稻的重要性状,食味品质的好坏在很大程度上是由食用稻米的淀粉决定的。稻米淀粉由直链淀粉和支链淀粉组成,是在一系列酶的作用下合成的,主要包括:ADPG焦磷酸化酶、淀粉分支酶、淀粉去分支酶、颗粒凝结型淀粉合酶(GBSS)、可溶性淀粉合酶。直链淀粉和支链淀粉的比例(一般可用直链淀粉含量衡量)是决定稻米食味的重要因素之一。其中,GBSS催化直链淀粉的合成,而GBSS是由Waxy基因编码,所以Waxy基因是研究稻米食味品质的重要基因之一。利用生物技术改良水稻食味品质仍是当前研究的热点,目前的报道主要是利用分子标记辅助选育和转anti-Waxy基因两类。本研究利用根癌农杆菌介导的共转化方法,将含有双份anti-Waxy基因拷贝的表达载体p13AWY-2和含有hpt抗性筛选基因和gus报告基因的pCAMBIA1301载体共转化两系不育系水稻261S,共有66块抗性愈伤组织分化出苗。对T0植株进行PCR分析,结果显示,在分化出苗的66个转化子中共获得了9个共转化子,共转化率为12%。对8个存活的共转化子的T1代植株进行性状观察和遗传分析,结果显示,有5个转化子:B2、B3、B17、C8和D2部分糙米呈蜡质状,D19、D8、C6糙米则为正常非蜡质性状,且B3、C8和D2的T1种子蜡质突变体与正常种子经x2检测符合3:1的分离比。通过对T1代种子GUS活性检测,以及对T1植株的PCR检测,筛选出不含有hpt基因和gus报告基因的转基因后代,同时获得了B2、B3、B17、C8和D2的纯合蜡质突变体转基因后代和D19、D8、C6的正常纯合转基因后代。通过对以上8个转化子纯合转基因后代内源Waxy基因表达分析,以及对胚乳淀粉的电镜观察,结果表明,与对照261S相比,B2、B3、B17、C8和D2后代中,内源Waxy基因在花粉和胚乳中的表达丰度都有较大程度的降低,而D19、D8、C6则略有降低。扫描电镜观察B3、B17纯合蜡质突变体后代的淀粉结构,发现其淀粉结构已发生改变。利用本研究获得的具有优良性状的转anti-Waxy基因水稻B3、B17,及对照261S分别和父本W香99075杂交,获得了叁组杂交稻组合:B3×W香99075、B17×W香99075和261S×W香99075。以261S×W香99075为对照,对其它两种杂交稻F1植株进行目的基因检测,结果显示,F1代植株是否具有anti-Waxy基因呈1:1分离。杂交稻B3×W香99075和B17×W香99075 F2稻谷糙米外观分析的结果经x2检测表明:蜡质状与正常状种子比例符合3:1分离比。对叁种杂交稻母本及杂交稻分别进行农艺性状、产量性状和糙米体积的分析,结果显示:与对照相比,转基因水稻单株净重均显着降低,其它农艺性状无明显差异,且糙米体积没有发生变化。两种新型杂交稻理化指标显示:与对照“闵优香粳”相比,“新闵优香粳”的糊化温度几乎没有变化,但直链淀粉含量比“闵优香粳”降低210%,胶稠度比“闵优香粳”提高37.8%。与前人利用anti-Waxy基因转化水稻研究比较,本研究主要在如下叁个方面具有创新性:(1)首次证实利用p13AWY-2表达载体能够更有效地降低稻米直链淀粉含量;(2)首次发现由anti-Waxy基因明显降低水稻糙米直链淀粉含量时,胚乳中淀粉粒结构也会发生变化;(3)首次解释了由anti-Waxy基因明显降低糙米直链淀粉含量会导致稻谷重量减轻的原因。(本文来源于《上海师范大学》期刊2010-04-01)

