首页> 正文

重组R/Q亚型人血清对氧磷酶1的制备和两者解毒效应比较

2020-11-28阅读(263)

重组R/Q亚型人血清对氧磷酶1的制备和两者解毒效应比较

论文摘要

目的通过基因重组的方法制备人血清对氧磷酶1的R/Q亚型同工酶(rhPON1R/Q192),并比较两种酶作为有机磷中毒解毒剂的效果差异。方法通过昆虫杆状病毒蛋白表达体系获得rhPON1R/Q192。将30只60日龄的雄性昆明种小鼠随机分成染毒对照组、染毒治疗A组、染毒治疗B组,每组10只。将对氧磷按2倍LD50（1.72 mg/kg）的剂量,对各组小鼠采用经口灌胃的方式染毒。而后立即将纯化的rhPON1R192和rhPON1Q192作为解毒剂,按10 U/kg的剂量采用腹腔注射方式分别予A、B染毒治疗组小鼠。连续观察12 h,记录并比较各组小鼠中毒指标的差异,评价rhPON1R/Q192的解毒效果。结果通过基因重组的方法可以大量获得具有对氧磷水解活性的rhPON1R/Q192,其中rhPON1R192的产率为8.34%,比活性为1 552.31 U/mg;rhPON1Q192的产率为10.60%,比活性为581.60 U/mg。对照组小鼠在观察期内均出现了中毒症状,死亡率为100%。染毒治疗A、B组小鼠出现中毒症状、De Bleeker评分达到3分及死亡时间均明显延迟（P<0.05）;两组的死亡率分别是10%和20%,较对照组明显下降（P<0.05）。A组的各项指标均明显好于B组（P<0.05）。结论通过基因重组方法获取的rhPON1R/Q192,可用作对氧磷中毒的解毒剂,且R亚型同工酶解毒效果更好。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 构建对氧磷酶1的R/Q亚型同工酶（rhPON1R/Q192）基因序列的质粒表达系统
  •       1.2.1.1 目的基因序列合成
  •       1.2.1.2 目的基因片段鉴定和分离
  •       1.2.1.3 线性载体的制备和鉴定
  •       1.2.1.4 连接载体和目的基因
  •       1.2.1.5 目标基因的载体转化至感受态细胞
  •       1.2.1.6 提取目的基因的杆粒DNA
  •     1.2.2 rhPON1R/Q192的表达和鉴定
  •       1.2.2.1 IPLB-SF21 细胞的培养和转染
  •       1.2.2.2 目标蛋白的获取及鉴定
  •     1.2.3 目的蛋白的纯化
  •     1.2.4 rhPON1R/Q192活性检测
  •   1.3 实验动物分组
  •   1.4 中毒指标观察
  •   1.5 统计分析
  • 2 结果
  •   2.1 基因质粒连接产物的鉴定
  •   2.2 病毒感染IPLB-SF 21细胞的镜检结果
  •   2.3 目标蛋白的检测
  •     2.3.1 SDS-PAGE
  •     2.3.2 Western blot
  •     2.3.3 活性检测
  •   2.4 rhPON1R/Q192解毒效果
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 崔玥,韩朗

    关键词: 对氧磷酶,基因重组,对氧磷中毒,基因多态性

    来源: 中国工业医学杂志 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工,药学

    单位: 沈阳医学院附属中心医院急诊科,中国医科大学附属盛京医院

    基金: 沈阳医学院科技基金项目(编号:20161017)

