IL-1β预处理脂肪间充质干细胞促进VEGF蛋白分泌和巨噬细胞M2型极化的研究

IL-1β预处理脂肪间充质干细胞促进VEGF蛋白分泌和巨噬细胞M2型极化的研究

论文摘要

目的探讨白细胞介素(IL)-1β预处理脂肪间充质干细胞(ADMSCs)对血管内皮生长因子(VEGF)蛋白分泌和巨噬细胞M2型极化的影响及作用机制。方法 IL-1β预处理ADMSCs 24 h,Western blot法检测ADMSCs中环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达,ELISA法测定ADMSCs培养基中前列腺素E2(PGE2)和VEGF蛋白质量浓度; IL-1β预处理的ADMSCs细胞培养基培养丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)-U937巨噬细胞(M0巨噬细胞)72 h后,实时荧光定量PCR法检测PMA-U937细胞CD163(巨噬细胞M2型极化标志物)和IL-10 mRNA表达。慢病毒干扰ADMSCs细胞中COX-2表达后,观察ADMSCs培养基中VEGF蛋白质量浓度(ELISA法)和PMA-U937巨噬细胞中CD163和IL-10 mRNA的表达(实时荧光定量PCR法)。结果 IL-1β预处理ADMSCs细胞后上调其COX-2蛋白表达,增加PGE2和VEGF蛋白分泌(P<0.05);IL-1β预处理的ADMSCs细胞培养基可上调PMA-U937巨噬细胞中CD163和IL-10 mRNA表达水平(P<0.01)。干扰ADMSCs细胞中COX-2蛋白表达后,可抑制IL-1β预处理的ADMSCs细胞中VEGF蛋白分泌(P<0.05),亦可抑制其对PMA-U937巨噬细胞中CD163和IL-10 mRNA表达的影响(P<0.05)。结论 IL-1β预处理ADMSCs细胞可通过COX-2-PGE2信号轴,增加VEGF蛋白分泌,以及诱导PMA-U937巨噬细胞M2型极化,提示IL-1β预处理能够增强ADMSCs细胞抗炎活性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养及条件培养基制备
  •     1.2.2 细胞实验分组
  •     1.2.3 PMA诱导U937细胞分化
  •     1.2.4 慢病毒感染及效果
  •     1.2.5 Western blot实验
  •     1.2.6 实时荧光定量PCR实验
  •     1.2.7 ELISA实验
  •     1.2.8 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 PMA诱导U937细胞分化为M0巨噬细胞
  •   2.2 慢病毒干扰ADMSCs细胞COX-2蛋白表达效果鉴定
  •   2.3 IL-1β预处理对ADMSCs细胞COX-2、PGE2和VEGF蛋白表达的影响
  •   2.4 IL-1β预处理ADMSCs细胞对PMA-U937巨噬细胞M2型极化的影响
  •   2.5 COX-2-PGE2信号轴在IL-1β预处理增加ADMSCs细胞VEGF蛋白表达及诱导U937巨噬细胞M2极化中的作用
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘流,刘琳,梁力川,刘东良,朱志强

    关键词: 间充质干细胞,细胞,巨噬细胞极化,前列腺素,血管内皮生长因子

    来源: 四川大学学报(医学版) 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中国科学技术大学附属第一医院/安徽省立医院普外科,中国科学技术大学附属第一医院/安徽省立医院麻醉科,安徽医科大学附属省立医院普外科

    基金: 国家自然科学基金青年科学基金项目(No.81501601),安徽省自然科学基金青年科学基金项目(No.1608085QH198)资助

    分类号: R329.2

    DOI: 10.13464/j.scuxbyxb.2019.02.005

    页码: 171-176

    总页数: 6

    文件大小: 2042K

    下载量: 214

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