基因重组论文_张明亮,孙长江,顾敬敏,崔子寅,韩文瑜

导读:本文包含了基因重组论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:胰岛素,基因,载体,病毒,腺病毒,细胞体,铜绿。

基因重组论文文献综述

张明亮,孙长江,顾敬敏,崔子寅,韩文瑜[1](2019)在《铜绿假单胞菌F_(190-342)-I_(21-83)基因重组鼠伤寒沙门氏杆菌生物学特性研究》一文中研究指出为了研究载体菌株Δasd LH430 (pYA3493)携带外源基因的能力,试验采用分子生物学方法构建了携带铜绿假单胞菌的保护性抗原基因F_(190-342)-I_(21-83)(F1I2)的重组表达质粒pYA-F1I2,将其重组到减毒的鼠伤寒沙门氏杆菌Δasd LH430 (pYA3493)中,成功构建重组菌株Δasd LH430 (p YAF1I2),并研究了重组菌株的遗传稳定性、表型、毒力。结果表明:构建的重组菌株Δasd LH430 (pYAF1I2)能够稳定遗传所携带的F190-342和I21-83基因;重组菌株生长速度略低于亲本菌株,且遗传了亲本菌株的糖利用能力,在碳源利用方面没有改变;与亲本菌株相比,重组菌株毒力略有下降,对动物更加安全。说明重组菌株Δasd LH430 (pYA-F1I2)可作为铜绿假单胞菌-沙门氏杆菌二联疫苗的候选菌株。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年21期)

[2](2019)在《从人工合成牛胰岛素到基因重组人胰岛素》一文中研究指出1998年自主研发基因重组人胰岛素问世基因重组人胰岛素是治疗糖尿病的专项药。1998年,我国自行研制的基因重组人胰岛素及其注射液通过卫生部鉴定首次进入临床应用。中国成为继美国、丹麦之后第3个能生产和销售基因重组人胰岛素的国家。20世纪50年代,那时的中国不要说蛋白质,就连氨基酸制造的经验都仅仅停留在制造味精这种调味品上。在这样的背景下,1958年,中国科学院上海生化所正式确定了人工合成胰岛素项(本文来源于《中国卫生》期刊2019年11期)

丁鹏,王志全,范懿娜[3](2019)在《猪圆环病毒不同基因型毒株间在自然条件下发生基因重组的研究进展》一文中研究指出猪圆环病毒(Porcine circovirus)属于圆环病毒科,圆环病毒属,是一种小的、无囊膜的单链负股环状DNA病毒。本文归纳了近年来有关PCV自然重组模式的研究进展,旨在为今后该病毒的重组机制及致病性研究提供借鉴。(本文来源于《中国畜禽种业》期刊2019年10期)

孟佳丽,龙雨清,林静,李昕,尚翠玲[4](2019)在《mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因重组腺病毒对B16动物模型的抑瘤作用》一文中研究指出为探讨双启动子调控HN基因重组腺病毒Ad-mTERTp-mTyrp-HN对小鼠黑色素瘤动物模型的抑瘤作用,试验构建B16裸鼠皮下移植瘤模型,采用HEK293细胞扩增重组腺病毒,进行纯化和滴度检测。将重组腺病毒Ad-HN、Ad-mTERTp-HN、Ad-mTyrp-HN、Ad-mTERTp-mTyrp-HN、Ad-GFP和PBS通过尾静脉注射裸鼠,冰冻切片观察裸鼠肿瘤内GFP绿色荧光表达情况,通过肿瘤生长和裸鼠存活情况计算抑瘤率,探究其在体内的抗肿瘤作用。结果显示:重组腺病毒在HEK293细胞中扩增,滴度分别为10~(11.250),10~(12.250),10~(10.625),10~(12.125),10~(12.250)TCID_(50)/mL;肿瘤组织中能观察到黑色素细胞,证明皮下黑色素移植瘤模型构建成功;重组腺病毒对脏器无损伤,且在双启动子组脏器中没有观察到黑色素细胞的肝肺转移;通过尾静脉注射重组腺病毒后能够在肿瘤中观察到荧光表达;与其他组相比双启动子组重组腺病毒不但能抑制黑色素瘤的生长,而且能延长裸鼠的生存期,抑瘤率为55.5%。因此,该重组腺病毒Ad-mTERTp-mTyrp-HN具有靶向性,并且可以抑制肿瘤生长,可为黑色素瘤的治疗提供参考。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年10期)

