导读:本文包含了酰化胰岛素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胰岛素,蛋白,酪氨酸,卵巢综合征,脂肪,细胞,多巴胺。
酰化胰岛素论文文献综述
周维[1]（2016）在《脂肪组织CD36棕榈酰化对代谢性炎症和胰岛素敏感性的影响》一文中研究指出目的:脂肪酸转运酶(Fatty acid translocase,FAT/CD36)是一种跨膜糖蛋白,主要介导长链脂肪酸(long chain fatty acid,LCFA)转运,在脂糖代谢中有极其重要作用。我们实验室前期研究已经证实,高脂饮食能诱导小鼠附睾脂肪组织CD36和炎症因子的表达增加、胰岛素敏感性降低[1-3]。然而,抑制CD36表达虽可以改善机体胰岛素敏感性[4],但也可能导致体内脂代谢稳态异常[5-6]。因此,单纯在转录或翻译水平去干预CD36蛋白的表达,对防治由CD36介导的炎症的发生或胰岛素抵抗,不是最佳方法。棕榈酰化作为体内唯一可逆的蛋白质翻译后修饰方式,可以通过调节膜蛋白定位而影响蛋白的功能。本课题旨在探讨脂肪组织CD36棕榈酰化对代谢性炎症及胰岛素敏感性的影响,为今后深入研究和理解CD36蛋白棕榈酰化修饰在代谢性炎症和胰岛素抵抗中的作用提供实验依据。方法:1.选择C57BL/6J小鼠随机分为2组,分别喂养普通饮食(normal chow diet,NCD)和高脂饮食(high fat diet,HFD)。2.C57BL/6J小鼠随机分为叁组,分别注射空病毒(negative control,NC)、转染了含野生型CD36(wide type-CD36,WT-CD36)以及4个棕榈酰化位点突变(AA-SS)CD36的慢病毒[7],叁组均高脂喂养。上述两批小鼠分别喂养8周后,收集小鼠附睾脂肪组织(Epididymal adipose tissue,EAT),应用酰基-生物素置换法(acyl-biotindisplacementmethod,abe)检测cd36棕榈酰化程度,实时荧光定量聚合酶链式反应(realtime-polymerasechainreaction,rt-pcr)和westernblot检测cd36、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactoralpha,tnf-α)、c-jun氨基末端激酶(junn-terminalkinase,jnk)、白细胞介素-6(interleukin-6,il-6)、巨噬细胞标记物f4/80、核因子κb(nuclearfactor-κb,nf-κb)的表达以及蛋白激酶(proteinkinase,akt)、胰岛素底物受体1(insulinreceptorsubstrate1,irs-1);应用he染色观察脂肪组织形态。3.用空病毒(nc)、含野生型cd36(wt-cd36)以及4个棕榈酰化位点突变(aa-ss)cd36的慢病毒分别转染3t3-l1细胞,经过嘌呤霉素筛选构建叁种稳定细胞系(nc、wt-cd36、aa-ss)。4.3t3-l1细胞诱导分化为成熟脂肪细胞后,应用棕榈酸(palmitate,pa)或联合棕榈酰化抑制剂溴十酸(2-bromopalmitate,2-bp)和浅蓝菌素(cerulenin,cer)处理3t3-l1细胞。上述细胞系应用abe检测细胞fat/cd36棕榈酰化程度,用超速离心分离出细胞脂筏,测cd36与标记蛋白(caveolin-1,cav)在脂筏中的分布,荧光染料进行脂肪细胞脂滴染色,用免疫共沉淀方法提取细胞系cd36/tlr4共聚体并用westernblot检测;提取细胞线粒体及内质网蛋白,用westernblot检测cd36在线粒体和内质网的表达水平。结果:1.高脂饮食喂养小鼠eat中cd36棕榈酰化修饰程度增加,tnf-α,jnk表达增多,胰岛素信号通路相关蛋白akt、irs-1表达减少。2.动物模型中,wt-cd36组与aa-ss组小鼠eat中cd36的表达增加(P<0.05),但AA-SS组的CD36棕榈酰化程度明显降低。WT-CD36组体重明显增加(P<0.05)、葡萄糖不耐受(glucose intolerance)、胰岛素不敏感性,炎症因子:TNF-α、JNK、IL-6、F4/80及NF-κB的表达增加,磷酸化蛋白激酶(Phosphorylated-protein kinase,p-AKT)和磷酸化胰岛素受体底物1(Phospho-Insulin receptor substrate 1,p-IRS1)表达降低。