导读:本文包含了中心体复制论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:中心,细胞,乳腺癌,基因,转染,荧光,蛋白质。
中心体复制论文文献综述
鲁林[1]（2014）在《中心体结合蛋白Cep88在中心体复制中功能的研究》一文中研究指出中心体是动物细胞主要的微管组织中心,参与纺锤体组装等一系列生物学过程,是维持细胞染色体数目恒定及组织器官正常生长发育的重要细胞器。Nek2是人源基因中与Nek蛋白激酶家族中同源性最高的蛋白激酶。作为中心体上的关键性激酶,Nek2在参与中心体的组装,促进中心体的分离,促进染色质的凝缩和分离中起到重要的作用。我们在寻找与Nek2相互作用的蛋白中分离鉴定了 Cep88这个全新的蛋白。在此基础上,我们通过建立GFP-Cep88稳定表达的细胞系以及内源性的免疫荧光染色,确定了它在中心体上的定位,并进一步精确定位了 Cep88的中心体结合区域,追踪了 Cep88蛋白在细胞周期中的表达水平,初步探究了 Cep88作为一个全新的中心体结合蛋白的相关性质。此外,我们通过内源、外源免疫共沉淀实验、免疫荧光染色实验、体外GST pull down实验等分子生物学和细胞生物学等方法证明了 Cep88作为全新的中心体结合蛋白能够与蛋白激酶Nek2形成复合物,并且进一步精确了 Cep88上与Nek2A结合的区域。同时通过体外的激酶实验,我们也证明了 Cep88蛋白能够抑制Nek2A蛋白激酶的活性,并且确定了 Cep88蛋白上能够抑制Nek2A蛋白激酶活性的区域,这为我们研究Cep88对中心体的结构和功能的调控机制打下了基础。鉴于中心体在细胞分离、增殖和在机体发育过程中的重要作用,本论文的研究必将有助于更好地阐明中心体复制及其调控的机制,将有助于了解中心体分离复制过程中产生异常的原因,以及由此可能导致的病变,从而对一些相关疾病的诊断和治疗具有一定的参考价值。(本文来源于《厦门大学》期刊2014-04-01）
唐琦[2]（2013）在《中心体复制与中心法则关系的思考》一文中研究指出本文在介绍中心体及中心法则的基础上引发了对中心体复制机理的思考,提出了中心体复制与DNA复制相似,中心体复制体现遗传信息传递,中心体复制实质是蛋白质合成的观点,并列举了蛋白质复制的特例,为中心体复制的研究提供了参考建议。(本文来源于《考试周刊》期刊2013年81期）
何润生,滕俊琳,陈建国[3]（2012）在《中心体复制及调控机制研究进展》一文中研究指出中心体是动物细胞内最主要的微管组织中心。此外,它还参与纺锤体组装、纤毛发生和细胞迁移等一系列生物过程。中心体异常不仅与肿瘤的发生密切相关,并且还会导致一些发育方面的疾病。该文总结了中心体的结构、复制过程及其调控机制等方面的研究进展,并讨论了中心体异常与肿瘤发生及发育相关疾病的关系,为更深入了解产生中心体异常的原因及一些相关疾病的诊断和治疗提供参考。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2012年12期）
陈保锋,梁素华[4]（2011）在《中心体复制和遗传的研究》一文中研究指出中心体是动物细胞主要的微管组织中心,中心体异常会导致染色体分离紊乱,造成不育甚至引起癌症。近年来,随着人们对中心体的不断研究,发现了中心体一些新的性质。综述了中心体复制与染色体分离的关系、中心粒的装配以及中心体的遗传。通过介绍国内外关于中心体一些最新的研究状况,为了解中心体在细胞分裂和生物发育中的意义提供一些参考。(本文来源于《江西科学》期刊2011年04期）
姜丹丹[5]（2010）在《P21~（Waf1）-p27~（Kip1）基因联合转染对乳腺癌细胞增殖和中心体复制的影响》一文中研究指出[目的]探讨外源性p21Waf1-p27Kip1基因联合转染对人乳腺癌细胞细胞增殖及中心体复制的影响和意义。[方法]应用脂质体介导法分别将构建的pIRES-p21Waf1、pIRES-p27Kip1、pIRES-p21Waf1-p27Kip1真核表达载体,转染入常规培养的人乳腺癌细胞系MCF-7,未转染组、转染空质粒组细胞做对照,Western免疫印迹法验证转染前后p21Waf1、p27Kip1基因蛋白表达情况；MTT法绘制细胞生长曲线；流式细胞仪检测细胞周期DNA分布变化；免疫荧光技术检测转染前后中心体复制的变化情况。