杨丽君,戎益泉,张善明,李建粤[4](2009)在《植物安全性表达载体的构建策略:以表达水稻反义蜡质基因的载体构建为例》一文中研究指出基于转基因作物的安全性考虑,在用于转化的表达载体上除了含有目的基因以及控制该目的基因表达的启动子和终止子外,最好不存在其它有可能存在安全性争议的DNA序列,由此培育的转基因植物可能将更易于被消费者所接受。本研究以pCAMBIA1300载体为基础,基因操作去除pCAMBIA1300质粒上的潮霉素抗性基因和花椰菜花叶病毒的35S启动子序列,构建了两种只含有水稻蜡质基因启动子引导蜡质基因反义片段的表达载体,p13AWY-1和p13AWY-2。其中p13AWY-1表达载体含有一个由水稻蜡质基因启动子、第一内含子、反义蜡质基因(W axy pro+intron1+anti-W axy)的融合基因单元;而p13AWY-2表达载体含有两个正向排列的W axy pro+intron1+anti-W axy融合基因单元。我们通过构建水稻反义蜡质基因安全性表达载体,试图为植物安全性表达载体的构建提供一种思路,为今后大规模商业化采用转基因技术改良农作物遗传特性提供安全的转基因方法。(本文来源于《分子植物育种》期刊2009年05期)

王新其,殷丽青,沈革志,徐丽,刘巧泉[5](2009)在《转反义蜡质基因纯合株系间直链淀粉含量与RVA谱关系分析》一文中研究指出【目的】排除以往水稻亚种或品种间RVA谱分析时存在着的遗传背景差异,分析转反义蜡质基因不同直链淀粉含量纯合株系间RVA各特征值的差异,更清楚地揭示直链淀粉含量与RVA谱特征值的关系。【方法】采用根癌农杆菌介导共转化和花药培养相结合的方法,培育含有反义蜡质基因的花培纯系,并对各株系进行直链淀粉含量和RVA谱测定和分析,通过比较RVA谱曲线图形及RVA谱特征值的显着性测定,分析相同遗传背景条件下直链淀粉含量对各RVA谱特征值的作用。【结果】在武运粳7号转基因后代中,获得了只含反义蜡质基因、不含潮霉素抗性标记的花培株系77个,经T1H1和T1H2二代直链淀粉含量测定,有19个株系的直链淀粉含量接近对照(对照16.0%);有50个株系直链淀粉含量比对照下降1%~5%,其中,直链淀粉含量在11.0%~13.9%有30个株系;另外,有8个株系的籽粒为蜡质状,直链淀粉含量降至3.1%~4.0%。不同直链淀粉含量纯系间RVA谱分析发现存在二种RVA谱曲线图形,直链淀粉含量在3.1%~4.0%株系明显不同其它株系,也不同于常规糯稻;对RVA谱曲线图形相同、直链淀粉含量不同的株系进行分类比较,低直链淀粉含量株系的RVA谱曲线最终表现为曲线逐步上升,但没有超越第1个峰值。对不同直链淀粉含量株系类群的各RVA谱特征值进行显着性测定,3.1%~4.0%株系群有5个特征值与其它二个株系群存在极显着差异;11.0%~13.5%株系群有3个特征值与对照16.0%组存在极显着差异;直链淀粉含量与RVA谱各特征值之间优化数学模型显示:峰值时间和消减值与直链淀粉含量关系较为密切。【结论】导入反义蜡质基因,能导致直链淀粉含量降低;通过花药培养能快速获得纯合株系;直链淀粉含量差异不仅影响到各RVA谱特征值,而且还造成RVA谱曲线不同。(本文来源于《中国农业科学》期刊2009年06期)

丁盛[6](2009)在《反义蜡质基因转化籼稻9311的研究》一文中研究指出水稻(Oryza sativa L.)是我国的主要粮食作物之一,约有二分之一的人口以其为主要粮食。大部分水稻品种的直链淀粉含量都偏高,尤其以籼稻为甚,而在我国种植的水稻中有80%是籼稻。直链淀粉的含量直接影响着稻米的口感,含量高,米饭干燥蓬松,色泽滞暗,米质硬,食味不佳,而稻米的口感好坏是衡量稻米品质的主要指标。因此,人们一直希望通过适当降低直链淀粉含量达到改良稻米品质的目的。本研究以籼稻品种9311(杨稻6号)为材料,利用分别携带反义蜡质基因的p13w8质粒和含有潮霉素抗性基因的p1300质粒对受体材料进行了共转化研究。系统地探讨了影响籼稻植株再生体系的主要因素,建立了稳定、高效的籼稻9311植株再生体系;探讨了农杆菌介导法遗传转化的主要影响因素;建立了籼稻9311的遗传转化体系;将反义蜡质基因和潮霉素抗性基因通过共转化方法导入了籼稻9311,并进行了初步检测。本研究主要结论如下:1.分析了一系列的影响愈伤组织诱导的因素,如不同的基本培养基、不同的消毒方法、不同的2,4-D浓度对愈伤组织的诱导率的影响,并研究了不同的继代时间对愈伤组织的生长情况的影响,取得了较好的效果。并建立了适合籼稻9311植株的再生体系。2.通过对影响农杆菌侵染的诸多因素,如愈伤组织生理状态、农杆菌菌液浓度、干燥处理时间、共培养时间、抗生素的浓度、潮霉素浓度等参数的优化筛选,取得了理想的结果,建立了较好的适合籼稻9311的农杆菌介导的遗传转化体系。3.通过共转化方法将反义蜡质基因和潮霉素基因导入籼稻9311中,分化出了18株潮霉素抗性植株。PCR检测初步表明,有11株抗性植株其选择标记基因和反义蜡质基因都整合到转基因水稻的基因组中。RT-PCR检测结果表明,有5株抗性植株成功表达。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2009-04-20)