李铭[5](2019)在《为基因重组人胰岛素标上“中国制造”》一文中研究指出作为一名科学工作者,他善于学习、执着科研,成功研发基因重组人胰岛素产品;作为一名企业家,他不忘初心,坚持创新,竭尽全力让“中国制造”永续辉煌……他,就是基因重组人胰岛素专家、通化东宝药业股份有限公司董事长兼总经理冷春生。从业至今,他为中国生物基因(本文来源于《吉林日报》期刊2019-10-09)

罗栩伟,李艳,冯刚,苟林,白亦光[6](2019)在《GDF-5基因重组腺病毒修复人退变髓核细胞的实验研究》一文中研究指出目的探讨腺病毒介导的GDF-5基因对人退变髓核细胞外基质表达的影响,探求一种基因治疗新途径。方法利用腺病毒载体将GDF-5基因导入退变髓核细胞,设置为空白对照组(Control组)、阴性对照组(GFP组)、实验组(GDF-5组)3组,并分为3、7、14、21天四个观察时间点,分别检测3组髓核细胞sGAG、Hyp的含量,免疫染色、Safranine-O染色观察细胞外基质合成情况,Real-time PCR检测Aggrecan、Collagen II mRNA表达水平。结果 GDF-5组髓核细胞sGAG/DNA、Hyp/DNA均在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),而Control组与GFP组之间任意观察时间点比较差异均无统计学意义(P>0.05);免疫染色、Safranine-O染色结果显示GDF-5组髓核细胞的蛋白多糖、Ⅱ型胶原、蛋白聚糖在14、21天均呈强阳性染色,Control组和GFP组呈弱阳性染色。Real-time PCR结果显示GDF-5组Aggrecan、Collagen II mRNA的表达在14、21天较Control组和GFP组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腺病毒介导的GDF-5能明显促进人退变髓核细胞Aggrecan、Collagen II mRNA的表达,并增加蛋白多糖、Ⅱ型胶原的合成,对细胞外基质具有明确的修复作用,是一种有效的基因治疗新方法。(本文来源于《西部医学》期刊2019年09期)

闫可心,伍生军,赵云,王淼,许应天[7](2019)在《表达猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒的构建及免疫原性分析》一文中研究指出试验旨在构建表达猪附红细胞体ENO基因的重组腺病毒并分析评价其免疫效果。将重组克隆质粒pMD-19T-ENO与腺病毒穿梭载体AdV4-GFP分别进行双酶切,构建重组腺病毒穿梭质粒AdV4-M/ENO;将经PacⅠ酶线性化后的重组腺病毒穿梭质粒AdV4-M/ENO转染293细胞,获得重组腺病毒Ad4-M/ENO,采用PCR和间接免疫荧光试验(IFTA)鉴定猪附红细胞体ENO基因在293细胞中的表达,再对293细胞进行培养,测定重组腺病毒的滴度;将30只BALB/c小鼠分为3组:重组腺病毒Ad4-M/ENO组、AdV4-GFP空载体对照组和PBS对照组,分别进行免疫接种,采用ELISA方法检测血清中猪附红细胞体IgG、IgG_1、IgG_(2a)抗体水平和IFN-γ、IL-4细胞因子水平,在叁免2周后检测小鼠脾脏中CD4~+和CD8~+含量。结果显示,构建的重组腺病毒穿梭质粒AdV4-M/ENO目的基因片段大小为1 182 bp;重组腺病毒Ad4-M/ENO包装成功,能在293细胞中表达,滴度为1×10~9 PFU/mL。经重组腺病毒Ad4-M/ENO免疫后的BALB/c小鼠血清中IgG、IgG_1、IgG_(2a)抗体水平,IFN-γ、IL-4细胞因子水平及淋巴细胞亚群CD4~+、CD8~+含量均显着或极显着高于AdV4-GFP空载体对照组和PBS对照组(P<0.05;P<0.01)。结果表明,本试验成功构建了表达猪附红细胞体ENO基因的重组腺病毒,且该重组腺病毒能诱导小鼠产生特异性的体液免疫和细胞免疫应答反应。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年07期)

