枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建

枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建

论文摘要

目的:为揭示真菌紫杉醇合成分子机制.方法:克隆了产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981,该基因DNA和cDNA序列分别为969 bp和894 bp;其编码蛋白含有298个氨基酸、无跨膜结构和信号肽,与酰基辅酶A脱氢酶(ACAD)具有73%的一致性.进一步构建该基因的超表达载体pTFC-A00981,并转化枝状枝孢霉MD2,共获得9株转基因菌株.结果:Southern blot分析证明其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式插入.结论:该结果为深入分析超表达候选基因A00981对枝状枝孢霉MD2紫杉烷类合成的影响奠定了基础.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 候选基因A00981 的克隆与生物信息学分析
  •   1.3 过表达载体pTFC-A00981 的构建与转化
  •   1.4 转基因菌株的检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 候选基因A00981 的克隆与分析
  •   2.2 pTFC-A00981 载体的构建与转化
  •   2.3 转基因菌株的检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张鹏,刘盼,周兰,裴婷,甘喆,李浩东,宋发军

    关键词: 枝状枝孢霉,紫杉醇,基因克隆,转基因菌株

    来源: 中南民族大学学报(自然科学版) 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室

    基金: 国家自然科学基金资助项目(31370118,31770134)

    分类号: Q78;Q93

    页码: 45-49

    总页数: 5

    文件大小: 674K

    下载量: 80

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