猪圆环病毒3型微滴数字PCR定量检测方法的建立

论文摘要

猪圆环病毒3型是一种新型猪圆环病毒,可引起猪感染相关疾病。本实验根据猪圆环病毒3型的OPF2基因序列,设计引物探针,建立了可对其准确定量检测的微滴数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)方法。通过对dd PCR反应体系中的引物探针浓度和退火温度进行优化,得到dd PCR反应的最佳引物探针浓度比为800 nM:800 nM:400 nM;最佳退火温度为60℃。该dd PCR方法的标准曲线相关系数(R2)为0.999,呈良好的线性关系;灵敏度高,可达4.4 copies/μL;特异性良好,与常见猪病原无交叉反应。通过对临床样品的检测结果证明,本研究建立的猪圆环病毒3型dd PCR检测方法比实时荧光PCR检测方法的灵敏度高1个数量级,检测结果与荧光PCR定性结果一致,并且可对可疑样本进行定量分析。结果表明:新建立的dd PCR方法灵敏度高、特异性强,可用于猪圆环病毒3型的定量检测。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 石磊,刘雨琦,李丽丽

关键词: 猪圆环病毒型,微滴数字,检测方法

来源: 现代食品科技 2019年02期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 暨南大学食品安全与营养研究院

基金: 国家重点研发计划重点专项(2016YFD0500600),中央高校基本科研业务费项目(2017MS104,21618309),广东省科技计划项目(2017B020207004)

分类号: S852.65

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.2.032

页码: 232-237

总页数: 6

文件大小: 1613K

下载量: 269

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