m6A识别蛋白Ythdf3在精子发生中的作用研究

m6A识别蛋白Ythdf3在精子发生中的作用研究

论文摘要

目的:通过基因敲除模型研究N6-甲基腺嘌呤(m6A)识别蛋白Ythdf3在小鼠精子发生过程的调控作用。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建Ythdf3基因敲除小鼠,通过免疫荧光和HE染色对敲除小鼠进行表型分析,研究Ythdf3在调控小鼠精子发生过程中的作用。结果:免疫组化染色显示Ythdf3在精原及各级生精细胞核中均有表达;成功构建Ythdf3基因敲除小鼠模型;HE染色显示Ythdf3敲除小鼠睾丸各级生精时相及附睾尾精子与对照相比无明显异常。结论:在正常生理条件下,敲除Ythdf3不影响雄性小鼠精子发生。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 构建敲除小鼠模型
  •     1.2.2 TA克隆
  •     1.2.3 RT-PCR检测Ythdf3基因表达情况
  •     1.2.4 基因型鉴定
  •     1.2.5 免疫荧光染色
  •     1.2.6 HE染色
  •     1.2.7 免疫组化染色
  •     1.2.8 Western blot
  • 2 结果
  •   2.1 Ythdf3在小鼠睾丸中的表达情况
  •   2.2 构建Ythdf3基因敲除小鼠
  •   2.3 Ythdf3敲除小鼠表型分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 宋小玲,刘媛媛,王仿竹,沈彬

    关键词: 精子发生

    来源: 南京医科大学学报(自然科学版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 南京医科大学生殖医学国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(31622039),江苏省自然科学基金(BK20160045)

    分类号: Q492

    页码: 846-850

    总页数: 5

    文件大小: 1348K

    下载量: 239

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