    分类号: R943;R96

    DOI: 10.13631/j.cnki.zggyyx.2019.06.002

    页码: 438-442+445+513

    总页数: 7

    文件大小: 10416K

    下载量: 14

    相关论文文献

    • [1].对氧磷酶1在高密度脂蛋白结构与功能中的意义[J]. 中国动脉硬化杂志 2015(12)
    • [2].阿尔茨海默病患者血清对氧磷酶1活性的变化[J]. 中国老年学杂志 2016(20)
    • [3].髓过氧化物酶/对氧磷酶1与高密度脂蛋白功能的关系[J]. 西部医学 2020(10)
    • [4].慢性胰腺炎患者血清对氧磷酶1活性变化[J]. 中华实用诊断与治疗杂志 2014(01)
    • [5].血清对氧磷酶I与慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化的关系[J]. 社区医学杂志 2013(04)
    • [6].对氧磷酶1参与香猪高脂模型脂质代谢研究[J]. 湖北农业科学 2012(07)
    • [7].对氧磷酶3基因研究进展[J]. 中国动脉硬化杂志 2012(10)
    • [8].对氧磷酶1基因多态性与疾病遗传易感性的研究进展[J]. 国际检验医学杂志 2016(03)
    • [9].对氧磷酶-1与多囊卵巢综合征关系的研究进展[J]. 中华妇幼临床医学杂志(电子版) 2015(02)
    • [10].类风湿关节炎患者对氧磷酶-1活性变化与动脉粥样硬化形成[J]. 现代医学 2012(02)
    • [11].脑梗死与对氧磷酶1基因192G/A位点多态性的关系[J]. 诊断学理论与实践 2011(01)
    • [12].子宫内膜异位症患者血清对氧磷酶-1的表达及临床意义[J]. 现代妇产科进展 2010(02)
    • [13].急性炎症反应时血清对氧磷酶1活性变化及苯扎贝特的干预作用[J]. 中国动脉硬化杂志 2008(02)
    • [14].石家庄地区人群对氧磷酶3基因多态性研究[J]. 脑与神经疾病杂志 2017(07)
    • [15].对氧磷酶2基因多态性与脑梗死的相关性研究[J]. 中西医结合心脑血管病杂志 2012(06)
    • [16].血对氧磷酶1活性与颈动脉粥样硬化斑块形态的相关性研究[J]. 神经损伤与功能重建 2012(05)
    • [17].阻塞性睡眠呼吸暂停患者血清对氧磷酶-1活性变化的研究[J]. 实用医学杂志 2010(10)
    • [18].对氧磷酶1基因多态性与缺血性脑卒中的关联研究[J]. 中风与神经疾病杂志 2008(06)
    • [19].血清对氧磷酶-1研究进展[J]. 中国医药导报 2019(23)
    • [20].老年人颈动脉粥样硬化与血清对氧磷酶1活性的关系[J]. 中国老年学杂志 2018(09)
    • [21].血清对氧磷酶3水平与2型糖尿病肾病的关系[J]. 广东医学 2014(01)
    • [22].对氧磷酶2研究进展[J]. 重庆医学 2013(12)
    • [23].肺结核患者血清对氧磷酶-1的活性改变及意义[J]. 南昌大学学报(医学版) 2011(04)
    • [24].陕西某高校健康教职工血清对氧磷酶浓度及其影响因素[J]. 中国学校卫生 2011(11)
    • [25].对氧磷酶与癌关系的研究进展[J]. 医学研究杂志 2010(07)
    • [26].对氧磷酶1基因启动子区-909C/G多态性与脑梗死的相关性[J]. 中国实用神经疾病杂志 2013(07)
    • [27].脑梗死与对氧磷酶1基因-162A/G多态性的关系[J]. 诊断学理论与实践 2011(03)
    • [28].人对氧磷酶1在巴斯德毕赤酵母中的表达与纯化[J]. 现代食品科技 2017(07)
    • [29].血管内皮生长因子及对氧磷酶1基因多态性与糖尿病视网膜病变的相关性[J]. 重庆医学 2017(30)
    • [30].对氧磷酶1Q192R基因多态性与2型糖尿病合并牙周病的相关性[J]. 中国老年学杂志 2015(08)

    标签：;  ;  ;  ;  

    重组R/Q亚型人血清对氧磷酶1的制备和两者解毒效应比较
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕论降 版权所有 鄂ICP备12018319号-6