陕西省部分地区蜱源人兽共患无形体与立克次体的遗传多样性

陕西省部分地区蜱源人兽共患无形体与立克次体的遗传多样性

论文摘要

多种蜱传立克次氏体是呈全球分布的人兽共患病的病原体,为专性胞内寄生的原核生物,属于α变形菌门。立克次氏体主要以硬蜱属为媒介在动物间进行周期性传播,大部分哺乳动物都是立克次氏体的储存宿主。虽然现代规模化养殖在不断普及,但我国乃至世界其他国家与地区仍然存在着众多散养牛羊的传统养殖方式,且随着气候渐暖,蜱虫活动变活跃,使立克次氏体感染率上升,危害人和动物的健康,造成不必要的损失。在立克次氏体中,许多成员是重要的新发病原体,在人类或动物中引起无形体病、埃立克体病和立克次氏体病。在过去的二十年中,中国大陆已发现13种立克次氏体相关的人类致病性病原体,其中包括七种斑点热群立克次氏体(Spotted Fever Group Rickettsia,SFGR);两种埃立克体属,四种无形体属,以及无形体科中的米库尔新埃里克体(Candidatus Neoehrlichia mikurensis)。另一方面,陕西省西安市是肾综合征出血热的疫区,但在病原体的实验室确诊过程中在部分病人中未发现汉坦病毒核酸、抗原及抗体。而人感染立克次氏体的症状一般较轻,但偶尔可以引起包括出血,发热等症状,与肾综合征出血热的症状类似,因此这些非汉坦病毒感染的病人可能存在立克次氏体的感染。2017年3月至2019年3月间,我们在陕西省西安市周至县、临潼区、长安区和扈邑区采集了牛羊的抗凝全血样本305份,在西安市、安康市和宝鸡市采集了1120只蜱虫样本。然后进行人兽共患立克次体和无形体的鉴定。立克次体属的鉴定通过扩增其16S rRNA(rrs)基因、17-kDa基因、gltA基因和ompA基因;无形体属鉴定通过扩增其16S rRNA(rrs)基因、gltA基因和gorEL基因,进行序列分析,最后建立系统发生树了解其种类及与已知序列的亲缘关系。从西安市和宝鸡市的蜱虫样本中检测到242份立克次体属的Ca.R.jingxinensis序列;从西安市和安康市的蜱虫及牛羊血液样本中检测到无形体属的35份类扁平无形体、272份山羊无形体、1份羊无形体和14份类嗜吞噬细胞无形体(Ca.A.zhouzhiense和Ca.A.dongdaense)序列。本研究通过对陕西省部分地区进行蜱媒立克次体和无形体的分子流行病学研究,明确了这些人兽共患病原体在当地的流行情况,为散养户散养牛羊采取防控和药物治疗措施提供依据,为本病的流行病学研究和防控提供基础资料和参考,也为不明原因发热与出血病人的诊断提供理论依据。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 文献综述
  •   第一章 蜱虫与立克次氏体的概述与研究进展
  •     1.1 蜱的概述及其研究进展
  •       1.1.1 蜱的简介
  •       1.1.2 蜱的危害
  •       1.1.3 蜱的防治
  •     1.2 立克次氏体概述及其研究进展
  •       1.2.1 立克次氏体简介
  •       1.2.2 立克次氏体的危害
  •     1.3 立克次氏体的实验室检测
  •       1.3.1 半巢式聚合酶链式反应
  •       1.3.2 16S rRNA基因序列分析方法概括
  •     1.4 研究目的与意义
  • 试验研究
  •   第二章 蜱和牛羊携带人兽共患立克次体属的检测与遗传进化分析
  •     2.1 试验材料
  •       2.1.1 采集的样品
  •       2.1.2 主要仪器设备
  •       2.1.3 主要试剂
  •     2.2 试验方法
  •       2.2.1 样品的处理与DNA提取
  •       2.2.2 引物设计
  •       2.2.3 PCR反应体系与反应条件
  •       2.2.4 琼脂糖凝胶电泳
  •       2.2.5 目的基因回收纯化
  •       2.2.6 DNA连接
  •       2.2.7 阳性克隆的筛选与鉴定
  •       2.2.8 测序与分析
  •     2.3 结果
  •       2.3.1 样品鉴定结果
  •       2.3.2 序列比对与进化树分析
  •       2.3.3 遗传特征分析
  •     2.4 讨论
  •     2.5 小结
  •   第三章 蜱和牛羊中人兽共患无形体属病原体的检测与遗传进化分析
  •     3.1 试验材料
  •     3.2 试验方法
  •       3.2.1 引物设计
  •       3.2.2 PCR检测反应体系与条件
  •       3.2.3 琼脂糖凝胶电泳与测序
  •       3.2.4 序列分析
  •       3.2.5 统计学分析
  •     3.3 结果
  •       3.3.1 样品鉴定结果总结
  •       3.3.2 类扁平无形体系统发育关系分析
  •       3.3.3 山羊无形体、羊无形体和类嗜吞噬细胞无形体系统发育关系
  •     3.4 讨论
  •     3.5 小结
  • 结论
  • 附录
  • 参考文献
  • 致谢
  • 作者简介
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 王一涵

    导师: 周恩民,郭文平

    关键词: 人兽共患病,立克次氏体,无形体属,立克次体属,硬蜱

    来源: 西北农林科技大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 西北农林科技大学

    基金: 国家自然科学(青年项目)基金(编号:31700159)

    分类号: S852.64

    总页数: 56

    文件大小: 2821K

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