AA-SS组能显着改善小鼠体重和葡萄糖耐量,降低炎症因子表达,增加胰岛素敏感性,增加p-AKT和p-IRS1的表达。3.细胞模型中,WT-CD36组CD36融入脂筏部分增加,脂滴增大,CD36/TLR4共聚体形成增加,AA-SS组CD36融入脂筏部分减少,脂滴变小,CD36/TLR4共聚体形成减少。在3T3-L1细胞中,PA能增加CD36融入脂筏的效率,PA联合2-Bromopalmitate和Cerulenin后,CD36融入脂筏的效率降低,脂滴形成减少,CD36在线粒体和内质网上的表达增加。结论:高脂饮食可以促进脂肪组织代谢性炎症的发生、降低胰岛素敏感性,同时能诱导脂肪组织CD36棕榈酰化修饰程度明显增加;抑制CD36棕榈酰化能减轻脂肪炎症,改善胰岛素敏感性;其机制可能与棕榈酰化改变CD36在脂筏、线粒体及内质网上的分布有关,需进一步探讨。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2016-05-01）
肖拥军,黄亮,曹春来,曹永恒,张伟[2]（2013）在《脂肪酸酰化修饰胰岛素的纯化》一文中研究指出目的:脂肪酸酰化修饰的胰岛素类似物是常见的获得长效胰岛素的手段,但因其反应位点的偏差易产生多种传统纯化工艺较难以分离的杂质。本文探索以聚苯乙烯类有机聚合物填料为固定相纯化脂肪酸酰化修饰的胰岛素方法。方法:经过填料对比,有机溶剂浓度和pH选择后,再经过一系列正交试验优化,HPLC方法检验纯度和含量,质谱分析定性终产品,从而确定最佳条件。结果:经过对不同厂家不同型号的聚苯乙烯类有机聚合物填料的比较,填料选定采用纳微Uni Ps 30-300为最佳,其目的蛋白吸附量比为6.32 mg/ml,洗脱率为95.27%。在一系列的梯度实验中证实采用30-50%异丙醇浓度最佳。之后的pH对比得出,pH在4.0以下才能分离得到纯度在95%以上的产品。在以上一系列的单因素实验基础上,最后经过正交实验优化证实最佳的洗脱方案为采用A相为含25 mM硫酸铵的0.1 M磷酸盐缓冲液,pH 3.0;B相为异丙醇流动相,洗脱梯度为30-50%B的10 CV洗脱,流速60 cm/h。放大验证可以得到纯度大于97.5%,回收率70%以上的结果。结论:此方法具有分离效果好,成本低,易于放大的优点。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2013年24期）
韩国胜,冯聪,王珍,廖新成,武现丽[3]（2012）在《N-磷酰化多巴胺与牛胰岛素弱相互作用的ESI-MS研究》一文中研究指出用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-磷酰化多巴胺与牛胰岛素的非共价相互作用,比较了磷上不同烷氧取代基对相互作用影响。结果表明烷氧取代基上烷基碳原子个数和其排列顺序对二者相互作用有较大影响。取代基上碳链越长溶液中胰岛素的构象越趋于收缩,易于形成高计量比复合物;而支链或直链取代对胰岛素构象的影响程度差别不大。磷酰化多巴胺与胰岛素形成复合物的稳定性随着取代基的增长而增强;直链取代的磷酰化多巴胺与胰岛素形成的复合物比支链取代的磷酰化多巴胺与其形成的复合物稳定。这一结论对设计合成新型多巴胺类化合物有一定的指导意义。(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊2012年06期）
李先任[4]（2009）在《缺血性脑卒中患者胰岛素抵抗、促酰化蛋白水平及意义》一文中研究指出作者通过对104例缺血性脑卒中患者和82例健康人检测分析,同时排除糖尿病和肥胖等因素的干扰,探讨胰岛素抵抗、促酰化蛋白与缺血性脑卒中的关系,以期对缺血性脑卒中的防治提供理论依据。1资料与方法根据我国1995年脑血管疾病分类及诊断标准,收集本院2003年6(本文来源于《实用临床医药杂志》期刊2009年01期）
