柔毛淫羊藿有效药用成分与土壤微生物群落研究

柔毛淫羊藿有效药用成分与土壤微生物群落研究

论文摘要

本研究以广元市唐家河国家级自然保护区和南充市金城山森林公园的柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens)为研究对象,采用高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法测定柔毛淫羊藿中有效药用成分(淫羊藿苷和总黄酮)的含量;同时利用Miseq高通量测序技术研究了柔毛淫羊藿根际土壤微生物多样性,以期为柔毛淫羊藿的栽培提供理论依据,主要研究结果如下:1.不同群落样地有效药用成分研究。(1)唐家河三个群落中(A,B和C),群落A中柔毛淫羊藿的淫羊藿苷含量最高,群落B中的淫羊藿苷含量最少;群落A中黄酮含量最少,群落C中的黄酮含量最多。(2)金城山森林公园群落中,淫羊藿苷的含量依次为公路﹥栈道﹥树林﹥竹林;黄酮含量依次为竹林>公路﹥栈道﹥树林;(3)在公路群落不同季节中,淫羊藿苷含量依次为冬天﹥秋天﹥春天﹥夏天,黄酮含量依次为冬天﹥夏天﹥秋天﹥春天,冬天柔毛淫羊藿中淫羊藿苷和黄酮含量都是最高的。2.不同群落样地微生物多样性的研究。(1)唐家河保护区A、B、C三个不同群落中:多样性指数(shonnon)依次为群落B﹥群落A﹥群落C,但丰富度(chao)依次为群落C﹥群落A﹥群落B。因此群落B的多样性最高,但丰富度最低,而群落C的多样性最低,丰度最高。进一步对土壤微生物的物种组成进行分析,三个不同群落中共有的几大优势中为变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、绿弯菌门(Chloroflexi)、放线菌门(Actinobacteria)、硝化螺旋菌门(Nitrospirae)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、芽单孢菌门(Gemmatimonadetes)、浮霉菌门(Planctomycetes)和Latescibacteria。其中,变形菌门、酸杆菌门、绿弯菌门为最优势菌群。群落A的绿弯菌门含量比群落B群落C多,群落B和群落C中硝化螺旋菌门、拟杆菌门优于群落A。(2)金城山森林公园群落中,多样性指数(Shannon)依次为栈道旁﹥公路旁﹥竹林处﹥树林处,但丰富度(chao)依次为公路旁﹥栈道旁﹥竹林处﹥树林处,栈道处群落的多样性性最高,但公路处丰富度最高,树林处群落的多样性和丰富度都最较低;进一步对土壤微生物的物种组成进行分析,四个不同群落中变形菌门、酸杆菌门、绿弯菌门、放线菌门、硝化螺旋菌门、浮霉菌门、芽单孢菌门是主要的菌群。其中变形菌门、酸杆菌门、绿弯菌门为优势菌群。但群落公路处和栈道处的绿弯菌门含量高于树林处群落和竹林处群落,树林处群落和竹林处群落中变形菌门含量优于群落公路旁和栈道旁。(3)不同季节中,多样性指数依次秋天﹥冬天﹥夏天﹥春天;丰富度依次为秋天﹥冬天﹥夏天﹥春天。说明四个季度中多样性和丰富度变化一致,秋天多样性和丰富度都高的,春天的多样性和丰富度最低。进一步对土壤微生物的物种组成进行分析,四个季度共有的几大优势菌种是变形菌门、酸杆菌门、绿弯菌门、放线菌门、硝化螺旋菌门。变形菌门在春季所占比例少于其他三个季节;酸杆菌门在秋天含量最高;绿弯菌门在冬季含量少于其他三个季节;放线菌门在四个季度差异不大,硝化螺旋菌门在春夏中的占比显著多于秋冬。3.土壤微生物与有效药用成分的相关性分析。(1)唐家河保护区土壤中Acidibacter与淫羊藿苷的含量呈显著正相关,其它相关性都不显著;Nocardioioides,Haliangium和Nitrospira与淫羊藿苷的含量呈显著负相关,其它相关性都不显著。总黄酮含量与土壤微生物没有显著相关性。(2)金城山中BurkholderiaspyxAZ32与淫羊藿苷的含量呈显著负相关。总黄酮含量与土壤微生物没有显著相关性。(3)不同季节中,H16和淫羊藿苷的含量呈显著负相关。Hliangium与总黄酮含量呈显著负相关。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 文献综述
  •   1.1 淫羊藿属植物概述
  •     1.1.1 淫羊藿属植物分布
  •     1.1.2 淫羊藿属植物的化学成分
  •     1.1.3 淫羊藿属植物的功效
  •     1.1.4 淫羊藿属植物有效成分提取
  •     1.1.5 淫羊藿属植物中总黄酮与淫羊藿苷的鉴定检测
  •   1.2 土壤微生物多样性
  •     1.2.1 土壤微生物多样性
  •     1.2.2 土壤微生物与土壤的相互关系
  •     1.2.3 土壤微生物与植物的关系
  •     1.2.4 土壤微生物与植物有效成分的关系
  •     1.2.5 土壤微生物多样性研究方法