[结果]Western免疫印迹法证实p21Waf1、p27Kip1、p21Waf1-p27Kip1基因转染24h后,其蛋白表达量明显增多(P<0.01),与对照组比较,各转染实验组细胞生长明显受抑制(P<0.01),细胞周期大部分停滞于G1期,各实验组G1期和S期细胞比例依次为：(69.52±3.21)%、(18.38±2.51)%,(60.83±3.02)%、(24.52±1.89)%,(78.37±2.83)%、(15.27±1.74)%,对照组则为(47.28±2.25)%、(33.52±1.97)%,中心体复制异常的乳腺癌细胞数较转染前(13.47±0.33)%明显减少：(5.07±0.38)%,(6.28±0.35)%,(3.47±0.23)%,两两比较差异显着(P<0.01)。[结论]外源性p21Waf1和p27Kip1基因转染可抑制人乳腺癌细胞的增殖及中心体的异常复制,二者联合转染时效果显着。提示,乳腺癌的发生、发展是多基因、多因素共同参与的过程,p21Waf1和p27Kip1在调控细胞增殖及中心体复制方面具有协同作用,对于p21Waf1、p27Kip1基因失活、低表达或不表达的乳腺癌,联合转染外源性p21Waf1、p27Kip1基因不失为一种有效的治疗手段。(本文来源于《青岛大学》期刊2010-04-08）
姜丹丹,李福年,刘相萍[6]（2009）在《p21 waf1-p27kip1基因联合转染对乳腺癌细胞增殖和中心体复制的干预研究及意义》一文中研究指出目的:探讨外源性p21~(waf1)-p27~(kip1)基因联合转染对人乳腺癌细胞细胞增殖及中心体复制的影响和意义。方法:应用脂质体介导法分别将构建的pIRES-p21~(waf1)、pIRES-p27~(kip1)、pIRES-p21~(waf1)-p27~(kip1)真核表达载体,转染入常规培养的人乳腺癌细胞系MCF-7,未转染组、转染空质粒组细胞做对照,(本文来源于《第十届全国乳腺癌会议、第四届上海国际乳腺癌论坛论文汇编》期刊2009-09-24）
贾世军[7]（2009）在《诺帝对3AO和SKOV3细胞增殖的抑制及对中心体复制相关基因Aurora-A及p53表达的影响》一文中研究指出背景:卵巢癌在女性生殖系统恶性肿瘤中死亡率最高。目前的传统手术治疗和放射治疗的效果进展不大,总的生存率没有明显提高,而开发高效低毒的,多靶点多环节作用的抗癌药物已经成为现阶段治疗肿瘤的迫切需求和研究方向。去甲二氢愈创木酸(Nordihydroguaiaretic Acid ,NDGA)是从常青灌木Larrea tridentata,中提取的一种天然药物成分,在体内外的实验中能抑制多种肿瘤的生长,具有抗增生,抗肿瘤作用。有研究表明,NDGA可以抑制细胞增殖或诱导细胞凋亡[1],诱导肿瘤细胞分化[2]以及作用于细胞周期蛋白,阻滞细胞周期,抑制肿瘤细胞的生长增殖[3]。诺帝(Nordy)作为人工合成改良的NDGA化合物,与其天然成分相比,具有高效低毒等特点。经过我们之前的研究,发现诺帝同样可以抑制肿瘤细胞增殖,诱导凋亡和分化[4],但诺帝抑制肿瘤细胞增生的作用机制目前还不清楚,Nordy对于肿瘤细胞的作用是否为多机制多环节的有待进一步阐明。大多数不同组织类型的原发性上皮性卵巢癌细胞中Aurora-A呈现出异常高表达[5]。Aurora-A激酶作为丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员之一,是一种与中心体密切相关的基因,其过表达将导致中心体过度复制,中心体复制或分裂异常形成单级或多级纺锤体,从而引起染色体分离异常,形成异倍体。提示其过表达在卵巢癌的发病中可能起了重要作用。p53基因是一个与肿瘤的发生发展密切相关的基因,目前对该基因的研究较为充分。林宇庚[6]等,将野生型p53基因转染至卵巢癌细胞系SKOV3中,实验结果显示,野生型p53基因及其产物P53蛋白能减缓卵巢癌细胞的增生。提示野生型p53基因的表达增高可以抑制肿瘤细胞的生长。并且有大量实验证明,p53与Aurora-A激酶之间有着密切的联系[7~9]。目的:探讨Nordy对卵巢癌细胞系3AO及SKOV3细胞中心体复制相关激酶Aurora-A基因及蛋白表达的影响以及与野生型p53基因表达之间的关系,同时了解其对细胞增殖及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法:1、用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法,观察Nordy在体外对3AO及SKOV3肿瘤细胞增殖的影响;用流式细胞技术(flow cytometer,FCM),检测两株肿瘤细胞周期的变化情况。2、用RT-PCR及Western-blot方法分析25、50、100μmol/L Nordy作用于3AO及SKOV3肿瘤细胞72h后,两株肿瘤细胞中Aurora-A以及p53的表达及相关关系。3、统计学分析:实验数据采用均数±标准差( x±s)表示。