李喜莲,王针织,俞超芹[5]（2008）在《补肾活血化瘀方上调雄激素致不孕大鼠脂肪组织中胰岛素受体底物1及其酪氨酸磷酰化》一文中研究指出目的:研究雄激素致不孕大鼠(androgen sterilized rat,ASR)胰岛素受体底物1的表达及其酪氨酸磷酸化程度,探讨胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的分子机制和补肾活血化瘀方的作用机制。方法:ASR大鼠随机分为模型组、溶媒组(注射中性茶油)和补肾活血化瘀方组,各组均为15只大鼠。观察大鼠体质量和胰岛素曲线下面积,并检测大鼠脂肪组织中胰岛素受体底物1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)的表达及其酪氨酸磷酸化程度。结果:模型组大鼠体质量和胰岛素曲线下面积高于溶媒组和补肾活血化瘀方组(P<0.05)。模型组脂肪组织中IRS-1及其酪氨酸磷酸化程度低于溶媒组(P<0.05),补肾活血化瘀方组IRS-1的表达及其酪氨酸磷酸化程度上升,与模型组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:补肾活血化瘀方能促进IR大鼠脂肪组织IRS-1蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化水平,这可能是其提高组织对胰岛素敏感性从而改善IR的机制之一。(本文来源于《中西医结合学报》期刊2008年06期）
邓秀娟[6]（2008）在《多囊卵巢综合征患者血浆酰化刺激蛋白、脂联素与胰岛素抵抗的相关性研究》一文中研究指出目的以多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome, PCOS)患者为研究对象,检测其血浆酰化刺激蛋白(Acylation-stimulating protein, ASP)和血浆脂联素(Adiponectin, APN)水平,建立HOMA稳态模型评价胰岛素抵抗程度,探讨PCOS患者酰化刺激蛋白(ASP)、血浆脂联素(APN)与胰岛素抵抗(Insulin Resistance, IR)之间的关系。方法根据体重指数(body mass index, BMI)将PGOS患者及健康受试者进行分组。BMI≥25kg/㎡为肥胖,BMI<25kg/㎡为非肥胖。分别将30例PCOS患者与35例健康志愿者分为以下4组:PCOS肥胖组(OP组)16例,PCOS非肥胖组(NP组)14例。单纯肥胖组(Ob)组17例,正常对照组(NC组)18例。采用酶联免疫法(ELISA)测定各组血浆ASP及血浆APN水平,电化学发光法和葡萄糖氧化酶法,分别测定各组空腹胰岛素、空腹血糖值。各组胰岛素抵抗采用稳态模型估计法,计算胰岛素抵抗指数(HOMA -IR),评价胰岛素抵抗程度。结果(1)PCOS患者血浆ASP水平明显高于健康对照组(P<0.05),且Ob组ASP与NC组比较也升高(P<0.05)。(2)PCOS患者OP组APN水平低于NP组,Ob组APN水平与NC组比较也有所降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)相关分析显示PCOS患者,无论是否肥胖,血浆ASP水平与血浆APN水平呈负相关,与BMI、HOMA-IR呈正相关。结论PCOS患者血浆ASP水平均较健康人群组高,差异具有统计学意义。肥胖PCOS患者血浆ASP水平更高。肥胖PCOS患者血浆APN水平与非肥胖PCOS患者比较有所降低,差异具有统计学意义。PCOS患者血浆ASP与血浆APN呈显着负相关,与BMI、HOMA-IR正相关。(本文来源于《华中科技大学》期刊2008-05-01）
崔志华,张木勋,张建华,杨雁,吴玉文[7]（2008）在《多囊卵巢综合征患者血浆酰化刺激蛋白和瘦素与胰岛素抵抗的关系》一文中研究指出目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血浆酰化刺激蛋白(ASP)和瘦素水平的变化及其与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法将39例PCOS患者分为肥胖PCOS组和非肥胖PCOS组,42名健康孕龄妇女分为单纯肥胖组和正常体重对照组。测定血浆ASP、瘦素、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIns)水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果①与正常体重对照组相比,其余叁组ASP水平显着升高(P<0.01);单纯肥胖组和肥胖PCOS组的血浆瘦素水平显着高于正常体重对照组(P<0.05;P<0.01),而非肥胖PCOS组与正常体重对照组无显着性差异(P>0.05);与正常体重对照组相比,非肥胖PCOS组和肥胖PCOS组的HOMA-IR显着升高(P<0.05;P<0.01)。