  •   1.3 研究背景与目的
  • 第2章 柔毛淫羊藿有效成分含量的研究
  •   2.1 研究区概况
  •     2.1.1 唐家河自然保护区
  •     2.1.2 金城山森林公园
  •   2.2 样品的采集与处理
  •     2.2.1 唐家河保护区样品采集
  •     2.2.2 金城山森林公园样品采集
  •   2.3 材料与方法
  •     2.3.1 主要实验设备与试剂
  •     2.3.2 试验方法
  •   2.4 结果分析
  •     2.4.1 色谱分离
  •     2.4.2 唐家河保护区不同群落柔毛淫羊藿淫羊藿苷与黄酮含量
  •     2.4.3 金城山公园不同群落柔毛淫羊藿淫羊藿苷与黄酮含量
  •     2.4.4 金城山公园不同季节柔毛淫羊有效成分含量的变化
  •   2.5 讨论
  • 第3章 唐家河自然保护区不同群落柔毛淫羊藿根际土壤微生物多样性研究
  •   3.1 研究区概况
  •   3.2 样品的采集与处理
  •   3.3 材料与方法
  •     3.3.1 实验仪器与试剂
  •     3.3.2 试验方法
  •   3.4 结果分析
  •     3.4.1 不同样品DNA提取结果
  •     3.4.2 PCR扩增结果
  •     3.4.3 土壤DNA高通量测序及序列分析
  •     3.4.4 稀释曲线
  •     3.4.5 不同群落土壤细菌群落多样性指数与丰富度
  •     3.4.6 不同群落土壤细菌物种组成
  •     3.4.7 样品热图
  •     3.4.8 相似度聚类分析
  •     3.4.9 主成分分析
  •   3.5 讨论
  • 第4章 金城山不同群落柔毛淫羊藿根际土壤微生物多样性研究
  •   4.1 研究区概况
  •   4.2 样品的采集与处理
  •   4.3 材料与方法
  •   4.4 结果分析
  •     4.4.1 土壤DNA高通量测序及序列分析
  •     4.4.2 稀释曲线
  •     4.4.3 土壤细菌群落多样性指数与丰度
  •     4.4.4 不同样地土壤细菌物种组成
  •     4.4.5 样品热图
  •     4.4.6 相似度聚类分析
  •     4.4.7 主成分分析
  •   4.5 讨论
  • 第5章 不同产地柔毛淫羊藿土壤微生物组成及差异分析
  •   5.1 不同产地柔毛淫羊藿土壤微生物多样性分析
  •   5.2 不同产地柔毛淫羊藿土壤微生物物种组成分析
  •     5.2.1 物种组成在门水平上的差异
  •     5.2.2 物种组成在纲水平上的差异
  •     5.2.3 物种组成在目水平上的差异
  •     5.2.4 物种组成在科水平上的差异
  •     5.2.5 物种组成在属水平上的差异
  •     5.2.6 物种组成在种水平上的差异
  •   5.3 讨论
  • 第6章 金城山森林公园不同季度柔毛淫羊藿土壤微生物多样性
  •   6.1 研究区概况
  •   6.2 样品的采集与处理
  •   6.3 材料与方法
  •   6.4 结果分析
  •     6.4.1 土壤DNA高通量测序及序列分析
  •     6.4.2 稀释曲线
  •     6.4.3 土壤细菌群落多样性指数与丰度
  •     6.4.4 不同季度土壤细菌物种组成
  •     6.4.5 样品热图
  •     6.4.6 相似度聚类分析
  •     6.4.7 主成分分析
  •   6.5 讨论
  • 第7章 柔毛淫羊藿有效成分与土壤微生物的相关性分析
  •   7.1 唐家河保护区土壤细菌组成与药用成分含量的相关性分析
  •   7.2 金城山森林公园土壤细菌群落与药用成分含量的相关性分析
  •   7.3 不同季度柔毛淫羊藿土壤细菌组成与药用成分含量的相关性分析
  •   7.4 讨论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 在学期间的科研情况
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 何理

    导师: 权秋梅,黎云祥

    关键词: 柔毛淫羊藿,有效药用成分,土壤微生物,高通量测序

    来源: 西华师范大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,农业基础科学,农艺学,农作物

    单位: 西华师范大学

    分类号: S154.3;S567.239

    总页数: 92

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