基于FRET的B族链球菌新型荧光猝灭试纸条的研发和性能评价

基于FRET的B族链球菌新型荧光猝灭试纸条的研发和性能评价

论文摘要

目的:在B族链球菌(GBS)胶体金免疫层析试纸条中引入异硫氰酸荧光素(FITC)和胶体金颗粒(Au NPs)之间的荧光共振能量转移(FRET),从而实现用裸眼观察和荧光读数法检测GBS。方法:基于双抗体夹心法和FRET研制新型荧光猝灭试纸条,对其检测的特异性、灵敏度进行评价,并初步探究GBS浓度与荧光强度值之间的关系。结果:与草绿色链球菌和肺炎链球菌均无交叉反应;肉眼观察的最低检出浓度为105CFU/mL;GBS在103-108CFU/mL浓度范围内与荧光强度值呈现良好的相关性。结论:该方法简单,便捷,不仅能实现快速诊断与筛查,还能够实现定量分析,这种设计思路可用于其它病原微生物的检测研究。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器和设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 新型GBS荧光猝灭试纸条研制
  •       1.3.1. 1 胶体金溶液的制备和鉴定[5]
  •       1.3.1. 2 胶体金标记的GBS鼠单克隆抗体的制备[6]
  •       1.3.1. 3 异硫氰酸荧光素(FITC)标记的兔抗GBS多克隆抗体
  •       1.3.1. 4 样品垫的前处理
  •       1.3.1. 5 试纸条的组装
  •     1.3.2 GBS抗原提取方法
  •     1.3.3 最佳反应时间确定
  •     1.3.4 试纸条交叉反应
  •     1.3.5 试纸条灵敏度测试
  •     1.3.6 试纸条的精密度实验
  • 2 结果
  •   2.1 胶体金溶液的鉴定
  •   2.2 GBS抗原提取方法确认
  •   2.3 最佳反应时间的确定
  •   2.4 试纸条交叉反应
  •   2.5 试纸条灵敏度测试及探究荧光强度的变化与GBS的浓度的关系
  •   2.6 试纸条的精密度实验
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 冯遥,陈泽典,涂思琳,夏勇

    关键词: 族链球菌,荧光共振能量转移,胶体金免疫层析,试纸

    来源: 广州医科大学学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 临床医学

    单位: 广州医科大学附属第三医院,广州医科大学金域检验学院

    分类号: R446.6

    页码: 8-13

    总页数: 6

    文件大小: 1492K

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