②在PCOS患者中,ASP与FIns、HOMA-IR成正相关(r=0.284,P=0.04;r=0.297,P=0.03);瘦素与BMI、FIns、HOMA-IR成正相关(r=0.677,P<0.01;r=0.609,P<0.01;r=0.588,P<0.01);ASP与瘦素不相关(r=-0.043)。结论PCOS患者存在胰岛素抵抗,其血浆ASP水平显着升高;ASP、瘦素可能与PCOS的胰岛素抵抗有关。(本文来源于《临床内科杂志》期刊2008年01期）
温宇[8]（2007）在《促酰化蛋白—受体C5L2在脂肪细胞分化和胰岛素抵抗中的作用研究》一文中研究指出第一部分ASP受体在前脂肪细胞分化过程中的时序性表达研究目的阐明促酰化蛋白(Acylationg Stimulating Protein, ASP)受体在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中表达的时序性规律。方法1.采用激素“鸡尾酒”(10μg/ml胰岛素+0.5 mmol/L 1-甲基3-异丁基黄嘌呤+1.0μmol/L地塞米松)诱导方法,诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,光学显微镜观察3T3-L1前脂肪细胞的形态学变化,即细胞内脂滴的形成,油红O染色观察胞浆中脂滴的聚集。2.荧光显微镜观察ASP受体C5L2在细胞膜定位、分布规律。3.采用RT-PCR方法,检测C5L2在前脂肪细胞分化不同阶段mRNA表达。4.采用流式细胞仪检测C5L2在前脂肪细胞分化不同阶段蛋白表达。结果1. 3T3-L1前脂肪细胞表现为成纤维细胞样长梭形,胞浆中无脂滴;分化成熟后,细胞变大、变圆,胞浆可见明显的脂滴,呈“戒环”状。2. C5L2主要表达于细胞膜,前脂肪细胞和成熟脂肪细胞有中度表达,分化早期表达较强。3.在诱导分化0d, C5L2 mRNA有低水平的表达,诱导分化1d C5L2 mRNA表达明显增加(p<0.05),诱导分化3d,6d和9d C5L2 mRNA水平分别是0d的2.08倍、2.44倍和3.56倍(p<0.05或p<0.01)。4.在诱导分化0d,C5L2蛋白阳性表达率为(50.71±14.58)%,诱导分化6h C5L2蛋白表达增加了21% (p<0.05);分化12h达高峰,增加了38%(p<0.01);分化1d增加了11%(p<0.05),并逐渐减少;分化3d基本恢复至0d水平,分化6d和9d C5L2表达与0d无显着性差异(p>0.05)。结论ASP受体在前脂肪细胞分化过程中的发生、发育、定位具有时序性和空间分布规律。3T3-L1前脂肪细胞C5L2 mRNA表达呈分化依赖性增加,而C5L2蛋白表达水平在分化早期显着增强。ASP-C5L2途径参与了脂肪细胞分化的调控过程,对于C5L2在翻译水平的变化机制尚有待深入探索。第二部分ASP-受体C5L2途径在脂肪酸诱导的(前)脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用研究目的1.观察不同浓度单不饱和脂肪酸(油酸)和饱和脂肪酸(棕榈酸)对3T3-L1(前脂肪细胞葡萄糖转运的影响,探讨高游离脂肪酸(Free Fatty Acid,FFA)负荷在胰岛素抵抗和ASP抵抗形成中的意义,以期阐明高FFA负荷诱导的胰岛素抵抗状态下同时存在ASP抵抗。2.探讨FFA诱导的3T3-L1(前)脂肪细胞ASP抵抗的机制。观察FFA对3T3-L1(前)脂肪细胞ASP受体C5L2-mRNA和细胞表面C5L2蛋白表达的影响,以期从受体水平探讨ASP抵抗的机制;观察ASP刺激后3T3-L1(前)脂肪细胞Gβ,Gαq/11,磷酸化蛋白激酶Cα(p-PKCα)和磷酸化蛋白激酶Cζ(p-PKCζ)蛋白表达规律,阐明G蛋白和PKC途径与ASP-C5L2的关系;观察FFA对3T3-L1(前)脂肪细胞Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白以及ASP刺激的Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达的影响,以期从受体后信号分子水平探讨ASP抵抗的机制。