用SPSS11.5软件对数据进行检验,多组比较采用方差分析,组间比较采用SNK-q检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1、MTT实验结果显示,25、50、100μmol/L Nordy作用于3AO和SKOV3细胞72h后,抑制率分别为3AO(26.55%、48.43%、68.53%)SKOV3(22.15%、45.21%、66.67%),表现出良好的药物剂量依赖性和作用时间依赖性(P<0.05)。FCM检测结果显示,Nordy作用于两株卵巢癌72h后,G0/G1期细胞比例分别由81.36%,73.07%逐渐升高到86.96%,79.15%(P<0.05),S期细胞比例显着下降(P<0.05),G2/M期无明显改变(P>0.05),细胞周期表现出G0/G1期阻滞。2、RT-PCR结果显示,Nordy作用于3AO和SKOV3细胞72h后,随着Nordy作用浓度的增加,两株癌细胞中Aurora-A的mRNA表达均明显下降(P<0.05)。Western-blot结果显示,Nordy作用两株卵巢癌细胞72h后,随着Nordy作用浓度的增加,两株癌细胞中Aurora-A的蛋白表达均明显下降(P<0.05),而野生型p53表达上调(P<0.05)。3、通过对这两种细胞的比较发现,空白对照组以及各药物浓度组中,Aurora -A的mRNA在3AO和SKOV3之间的表达的差异没有统计学意义(P>0.05);Aurora–A和p53的蛋白表达的水平在3AO和SKOV3之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:1、Nordy可以抑制卵巢癌细胞系3AO和SKOV3细胞的增殖。Nordy可以有效地将两株肿瘤细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期。2、人卵巢癌细胞中Aurora-A的mRNA及蛋白均呈现高表达,Nordy可以下调3AO和SKOV3细胞中Aurora-A的表达,推测Nordy抑制3AO和SKOV3细胞的增殖的作用机制可能与Nordy上调p53的表达,p53抑制了Aurora-A激酶的活性有关。3、Nordy对这两株卵巢上皮性肿瘤3AO(粘液性)SKOV3(浆液性)的作用效果差别不明显,没有组织学上的差异。4、结果提示Nordy对3AO和SKOV3细胞增殖抑制可能是通过细胞周期阻滞以及抑制细胞分裂等多环节发挥作用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2009-06-01）
聂昊,杜卫华,郝海生,王宗礼,王栋[8]（2008）在《CDK2和P53在细胞中心体复制与调控中的作用》一文中研究指出中心体是真核生物重要的细胞器,其复制与调控异常可能是体外胚胎发育异常的重要原因,而CDK2和P53是调控中心体复制的关键且必要因子,在细胞中心体复制调控中起核心作用。作者简要介绍了中心体的功能和复制过程,重点综述了CDK2、P53及其相关因子在中心体复制调控中的作用,对研究体外受精胚胎和克隆胚胎的发育异常具有一定的理论意义。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2008年12期）
聂昊[9]（2008）在《中心体复制调控相关蛋白亚细胞结构定位的研究》一文中研究指出采用现代胚胎生物工程技术是使畜牧业向高产、高效、优质、集约化发展的有效途径。但是,体外受精胚胎和克隆胚胎发育率低是制约这两项技术走向生产实践的最大障碍。本研究借助免疫荧光染色的方法,从中心体复制的关键调控基因CDK2和P53入手,研究CDK2和P53在经体外成熟18-26小时的牛成熟卵母细胞中的亚细胞定位,揭示它们在中心体复制过程中位置,分析CDK2和P53在牛成熟卵母细胞中的表达情况,从中心体异常复制的角度阐明体外受精胚胎和克隆胚胎染色体的不稳定性。研究结果如下:研究哺乳动物胚胎的免疫荧光染色条件和步骤。通过对小鼠受精卵中CDK2、P53和γ-tubulin蛋白的免疫荧光染色研究,对免疫荧光染色的条件和步骤不断优化,修改、简化和发展,摸索出一套完善的针对卵母细胞的免疫荧光染色步骤。在小鼠受精卵1细胞G1期,通过固定、封闭、染色、在荧光显微镜下观察,发现CDK2、P53和γ-tubulin蛋白均出现染色阳性。CDK2和P53在细胞有丝分裂G1期定位于中心体,分布于细胞核区。分别培养18h,22h,26h后的牛成熟卵母细胞,通过与试验一相同的固定、封闭、染色,在荧光显微镜下观察发现,(1)培养18h后的牛成熟卵母细胞,CDK2、P53和γ-tubulin蛋白均出现染色阴性。