吴顺,萧浪涛,刘清,沈革志,王若仲[7](2008)在《共转化获得无抗性标记的转反义蜡质基因籼稻》一文中研究指出【目的】利用转基因技术将反义蜡质基因导入籼稻成熟胚愈伤组织中,改良籼稻稻米直链淀粉含量。【方法】用根癌农杆菌介导的方法将p13W8质粒(含反义蜡质基因)和pCAMBIA1300质粒(含抗潮霉素抗性基因)对2个籼稻品种的成熟胚愈伤组织进行遗传共转化。【结果】供试材料愈伤组织继代培养18~24d后具有较高的转化频率和分化频率,可作为共转化的良好受体;抗性愈伤组织PCR检测结果表明,抗潮霉素抗性基因的阳性检测率为97.6%,反义蜡质基因的阳性检测率为27.1%。在46株转基因潮霉素抗性植株中,反义蜡质基因阳性株为5株,占转基因植株的10.9%。经PCR检测,发现上述4个株系T1群体中发生抗潮霉素抗性基因和反义蜡质基因片段的分离,从286个T1单株中筛选到了39个单株只带反义蜡质基因片段,而无潮霉素抗性基因的转基因植株,占T1单株总数的13.6%。部分转反义蜡质基因植株种子的直链淀粉含量有不同程度的降低。【结论】通过农杆菌介导的遗传共转化方法,将反义蜡质基因Waxy导入籼稻成熟胚愈伤组织,获得了直链淀粉含量明显降低的仅含反义蜡质基因籼稻株系。(本文来源于《中国农业科学》期刊2008年10期)

刘清,吴顺,沈革志,彭琼,刘桃李[8](2008)在《转反义蜡质基因水稻亲本后代性状分析》一文中研究指出以单质粒转化的粳稻广粳一号和双质粒共转化的籼稻01早5202所获得的转反义蜡质基因水稻后代为供试材料,通过潮霉素抗性、PCR检测等手段分析了外源基因的遗传分离特性,同时,还分析了转基因材料的直链淀粉含量、waxy蛋白含量的变化特性。结果表明,无论是采用标记基因(hpt)与目的基因(Anti-sense waxy)连锁的单质粒转化,还是采用双质粒共转化,其供试的后代植株材料都发生了外源基因分离现象,且转基因植株材料的直链淀粉含量都有所下降,有些单株的直链淀粉含量已降至10%(质量百分比)以下,远低于对照(其直链淀粉含量为22.04%);SDS-PAGE检测结果显示,供试的转基因材料的waxy蛋白的含量与对应的直链淀粉含量呈正相关性。(本文来源于《遗传》期刊2008年09期)

李建粤,吕英海,杨丽君,周永国,李双艳[9](2008)在《转反义蜡质基因‘湘晴’及其杂交稻米的直链淀粉含量研究》一文中研究指出利用根癌农杆菌介导将反义蜡质基因(anti-Waxy)导入叁系恢复系湘晴水稻获得转基因植株.从T1代外源基因呈单拷贝整合的转基因湘晴水稻中选取3个稻米直链淀粉含量降低较明显的单株继续种植得到纯合后代.以纯合转基因植株及湘晴水稻(对照)为恢复系分别与寒丰不育系杂交,获得4组杂交稻后代(F2).3个T3代纯合转基因湘晴水稻糙米(T4)直链淀粉含量分别为14.42%、13.96%和14.72%,对照为16.04%;3组由转基因湘晴水稻为父本杂交制种后代(F2)糙米直链淀粉含量分别为14.53%、13.77%和14.64%,对照杂交稻(F2)为16.22%.研究表明,导入湘晴水稻中的反义蜡质基因不仅能够降低湘晴稻米直链淀粉含量,还能够进一步抑制杂交后代的稻米直链淀粉合成.(本文来源于《西北植物学报》期刊2008年06期)