方法1.采用2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖掺入法,观察3T3-L1前脂肪细胞最大葡萄糖摄取率时最佳胰岛素作用浓度和时间;在此基础上检测不同浓度(0mmol/L～1.0mmol/L)油酸、棕榈酸孵育过夜后3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞基础状态、胰岛素刺激状态和ASP刺激状态的葡萄糖摄取率。2.分别采用RT-PCR和流式细胞仪检测FFA孵育过夜3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞C5L2 mRNA和蛋白表达。3. 3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞分别给予0μmol/L和5.0μmol/L ASP刺激4h后,采用Western Blot法检测Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达。4. 3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞给予FFA孵育过夜后,采用Western Blot法检测基础状态和ASP刺激的Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达。结果1. 100 nmol/L胰岛素刺激15min时葡萄糖转运率显着增加(P<0.05);1h时达高峰(P<0.01);6h恢复至基础状态水平(P>0.05)。50 nmol/L胰岛素作用1h,3T3-L1前脂肪细胞葡萄糖转运率增加了336%(P<0.01);100 nmol/L时达最高峰,葡萄糖转运率增加了394%(P<0.01),并逐渐趋于稳态。可见,100 nmol/L胰岛素作用1h细胞葡萄糖转运率最强,根据此研究结果,选择100 nmol/L胰岛素作用1h以判断FFA对胰岛素激发的葡萄糖转运率的影响。2. 0.125 mmol/L～1.0 mmol/L油酸和棕榈酸不影响3T3-L1成熟脂肪细胞基础状态的葡萄糖转运,但呈浓度依赖性抑制细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运。油酸组葡萄糖摄取率分别减少4%(p>0.05)、36%( p<0.05)和48% (p<0.05);棕榈酸组葡萄糖摄取率分别减少11%(p>0.05)、18%( p>0.05)和43% (p<0.05)。在3T3-L1前脂肪细胞,油酸和棕榈酸同样不影响前脂肪细胞基础状态的葡萄糖转运,对胰岛素刺激的葡萄糖转运,油酸组分别减少22%、29%和49%(p<0.05或p<0.01);棕榈酸组葡萄糖摄取率分别减少42%、49%和65%(p<0.05或p<0.01)。3. ASP刺激后,3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞葡萄糖摄取率明显增加,分别是基础状态的1.98倍((p<0.01)和2.87倍((p<0.01),表明ASP具有促进脂肪细胞葡萄糖转运的能力。低浓度FFA不影响ASP刺激的葡萄糖转运;随着FFA浓度增加,ASP刺激的葡萄糖转运明显下调。1.0 mmol/L时油酸组和棕榈酸组ASP刺激的成熟脂肪细胞葡萄糖摄取率分别减少47% (p<0.01)和34% (p<0.05),前脂肪细胞葡萄糖摄取率分别减少43% (p<0.01)和62% (p<0.01)。4.高浓度FFA能显着性抑制3T3-L1成熟脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白表达。1.0 mmol/L时,油酸组成熟脂肪细胞C5L2-mRNA和细胞表面C5L2蛋白表达分别下降了84%(p<0.05)和39%(p<0.01);棕榈酸组最大抑制率分别为41%(p<0.05)和55%(p<0.01)。但前脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白表达水平均无显着性差异(p>0.05)。5. ASP显着增强特异性Gβ,Gαq/11, p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达。