(2)培养22h后的牛成熟卵母细胞,大多数卵母细胞CDK2、P53和γ-tubulin蛋白出现染色阴性,仅有少数卵母细胞CDK2、P53和γ-tubulin蛋白出现染色阳性。(3)培养26h后的牛成熟卵母细胞,大多数卵母细胞CDK2、P53和γ-tubulin蛋白出现染色阴性,仅有少数卵母细胞CDK2、P53和γ-tubulin蛋白出现染色阳性。(4)在出现染色阳性的牛成熟卵母细胞中,CDK2和P53蛋白定位于中心体,分布于细胞核区。CDK2和P53蛋白是与细胞中心体复制密切相关的两个蛋白,其功能和细胞的正常分裂发育有关。在用于牛体外胚胎生产的牛卵母细胞中,CDK2和P53蛋白的正常表达与否,是直接影响牛体外胚胎生产效率的原因之一。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2008-06-01）
种瑞峰[10]（2008）在《p21~（waf1）基因转染对乳腺癌细胞增殖活性和中心体复制的影响》一文中研究指出【目的】通过构建pIRES-p21~(waf1)真核表达载体,并利用脂质体介导基因转染技术导入人乳腺癌细胞系,检测转染前后乳腺癌细胞中心体的复制、癌细胞增殖能力,分析细胞周期和细胞调亡,揭示乳腺癌细胞增殖机制,为乳腺癌的分子诊断、治疗提供一条新的途径。【方法】应用脂质体介导法将构建的pIRES-p21~(waf1)真核表达载体,转染入常规培养的人乳腺癌细胞系MCF-7,并使其得到稳定的表达,通过实时荧光定量RT-PCR技术、western免疫印迹检测p21~(waf1)基因表达及蛋白表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期DNA分布变化,免疫荧光技术检测转然前后中心体复制的变化情况。【结果】pIRES-p21~(waf1)转染后,p21~(waf1)基因和蛋白得到了稳定的高表达,乳腺癌细胞生长明显受抑制,细胞周期停滞于G_1期,转染组G_1期、S期和G_2/M期细胞比例分别为(70.52±3.21)%、(16.38±1.17)%、(9.42±0.98)%,未转染组则为(49.84±1.58)%、(36.83±1.36)%、(15.64±1.09)%,二者相比差异显着,P值分别＜0.01、＜0.05、＜0.05。中心体复制异常的乳腺癌细胞数较转染前明显减少(P＜0.01)。【结论】p21~(waf1)基因转染能够抑制人乳腺癌细胞增殖和中心体的异常复制,进而阻止乳腺癌的发生发展,可能成为乳腺癌治疗的一种新手段。(本文来源于《青岛大学》期刊2008-05-10）
中心体复制论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文在介绍中心体及中心法则的基础上引发了对中心体复制机理的思考,提出了中心体复制与DNA复制相似,中心体复制体现遗传信息传递,中心体复制实质是蛋白质合成的观点,并列举了蛋白质复制的特例,为中心体复制的研究提供了参考建议。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
中心体复制论文参考文献
[1].鲁林.中心体结合蛋白Cep88在中心体复制中功能的研究[D].厦门大学.2014
[2].唐琦.中心体复制与中心法则关系的思考[J].考试周刊.2013
[3].何润生,滕俊琳,陈建国.中心体复制及调控机制研究进展[J].中国细胞生物学学报.2012
[4].陈保锋,梁素华.中心体复制和遗传的研究[J].江西科学.2011
[5].姜丹丹.P21~（Waf1）-p27~（Kip1）基因联合转染对乳腺癌细胞增殖和中心体复制的影响[D].青岛大学.2010
[6].姜丹丹,李福年,刘相萍.p21waf1-p27kip1基因联合转染对乳腺癌细胞增殖和中心体复制的干预研究及意义[C].第十届全国乳腺癌会议、第四届上海国际乳腺癌论坛论文汇编.2009
[7].贾世军.诺帝对3AO和SKOV3细胞增殖的抑制及对中心体复制相关基因Aurora-A及p53表达的影响[D].重庆医科大学.2009
[8].聂昊,杜卫华,郝海生,王宗礼,王栋.CDK2和P53在细胞中心体复制与调控中的作用[J].中国畜牧兽医.2008
[9].聂昊.中心体复制调控相关蛋白亚细胞结构定位的研究[D].甘肃农业大学.2008
[10].种瑞峰.p21~（waf1）基因转染对乳腺癌细胞增殖活性和中心体复制的影响[D].青岛大学.2008
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