李建粤,毛万霞,范士靖,吕英海[10](2007)在《导入反义蜡质基因改良水稻稻米的食味品质和营养品质》一文中研究指出经PCR、Southernblot和稻米GUS检测,蜡质基因反义片段与gus构成的融合基因已整合到8株水稻基因组中,并能正确表达。通过稻米GUS染色追踪分析获得转反义蜡质基因纯合后代。将转基因植株的稻米送农业部稻米及制品质量监督检验测试中心进行糙米蛋白质含量和直链淀粉含量测定。结果显示:(1)在转反义蜡质基因纯合的超2-10粳稻后代中,大多数单株糙米在直链淀粉含量降低的同时,蛋白质含量有不同程度提高,糙米蛋白质含量和直链淀粉含量呈显着负相关关系;(2)对照糙米直链淀粉平均含量和糙米蛋白质平均含量分别为13.4%和9.5%。在转基因植株中,稻米直链淀粉含量最低的为11.4%,而蛋白质含量也相对最高,为13.5%。本试验结果表明在水稻中导入反义蜡质基因不仅能够降低水稻稻米的直链淀粉含量,还有可能提高水稻稻米的蛋白质含量。(本文来源于《植物研究》期刊2007年01期)

反义蜡质基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本研究以含有反义蜡质基因双拷贝整合转化子Sh3为材料,通过后代分离获得由单拷贝及仍然呈双拷贝整合转基因植株后,采用TAIL-PCR对这些后代进行T-DNA整合位点分析。结果显示,两个外源基因分别整合在Sh3转化子基因组中第3号染色体9127056~91266603bp处和第4号染色体9977226~9976939bp处。检测由Sh3转化子后代分离获得外源基因单拷贝以及双拷贝整合植株糙米直链淀粉含量,结果显示,非转基因对照糙米直链淀粉平均含量为12.83%,外源基因整合在第3和第4染色体上的单拷贝植株糙米直链淀粉平均含量分别为5.31%和11.83%,双拷贝整合植株糙米直链淀粉含量平均为3.8%。通过本研究不仅明确了反义蜡质基因不同整合位点对于降低糙米直链淀粉含量程度有不同的影响,同时也获得了一个能够使转基因水稻糙米直链淀粉含量降低较明显的位点。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

反义蜡质基因论文参考文献

[1].周玲艳,姜大刚,李静,周海,庄楚雄.水稻蜡质合成相关基因OsCER4自身启动子驱动的反义RNA转化植株获得[J].华南农业大学学报.2013

[2].杨瑞,张红梅,任永刚,周永国,李建粤.反义蜡质基因不同整合位点对降低稻米直链淀粉含量的影响及整合位点分析[J].分子植物育种.2010

[3].杨瑞.利用含有双份反义蜡质基因拷贝的表达载体改良水稻食味品质的研究[D].上海师范大学.2010

[4].杨丽君,戎益泉,张善明,李建粤.植物安全性表达载体的构建策略:以表达水稻反义蜡质基因的载体构建为例[J].分子植物育种.2009

[5].王新其,殷丽青,沈革志,徐丽,刘巧泉.转反义蜡质基因纯合株系间直链淀粉含量与RVA谱关系分析[J].中国农业科学.2009

[6].丁盛.反义蜡质基因转化籼稻9311的研究[D].湖南农业大学.2009

[7].吴顺,萧浪涛,刘清,沈革志,王若仲.共转化获得无抗性标记的转反义蜡质基因籼稻[J].中国农业科学.2008

[8].刘清,吴顺,沈革志,彭琼,刘桃李.转反义蜡质基因水稻亲本后代性状分析[J].遗传.2008

[9].李建粤,吕英海,杨丽君,周永国,李双艳.转反义蜡质基因‘湘晴’及其杂交稻米的直链淀粉含量研究[J].西北植物学报.2008

[10].李建粤,毛万霞,范士靖,吕英海.导入反义蜡质基因改良水稻稻米的食味品质和营养品质[J].植物研究.2007

论文知识图

再生植株中反义蜡质基因的PCR检测...抗潮霉素愈伤组织中反义蜡质基因一3抗性愈伤组织中反义蜡质基因的...植物安全性表达载体的构建策略:以表达...3 部分抗性愈伤组织中反义蜡质基因3 再生植株中反义蜡质基因的 PCR...

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