ASP刺激后, 3T3-L1成熟脂肪细胞Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达分别增加了26%,32%,71%和49%(p<0.05或p<0.01);前脂肪细胞Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达分别增加了34%,27%,40%和57%(p<0.05或p<0.01)。6. 1.0 mmol/L油酸和棕榈酸抑制成熟脂肪细胞基础状态和ASP刺激的Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达,油酸组ASP刺激的蛋白表达分别减少了47%Gβ,44%Gαq/11,39%p-PKCα(p<0.05或p<0.01)和20%p-PKCζ(p>0.05);棕榈酸组ASP刺激的蛋白表达分别减少了50%Gβ,43%Gαq/11,44%p-PKCα和43%p-PKCζ(p<0.05或p<0.01)。在前脂肪细胞,油酸分别抑制ASP刺激的23%Gβ(p>0.05),4%Gαq/11(p>0.05),39%p-PKCα(p<0.05)和19%p-PKCζ(p<0.05)蛋白表达;棕榈酸组ASP刺激的蛋白表达分别减少了45%Gβ,50%Gαq/11,52%p-PKCα和21%p-PKCζ(p<0.05或p<0.01)。结论1.油酸或棕榈酸抑制3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞胰岛素刺激和ASP刺激的葡萄糖转运,首次证明FFA诱导脂肪细胞产生胰岛素抵抗状态下同时存在ASP抵抗。2. ASP-C5L2通过激活Gβ,Gαq/11, PKCα和PKCζ信号分子发挥调控脂肪细胞分化及葡萄糖转运等生物学作用。3. FFA诱导的ASP抵抗的发生机制与下调脂肪细胞表面ASP受体功能有关,与干扰ASP-C5L2信号转导途径有关。ASP抵抗参与了“脂毒性”-胰岛素抵抗/肥胖症的病理生理过程。第叁部分ASP-受体C5L2途径在性激素诱导的(前)脂肪细胞胰岛素抵抗中的作用研究目的1.观察不同浓度17β-雌二醇、睾酮和孕酮对3T3-L1(前)脂肪细胞葡萄糖转运的影响,探讨高性激素负荷在胰岛素抵抗和ASP抵抗形成中的意义,以期阐明高性激素负荷诱导的胰岛素抵抗状态下同时存在ASP抵抗。2.探讨性激素诱导的3T3-L1(前)脂肪细胞ASP抵抗的机制。观察性激素对3T3-L1(前)脂肪细胞ASP受体C5L2-mRNA和细胞表面C5L2蛋白表达的影响,以期从受体水平探讨ASP抵抗的机制;观察性激素对3T3-L1(前)脂肪细胞Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白以及ASP刺激的Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达的影响,以期从受体后信号分子水平探讨ASP抵抗的机制。方法1.采用2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖掺入法,检测不同浓度(10~(-8) mol/L～10~(-6) mol/L)17β-雌二醇、睾酮和孕酮孵育过夜后3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞基础状态、胰岛素刺激状态和ASP刺激状态的葡萄糖摄取率。2.分别采用RT-PCR和流式细胞仪检测性激素孵育过夜3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞C5L2 mRNA和蛋白表达。3. 3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞给予性激素孵育过夜后,采用Western Blot法检测基础状态和ASP刺激的Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ蛋白表达。结果1. 10~(-8) mol/L～10~(-6) mol/L 17β-雌二醇、睾酮和孕酮不影响3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞基础状态的葡萄糖转运。