实时荧光环介导等温扩增技术检测猪肉中的假单胞菌

论文摘要

根据假单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,并向反应体系中加入饱和型核酸染料Eva Green,利用实时荧光检测仪,建立假单胞菌属实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)。研究中对62株假单胞菌的16S rDNA基因通过DNAMAN软件进行序列比对后,针对共有片段设计扩增引物。对扩增体系进行了优化,优化结果经电泳鉴定。通过12株假单胞菌和23株非假单胞菌进行特异性验证,并比较了实时荧光LAMP与普通LAMP的灵敏度,对人工污染样品的检出限进行了测定。结果表明,特异性验证中12株假单胞菌为阳性,23株非假单胞菌为阴性。实时荧光LAMP检测纯菌的灵敏度为36 CFU/mL,是普通LAMP灵敏度的10倍。人工污染样品的检出限为1.73×10~3 CFU/g。本研究中建立了一种检测冷鲜猪肉中假单胞菌属的方法,实现了多个菌种的同时检测,避免了单一菌种检测的局限性,该方法快速、准确、灵敏度高,可在2 h内完成冷鲜猪肉中假单胞菌的检测。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李宁,张友雄,吴清平,古其会,张银志,王加生,孙秀兰,张菊梅

关键词: 实时荧光环介导等温扩增,假单胞菌,检测,猪肉

来源: 现代食品科技 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,轻工业手工业

单位: 江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室国家功能食品工程技术研究中心食品安全协同创新中心食品安全国际联合研究实验室,广东省微生物研究所省部共建华南应用微生物国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室,佐治亚大学公共卫生学院环境健康科学系

基金: 国家重点研发计划项目(2016YFD0401204),广东省科技计划项目(2016A010105012),广东省科学院创新驱动发展能力建设专项(2017GDASCX-0201)

分类号: TS251.51;O657.3

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.6.035

页码: 264-272

总页数: 9

文件大小: 3172K

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标签：实时荧光环介导等温扩增论文;  假单胞菌论文;  检测论文;  猪肉论文;