三酶偶联全细胞生物合成L-酪氨酸

论文摘要

通过将醛缩酶（ALD）、D-丝氨酸脱水酶（SDH）和酪氨酸酚裂解酶（TPL）三酶偶联,催化甘氨酸、甲醛和苯酚合成L-酪氨酸（L-Tyr）。并以L-Tyr的质量浓度为指标对转化工艺进行了考察。结果表明:三酶偶联最佳反应条件为pH=8.5、温度35℃、乙酸铵质量分数6 g/L、磷酸吡哆醛（PLP）质量浓度0.1 g/L、3种酶细胞配比m（ALD）∶m（SDH）∶m（TPL）=6∶3∶5。当甘氨酸加量为50 g/L,利用上述工艺进行10000 L放大,反应11 h,L-Tyr质量浓度可达117 g/L,苯酚转化率为97%,转化体系放大后苯酚转化率提高4%,收率为85%。

论文目录

1 实验部分

1.1 材料

1.1.1 菌种与试剂

1.1.2 培养基

1.2 方法

1.2.1 菌体细胞制备

1.2.2 三酶偶联反应

1.2.3 ALD酶活测定

1.2.4 SDH酶活测定

1.2.5 TPL酶活测定

1.3 单因素考察

1.3.1 pH对酶活的影响

1.3.2 温度对酶活的影响

1.3.3 投酶量的确定

1.3.4 乙酸铵对L-Tyr产量的影响

1.3.5 PLP浓度对L-Tyr产量的影响

2 结果与讨论

2.1 pH对三酶偶联反应的影响

2.2 温度对三酶偶联反应的影响

2.3 投酶量的确定

2.4 乙酸铵对L-Tyr产量的影响

2.5 PLP浓度对L-Tyr产量的影响

2.6 多酶偶联生物合成L-酪氨酸的工艺

2.7 10000 L转化体系工艺放大验证

3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈明亮,张利坤,杨卫华,唐云平,肖延铭

关键词: 酶偶联,醛缩酶,丝氨酸脱水酶,酪氨酸酚裂解酶,酪氨酸,生物工程

来源: 精细化工 2019年03期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 有机化工

单位: 长兴制药股份有限公司,浙江海洋大学食品与医药学院

分类号: TQ28

DOI: 10.13550/j.jxhg.20180151

页码: 455-460

总页数: 6

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三酶偶联全细胞生物合成L-酪氨酸

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