胰岛素刺激后,10~(-6) mol/L 17β-雌二醇和睾酮分别显着性抑制39% (p<0.05)和42% (p<0.01)成熟脂肪细胞葡萄糖转运,而孕酮对成熟脂肪细胞葡萄糖转运无明显抑制作用;在前脂肪细胞,10~(-8) mol/L和/或10~(-7) mol/L 17β-雌二醇和睾酮能轻度增加胰岛素刺激的葡萄糖转运,高浓度时(10~(-6) mol/L)分别抑制32% (p<0.05)和40% (p<0.05)前脂肪细胞葡萄糖转运;孕酮呈浓度依赖性抑制前脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运,最大抑制率为38% (p<0.01)。2. ASP刺激状态,10~(-8) mol/L～10~(-7) mol/L 17β-雌二醇和睾酮对3T3-L1成熟脂肪细胞葡萄糖转运无显着性差异(p均>0.05),10~(-6) mol/L时分别抑制46% (p<0.01)和46% (p<0.01)成熟脂肪细胞葡萄糖摄取率,10~(-7) mol/L和10~(-6) mol/L孕酮分别抑制55%( p<0.01)和52% (p<0.01)成熟脂肪细胞葡萄糖摄取率。在前脂肪细胞,高浓度(10~(-6) mol/L)性激素均显着抑制ASP刺激的葡萄糖转运( p均<0.05)。3. 10~(-8) mol/L 17β-雌二醇轻度增加3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白的表达, 10~(-6) mol/L时3T3-L1成熟脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白表达分别下降了40% (p<0.05)和21%(p<0.05)。睾酮呈浓度依赖性均抑制3T3-L1成熟脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白的表达,10~(-6) mol/L时mRNA和蛋白分别减少了60% (p<0.01)和27%(p<0.01)。但前脂肪细胞C5L2-mRNA和蛋白表达水平均无显着性差异(p均>0.05)。孕酮最大抑制成熟脂肪细胞14% (p>0.05) C5L2-mRNA和22%(p<0.01)蛋白表达,与17β-雌二醇和睾酮不同,高浓度的孕酮能显着性抑制前脂肪细胞66% (p<0.01) C5L2-mRNA和29%(p<0.05) C5L2蛋白表达。4.高浓度(10~(-6) mol/L)性激素在一定程度上抑制ASP刺激的成熟脂肪细胞Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ的表达,17β-雌二醇组ASP刺激的蛋白表达分别减少了23%,17%,15%和15%(p均>0.05);睾酮组分别减少了27%(p>0.05),52%(p<0.05),50%(p<0.01)和57%(p<0.05);孕酮组分别减少了63%(p<0.05),41%(p<0.05),49%(p<0.01)和32%(p>0.05)。在前脂肪细胞,10~(-6) mol/L 17β-雌二醇显着性抑制24%(p<0.05)ASP刺激的Gαq/11蛋白表达,睾酮对前脂肪细胞ASP-C5L2下游信号分子Gβ,Gαq/11,p-PKCα和p-PKCζ表达无明显抑制作用;高浓度孕酮显着性抑制ASP刺激的43%Gβ(p<0.05),59%Gαq/11(p<0.01),51%p-PKCα(p<0.05)和30%p-PKCζ(p<0.05)的表达。结论1.性激素抑制3T3-L1成熟脂肪细胞和前脂肪细胞胰岛素刺激和ASP刺激的葡萄糖转运,提示在性激素诱导脂肪细胞产生胰岛素抵抗状态下同时存在ASP抵抗。2.性激素诱导的ASP抵抗的发生机制与下调脂肪细胞表面ASP受体功能有关,与干扰ASP-C5L2信号转导途径有关。ASP抵抗参与了高雌二醇、睾酮和孕酮引起的胰岛素抵抗状态的病理生理过程,ASP抵抗可能参与妊娠糖尿病、多囊卵巢综合征(PCOS)、肥胖症等多种疾病的病理生理过程。(本文来源于《华中科技大学》期刊2007-05-01）
