温阳健脾祛痰颗粒含药血清对非酒精性脂肪性肝病细胞模型TLR4/TRIF/NF-κB通路的影响

温阳健脾祛痰颗粒含药血清对非酒精性脂肪性肝病细胞模型TLR4/TRIF/NF-κB通路的影响

论文摘要

目的研究温阳健脾祛痰颗粒(WYJPQT)含药血清对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型的影响,初步探讨其作用机制。方法 0.25 mM油酸诱导HepG2细胞24 h,油红O染色和三酰甘油检测确定NAFLD细胞模型成功建立,将NAFLD细胞模型分为WYJPQT高、中、低剂量组,阳性对照组及模型组,同时设置空白对照组。随后进行含药血清的制备,WYJPQT高、中、低剂量组分别给予10%WYJPQT高、中、低剂量组含药血清培养基孵育48 h,阳性对照组给予10%多烯磷脂酰胆碱含药血清培养基孵育48h,模型组和空白对照组给予10%大鼠血清培养基孵育48 h后,进行油红O染色,细胞内三酰甘油含量测定,并应用逆转录-实时荧光定量PCR法(RTqPCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MYD88)、Toll样白介素-1受体结构域适配子诱导干扰素-b(TRIF)和核因子κB(NF-κB)mRNA和蛋白表达水平。结果含药血清干预48h后,油红O染色提示WYJPQT高、中、低剂量组降低TG的作用细胞内脂滴颗粒较模型组减少,TG含量较模型组明显降低(P<0.05),低剂量组与阳性对照组相当(P>0.05);高、中剂量组TRIF蛋白相对表达量较模型组明显减少(P<0.01),高剂量组TRIF蛋白表达量与阳性对照组相当(P>0.05);WYJPQT各剂量组NF-κB m RNA和蛋白相对表达量均较模型组显著减少(P<0.01);WYJPQT高、中剂量组TLR4 m RNA相对表达量较模型组和阳性对照组明显降低(P<0.05)。结论 WYJPQT含药血清可调控TLR4/TRIF/NF-κB信号通路,降低NAFLD细胞模型中的脂滴颗粒数量,减少TG含量,达到对NAFLD细胞模型的治疗作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验动物和细胞株
  •     1.1.2 实验药物
  •     1.1.3 实验试剂及主要仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 含药血清制备
  •     1.2.2 NAFLD细胞模型的制备及鉴定
  •     1.2.3 含药血清处理NAFLD的细胞模型
  •     1.2.4逆转录-实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测细胞中的TLR4、TRIF、MYD88和NF-κB m RNA表达情况
  •     1.2.5 蛋白印迹法(Western blot)检测细胞中TLR4、MYD88、TRIF、NF-κB蛋白的表达情况
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 WYJPQT含药血清处理NAFLD细胞模型后的油红O染色结果
  •   2.2 6组TG/蛋白比值比较
  •   2.3 6组TLR4、TRIF、MYD88和NF-κB m RNA相对表达水平结果
  •   2.4 6组TLR4、TRIF、MYD88和NF-κB的蛋白相对表达水平结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李晖,张泽凤,杨超,林俊芝,赵梓亦,陈昌金

    关键词: 温阳健脾祛痰颗粒,非酒精性脂肪性肝病,细胞模型,信号通路

    来源: 福建中医药 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 成都中医药大学附属医院中心实验室,成都中医药大学临床医学院,广东省中医院

    分类号: R285.5

    DOI: 10.13260/j.cnki.jfjtcm.011927

    页码: 25-29

    总页数: 5

    文件大小: 1777K

    下载量: 142

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