甲型流感病毒NS1蛋白与宿主蛋白eIF3f相互作用促进病毒复制的研究

甲型流感病毒NS1蛋白与宿主蛋白eIF3f相互作用促进病毒复制的研究

论文摘要

甲型流感病毒(IAV)非结构蛋白1 (NS1)是一种重要的毒力因子,其通过与多种宿主细胞因子相互作用抑制宿主细胞天然免疫反应和调控流感病毒复制。为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白,本研究利用H1N1亚型流感病毒NS1蛋白作为"诱饵"蛋白,经过Flag pull-down联合质谱分析筛选得到4个与NS1可能相互作用的宿主蛋白eIF3f、ENO1、CCAR2和PSB2。对筛选得到的宿主蛋白评分分析后,针对宿主蛋白eIF3f进行双分子荧光互补分析(BiFC)试验验证NS1蛋白与eIF3f蛋白的相互作用,结果显示eIF3f蛋白与NS1蛋白存在相互作用,并且在HEK293T细胞中瞬时过表达的eIF3f促进了H1N1亚型流感病毒的复制。本研究为进一步探究eIF3f蛋白在流感病毒复制中发挥的生物学功能奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 NS1蛋白的Flag pull-down试验
  •   1.3 蛋白样品的银染分析及质谱分析
  •   1.4 重组质粒的构建与鉴定
  •   1.5 NS1与e IF3f蛋白相互作用的Bi FC检测
  •   1.6 过表达e IF3f蛋白对H1N1 SC09病毒复制的影响
  • 2 结果
  •   2.1 Flag pull-down蛋白样品的western blot分析
  •   2.2 Flag pull-down蛋白样品的银染分析结果
  •   2.3 蛋白样品的质谱分析结果
  •   2.4 重组质粒的构建和鉴定结果
  •   2.5 H1N1 SC09 NS1蛋白与e IF3f蛋白相互作用的验证
  •   2.6 过表达e IF3f蛋白对H1N1 SC09病毒复制的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 林朝辉,张振宇,徐菱,任会玲,王晓钧

    关键词: 甲型流感病毒,蛋白,蛋白相互作用

    来源: 中国预防兽医学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/马传染病和慢病毒病研究创新团队

    基金: 国家自然基金青年基金(31702269),国家自然科学基金创新研究群体科学基金(31521005)

    分类号: S852.65

    页码: 999-1003

    总页数: 5

    文件大小: 622K

    下载量: 246

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