黄涛,黄开勋[9]（2006）在《亚油酸酰化胰岛素的制备及飞行质谱分析》一文中研究指出Linoleoyl benzotriazole was synthesized from linoleic acid and benzotriazole by means of dicyclohexylcarbodiimide coupling method and characterized by FT-IR and ~(1)H NMR.Linoleoyl insulin was prepared by chemical modification of insulin with linoleoyl benzotriazole without using any specific protecting group.MALDI-TOF-MS analysis showed that the modification of insulin was successful and the monoacylated insulin was the major product.A little diacylated insulin was observed and no triacylated insulin was detected.(本文来源于《化学研究与应用》期刊2006年07期）
黄涛,黄开勋[10]（2005）在《油酸酰化胰岛素的制备及飞行质谱分析》一文中研究指出采用二环己基碳二亚胺缩合法由油酸和苯并叁唑合成了油酰苯并叁唑,并利用FT-IR和1H NMR对产物进行了表征;利用油酰苯并叁唑对胰岛素侧链氨基在非保护下进行化学修饰,制备得到油酰胰岛素,飞行时间质谱分析显示该修饰作用是成功的,并且单修饰是主要的,有少量二修饰物,没有叁修饰产物.(本文来源于《化学研究》期刊2005年03期）
酰化胰岛素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:脂肪酸酰化修饰的胰岛素类似物是常见的获得长效胰岛素的手段,但因其反应位点的偏差易产生多种传统纯化工艺较难以分离的杂质。本文探索以聚苯乙烯类有机聚合物填料为固定相纯化脂肪酸酰化修饰的胰岛素方法。方法:经过填料对比,有机溶剂浓度和pH选择后,再经过一系列正交试验优化,HPLC方法检验纯度和含量,质谱分析定性终产品,从而确定最佳条件。结果:经过对不同厂家不同型号的聚苯乙烯类有机聚合物填料的比较,填料选定采用纳微Uni Ps 30-300为最佳,其目的蛋白吸附量比为6.32 mg/ml,洗脱率为95.27%。在一系列的梯度实验中证实采用30-50%异丙醇浓度最佳。之后的pH对比得出,pH在4.0以下才能分离得到纯度在95%以上的产品。在以上一系列的单因素实验基础上,最后经过正交实验优化证实最佳的洗脱方案为采用A相为含25 mM硫酸铵的0.1 M磷酸盐缓冲液,pH 3.0;B相为异丙醇流动相,洗脱梯度为30-50%B的10 CV洗脱,流速60 cm/h。放大验证可以得到纯度大于97.5%,回收率70%以上的结果。结论:此方法具有分离效果好,成本低,易于放大的优点。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酰化胰岛素论文参考文献
[1].周维.脂肪组织CD36棕榈酰化对代谢性炎症和胰岛素敏感性的影响[D].重庆医科大学.2016
[2].肖拥军,黄亮,曹春来,曹永恒,张伟.脂肪酸酰化修饰胰岛素的纯化[J].现代生物医学进展.2013
[3].韩国胜,冯聪,王珍,廖新成,武现丽.N-磷酰化多巴胺与牛胰岛素弱相互作用的ESI-MS研究[J].中山大学学报(自然科学版).2012
[4].李先任.缺血性脑卒中患者胰岛素抵抗、促酰化蛋白水平及意义[J].实用临床医药杂志.2009
[5].李喜莲,王针织,俞超芹.补肾活血化瘀方上调雄激素致不孕大鼠脂肪组织中胰岛素受体底物1及其酪氨酸磷酰化[J].中西医结合学报.2008
[6].邓秀娟.多囊卵巢综合征患者血浆酰化刺激蛋白、脂联素与胰岛素抵抗的相关性研究[D].华中科技大学.2008
[7].崔志华,张木勋,张建华,杨雁,吴玉文.多囊卵巢综合征患者血浆酰化刺激蛋白和瘦素与胰岛素抵抗的关系[J].临床内科杂志.2008
[8].温宇.促酰化蛋白—受体C5L2在脂肪细胞分化和胰岛素抵抗中的作用研究[D].华中科技大学.2007
[9].黄涛,黄开勋.亚油酸酰化胰岛素的制备及飞行质谱分析[J].化学研究与应用.2006
[10].黄涛,黄开勋.油酸酰化胰岛素的制备及飞行质谱分析[J].化学研究.2005
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