健脾养血解毒方通过调节Treg/Th17免疫平衡改善脾虚-银屑病复合模型小鼠银屑病样皮损

健脾养血解毒方通过调节Treg/Th17免疫平衡改善脾虚-银屑病复合模型小鼠银屑病样皮损

论文摘要

目的:建立脾虚银屑病样小鼠模型,观察健脾养血解毒方对其银屑病样皮损的干预作用,并探讨其作用机制。方法:首先采用苦寒泻下结合营养限制法建立脾虚小鼠模型,持续15 d后检测验证,将脾虚小鼠随机分为单纯脾虚组(脾虚-Ctr)、脾虚银屑病样组(脾虚-IMQ)、阳性对照组(脾虚-MTX)和健脾养血解毒方高、中、低剂量组(JPYXJD-H,M,L),采用咪喹莫特诱导-银屑病样模型。观察各组小鼠皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI),每日拍照记录;治疗后第6天取材,计算脾脏及淋巴结指数;光镜下观察皮损组织形态学变化及表皮层厚度;免疫组织化学法检测皮损中PCNA和CD3的表达;流式细胞术检测小鼠淋巴结中Treg和Th17细胞数量; RT-PCR技术检测皮损中IL-17A、IL-23、FOXP3、ROR-γt等相关基因表达水平;采用Western Blotting法检测pSTAT3、PPAR-γ通路蛋白表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,脾虚组表观指征异常明显,血清中D-木糖含量明显降低(P<0.05)。(2)与脾虚-Ctr组相比,脾虚-IMQ组小鼠皮损PASI评分及表皮厚度明显增加,皮损部位PCNA、CD3阳性个数显著增多,IL-17、IL-23、ROR-γt和IFN-γ等炎症因子的表达明显升高,pSTAT蛋白表达升高而PPAR-γ蛋白表达降低的趋势明显。JPYXJD-H、M、L组与其相比各项指标均有不同程度改善,其中以JPYXJD-L组最为显著。结论:健脾养血解毒方在传统理血解毒的基础上强调健脾治法,并依此增加健脾药的使用,从而发挥对脾虚证-银屑病复合模型小鼠皮损的干预作用,通过PPAR-γ/pSTAT3通路调节Treg/Th17之间的免疫平衡可能是其有效作用机制之一。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 动物
  •   1.2 药物与试剂
  •   1.3 主要仪器
  •   1.4 模型制备及分组给药
  •     1.4.1 采用苦寒泻下结合营养限制法建立脾虚证模型[9-11]
  •     1.4.2 参考Van Der Fits等[12]实验复合银屑病样小鼠模型
  •   1.5 检测指标与方法
  •     1.5.1小鼠D-木糖吸收试验
  •     1.5.2小鼠银屑病样皮损面积和疾病严重程度(psoriasis area and severity index,PASI)评分
  •     1.5.3小鼠脾脏指数及淋巴结质量
  •     1.5.4小鼠皮损组织形态学观察
  •     1.5.5皮损表皮层中PCNA(proliferatingcell nuclear antigen)的表达
  •     1.5.6皮损真皮层中CD3的表达
  •     1.5.7小鼠腹股沟淋巴结CD+4CD+25FOXP3+T细胞、CD+4RORγt+T细胞检测
  •     1.5.8小鼠皮损中IL-17A、IL-23、FOXP3、ROR-γt、IL-10及INF-γmRNA的检测
  •     1.5.9小鼠皮损中pS TAT3,PPAR-γ通路相关蛋白表达的检测
  •   1.6 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 小鼠脾虚表观异常观察及血清D-木糖吸收试验
  •   2.2 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病样复合模型小鼠皮损的干预作用
  •   2.3 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病样复合模型小鼠皮损组织学的干预作用
  •   2.4 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病样复合模型小鼠皮损中角质形成细胞增殖、分化的干预作用
  •   2.5 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病样复合模型小鼠皮损中CD+3细胞浸润差异及其的干预作用
  •   2.6 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病复合小鼠模型体质量、淋巴结质量及脾指数的影响
  •   2.7健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病样复合小鼠模型淋巴结中CD+4FOXP3+RORγt-T细胞、CD+4FOXP3-RORγt+T细胞数的影响
  •   2.8 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病复合小鼠模型皮损中ROR-γt、IL-17A、IL-23、INF-γ、FOXP3、IL-2、IL-6及IL-10mRNA的影响
  •   2.9 健脾养血解毒方对脾虚证-银屑病样复合小鼠模型皮损中pSTAT3,PPAR-γ通路蛋白表达的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 翟春艳,底婷婷,王燕,蒙玉娇,李宁飞,刘正荣,郭肖瑶,刘宇,郭简宁,李萍

    关键词: 银屑病,健脾养血解毒方

    来源: 中华中医药学刊 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中医学,基础医学

    单位: 首都医科大学附属北京中医医院,北京中医研究所银屑病中医临床基础研究北京市重点实验室,北京中医药大学

    基金: 国家自然科学基金项目(81573974),北京市自然科学基金项目(7171003),国家中医药管理局国家中医临床研究基地业务建设科研专项项目(JDZX2015190)

    分类号: R275;R-332

    DOI: 10.13193/j.issn.1673-7717.2019.12.017

    页码: 2888-2893+3103-3106

    总页数: 10

    文件大小: 5982K

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