绿色荧光蛋白标记植物乳杆菌及其生物学特性分析

绿色荧光蛋白标记植物乳杆菌及其生物学特性分析

论文摘要

为探究绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记对植物乳杆菌生物学特性的影响,采用GFP对4株植物乳杆菌进行标记,并比较标记前后菌株的生物学特性。结果显示,标记前后菌株生长情况基本相同,其中P2和P4被GFP标记后生长略有滞后;标记前后的菌株对胃酸和胆盐的耐受趋势基本一致,无显著差别;在-80℃冻存2周内,标记前后所有菌株的活菌数无显著变化;对低聚果糖利用能力无变化;标记后所有菌株对氯霉素有抗性,标记前菌株对氯霉素敏感,对其他13种抗生素的敏感性无变化。说明GFP标记不影响植物乳杆菌的生物学特性,为可视化研究植物乳杆菌在小鼠肠道内的定植和分布提供了理论依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株
  •   1.2 培养基及试剂
  •   1.3 仪器与设备
  •   1.4 植物乳杆菌感受态细胞制备
  •   1.5 植物乳杆菌电转化方法
  •   1.6 PCR验证
  •   1.7 倒置荧光显微镜观察
  •   1.8 荧光强度测定
  •   1.9 生长曲线测定
  •   1.1 0 胃酸和胆盐耐受性试验
  •   1.11-80℃冻存2周活菌计数
  •   1.1 2 低聚果糖利用能力的测定
  •   1.1 3 抗生素对微生物生长的最低抑制浓度(mini-mum inhibitory concentration,MIC)
  •   1.1 4 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 GFP标记植物乳杆菌
  •     2.1.1 质粒PCD4033-GFP电转化后重组菌株的筛选
  •     2.1.2 重组菌株验证
  •     2.1.3 荧光显微镜观察
  •   2.2 生物学特性比较研究
  •     2.2.1 生长曲线及不同生长阶段荧光强度的测定
  •     2.2.2 胃酸耐受性和胆盐耐受性的测定
  •     2.2.3 冻存前后的活菌数及荧光强度的变化
  •     2.2.4 对低聚果糖(FOS)利用能力的测定
  •     2.2.5 抗生素最低抑制浓度(MIC)测定
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈彩玲,毛丙永,崔树茂,赵建新

    关键词: 植物乳杆菌,绿色荧光蛋白,重组菌株,生物学特性

    来源: 食品与发酵工业 2019年20期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 江南大学食品学院

    基金: 国家自然科学基金(31601453)

    分类号: TS201.3

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.020432

    页码: 22-28+34

    总页数: 8

    文件大小: 1790K

    下载量: 432

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