3株猪源大肠埃希氏菌耐药基因的初步定位

3株猪源大肠埃希氏菌耐药基因的初步定位

论文摘要

本试验旨在对临床分离的猪源大肠埃希氏菌耐药基因进行初步定位。采用常规细菌分离培养、16S rRNA PCR扩增和序列测定方法从江西省3个规模化猪场送检的子宫脓液中分离鉴定病原菌,并通过质粒提取、转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞及药敏试验对临床分离株的耐药基因进行初步定位。结果显示,分离鉴定到3株大肠埃希氏菌,其中JX-22分离株仅对氧氟沙星、大观霉素敏感,JX-26分离株仅对链霉素、氧氟沙星等4种药物敏感,JX-28分离株仅对氧氟沙星等3种药物敏感,均为多重耐药菌;3株大肠埃希氏菌均可纯化到分子质量大小不一的质粒。分离株、质粒转化菌及大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞药敏试验对比结果显示,3株大肠埃希氏菌的耐链霉素、林可霉素、甲硝唑、氨苄西林、阿莫西林、大观霉素、丁胺卡那基因,JX-22和JX-26分离株的耐多西环素、氟苯尼考和复方新诺明基因,JX-22分离株的耐头孢曲松基因,JX-28分离株的耐头孢曲松、头孢噻肟、诺氟沙星基因均定位于细菌质粒上;JX-28分离株的耐多西环素、氟苯尼考和复方新诺明基因,JX-22分离株的耐诺氟沙星基因和JX-26分离株的耐头孢曲松、头孢噻肟基因均定位于其染色体上;3株分离株均无氧氟沙星耐药基因。本试验初步确定3株多重耐药猪源大肠埃希氏菌的大部分耐药基因定位于质粒上,为进一步研究猪源大肠埃希氏菌的耐药机理和有效控制措施奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 病料
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 引物设计与合成
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细菌分离鉴定
  •     1.2.2 菌液PCR
  •     1.2.3 序列测定与分析
  •     1.2.4 药敏试验
  •     1.2.5 耐药质粒提取与鉴定
  •     1.2.6 质粒转化
  •     1.2.7 质粒转化菌药敏试验
  • 2 结 果
  •   2.1 细菌分离纯化
  •   2.2 分离菌PCR及序列测定分析
  •   2.3 药敏试验
  •   2.4 耐药质粒提取结果
  •   2.5 转化菌药敏试验结果
  •   2.6 综合分析
  • 3 讨 论
  • 4 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨行,殷贵虎,张文波,唐云云

    关键词: 大肠埃希氏菌,多重耐药,耐药基因,药敏试验

    来源: 中国畜牧兽医 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 江西农业大学动物科学技术学院

    基金: 江西省科技支撑计划项目(20121BBF60031),江西省现代农业产业技术体系建设专项资金(JXARS-03)

    分类号: S852.6

    DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.04.034

    页码: 1244-1251

    总页数: 8

    文件大小: 1807K

    下载量: 126

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