以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立

以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立

论文摘要

为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体的犬细小病毒(CPV)抗体检测的间接凝集方法,本研究表达纯化了CPV-2 VP2截短的重组蛋白rsVP2,并以rsVP2为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过对反应条件的优化,建立了一种快速检测CPV-2抗体的间接凝集方法。特异性试验结果显示,致敏微球仅与CPV-2阳性血清发生凝集反应,不与犬瘟热病毒、狂犬病病毒和犬腺病毒的阳性血清发生凝聚反应,特异性强;该凝集方法检测血清中和抗体的最低效价为1∶256;同一批次制备的3份致敏微球、3个不同批次制备的致敏微球以及4℃保存90 d的致敏微球与CPV-2阳性血清的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性均较好。该间接凝集检测方法对40份血清样品的检测结果与Immuno Comb? Canine VacciCheck试剂盒(Dot-ELISA)检测结果的阳性符合率为97%。本研究建立的间接凝集方法为幼犬CPV-2母源抗体或免疫犬CPV-2抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的方法。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 引物的设计与合成
  •   1.3 svp2基因的PCR扩增
  •   1.4 重组蛋白rsVP2的表达与鉴定
  •   1.5 CPV-2抗体间接凝集检测方法的建立
  •   1.6 特异性试验
  •   1.7 敏感性试验
  •   1.8 重复性、稳定性试验
  •   1.9 临床样品的检测
  • 2 结果
  •   2.1 重组蛋白rsVP2的表达、纯化及鉴定
  •     2.1.1 svp2基因的克隆与表达
  •     2.1.2 rs VP2的纯化及鉴定
  •   2.2 CPV-2抗体间接凝集方法的建立
  •   2.3 特异性试验结果
  •   2.4 敏感性试验结果
  •   2.5 重复性、稳定性试验结果
  •   2.6 临床样品检测结果的比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 唐毓,苏瑞红,侯美佳,孙思萌,冯启峥,董秀梅,张萍,师东方

    关键词: 犬细小病毒,彩色聚苯乙烯纳米微球,间接凝集试验,抗体检测

    来源: 中国预防兽医学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 东北农业大学动物医学学院,农业部动物疫病病原生物学东北科学观测实验站

    基金: 农业部动物疫病病原生物学东北科学观测实验站观测项目,黑龙江省科技计划项目(GC12B303)

    分类号: S852.4

    页码: 605-610

    总页数: 6

    文件大小: 605K

    下载量: 102

    相关论文文献

    • [1].自组装法制备载有阿奇霉素的聚己内酯纳米微球的研究[J]. 合成技术及应用 2014(04)
    • [2].茶多酚/壳聚糖/海藻酸钠纳米微球的制备[J]. 包装工程 2017(19)
    • [3].玉米醇溶蛋白/壳聚糖复合纳米微球的制备及性能研究[J]. 化学研究与应用 2015(02)
    • [4].壳聚糖—盐酸胍纳米微球的制备及其在抗菌纸中的应用[J]. 福建农林大学学报(自然科学版) 2014(02)
    • [5].二氧化硅纳米微球的制备及其表面改性[J]. 材料导报 2014(22)
    • [6].高分子-无机复合纳米微球的制备和诊疗应用[J]. 化学进展 2014(Z1)
    • [7].中空纳米微球填充复合材料的有效力学性能[J]. 力学学报 2009(02)
    • [8].二硫化钼纳米微球的制备及其在摩擦领域中的应用[J]. 中国钼业 2018(06)
    • [9].改性壳聚糖抗菌纳米微球的制备[J]. 高等学校化学学报 2019(01)
    • [10].纳米微球在生物医药领域的应用[J]. 材料导报 2011(S2)
    • [11].药物色谱分析检测技术的“心脏”:纳米微球材料[J]. 中国粉体工业 2016(06)
    • [12].α-Fe_2O_3纳米微球的合成及气敏性能研究[J]. 化学试剂 2018(03)
    • [13].超细荧光聚合物纳米微球的制备[J]. 应用化学 2012(06)
    • [14].氟苯尼考/壳聚糖纳米微球的制备及其缓释性能[J]. 河南大学学报(自然科学版) 2010(01)
    • [15].5-氟尿嘧啶/壳聚糖载药纳米微球的制备及性能[J]. 化学研究与应用 2009(01)
    • [16].表面活性剂溶液对光子晶体晶格周期的影响[J]. 长春工业大学学报 2020(03)
    • [17].一种聚合物纳米微球调驱剂的制备及性能评价[J]. 辽宁石油化工大学学报 2019(04)
    • [18].壳聚糖包覆介孔二氧化硅纳米微球的制备及其对铜离子的吸附[J]. 福建师范大学学报(自然科学版) 2019(06)
    • [19].一种新型相变纳米微球增强高强度聚焦超声消融的实验研究[J]. 中国介入影像与治疗学 2017(12)
    • [20].左氧氟沙星聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微球的制备及性能分析[J]. 中国组织工程研究 2018(14)
    • [21].基于离子液体微乳液淀粉纳米微球载药性和释药性研究[J]. 粮食与油脂 2015(12)
    • [22].两步水热法合成磺酸功能化碳质纳米微球及其催化性能研究[J]. 常州大学学报(自然科学版) 2018(02)
    • [23].静脉给予尿酸酶自组装空心纳米微球的药代动力学和生物等效性初步研究[J]. 食品与生物技术学报 2017(07)
    • [24].文丘里管空化强化壳聚糖抗菌纳米微球的制备研究[J]. 保鲜与加工 2018(03)
    • [25].聚合物纳米微球分离纯化莽草酸方法研究[J]. 河南科技 2014(01)
    • [26].超声脂质微泡与聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米微球复合体在小鼠肝脏的定位释放[J]. 中国医学影像技术 2012(06)
    • [27].载BDNF基因PEG-PLGA纳米微球的制备及其转染外源性神经干细胞的研究[J]. 临床神经外科杂志 2019(02)
    • [28].基于时间分辨荧光纳米微球的呕吐毒素快速定量检测试纸条的研制及性能研究[J]. 粮食加工 2017(03)
    • [29].TiO_2纳米微球的制备及在染料敏化太阳能电池中的应用[J]. 无机化学学报 2016(08)
    • [30].二氧化硅-聚丙烯腈核-壳结构复合纳米微球的制备与表征[J]. 功能高分子学报 2013(04)

    标签:;  ;  ;  ;  

    以免疫纳米微球为凝集原的犬细小病毒2型抗体凝集检测方法的建立
    下载Doc文档

    猜你喜欢