唐俭,陈旭昕,樊重阳,韩志海[8](2019)在《大鼠paralemmin-3基因重组慢病毒载体构建及其在肺泡巨噬细胞中的表达》一文中研究指出目的构建大鼠paralemmin-3(PALM3)基因重组慢病毒载体,探讨转染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383细胞的最佳感染复数(MOI)值及目的基因PALM3的表达情况。方法采用聚合酶链反应技术(PCR)扩增鼠PALM3基因片段,并将其克隆到pCV186-Cherry载体上;经PCR及DNA测序鉴定后,将重组质粒pCV186-Cherry-PALM3、辅助包装质粒pHelper 1.0与pHelper 2.0共转染至293T细胞进行重组慢病毒lenti-CV186-Cherry-PALM3的包装,并用荧光标记法行滴度的测定。将不同MOI值(0、1、10、20、50)的lenti-CV186-Cherry-PALM3转染NR8383细胞,依据转染效率得到最佳MOI值,以此MOI值感染NR8383细胞,采用Western blot法检测目的基因的表达情况。结果通过PCR扩增获得了大小约2 246 bp的目的基因片段,并成功连接到pCV186-Cherry重组质粒上。PCR及DNA测序结果证实重组质粒pCV186-cherry-PALM3携带正确的鼠PALM3基因并成功包装重组慢病毒颗粒。重组慢病毒lentiCV186-Cherry-PALM3的滴度测定为3×108TU/mL,感染NR8383的最佳MOI为20,慢病毒lenti-CV186-CherryPALM3感染后NR8383细胞中PALM3的蛋白表达水平显着上调(P<0.05)。结论本实验成功构建了含大鼠PALM3基因的重组慢病毒载体lenti-CV186-Cherry-PALM3,并能在NR8383细胞中高效表达,为进一步研究PALM3对肺泡巨噬细胞极化的影响奠定了基础。(本文来源于《天津医药》期刊2019年07期)

陈颖彬,李林,夏颖,王紫嫣,刘义磊[9](2019)在《牛病毒性腹泻病毒E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5对犊牛的免疫保护作用》一文中研究指出将构建的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,观察其对犊牛抗BVDV感染的免疫保护效果。选取1月龄犊牛,随机挑选20头分成4组,每组5只。1~3组为免疫组,分别口服接种1,5,10 mL重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5(10~(10 )CFU/mL),共免疫3次,每次连续免疫3 d,每次免疫间隔1周;第4组为空白对照组。分别于免疫后0,10,20,30 d检测血清IgG和粪便sIgA的水平和白细胞介素-12(IL-12)表达水平。叁免后7 d用BVDV攻毒,5 mL/只(10~(5.5)/mL TCID_(50)),观察免疫犊牛对BVDV感染的免疫保护效果。结果显示,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛体内血清IgG抗体和粪便sIgA抗体含量、血清IL-12表达水平显着高于对照组(P<0.05或P<0.01),且对BVDV感染的保护率明显高于对照组。结果表明,pMG36e-E0-LA-5免疫犊牛,可诱生血清IgG和粪便sIgA类抗体,提高机体IL-12表达水平,有效抵抗BVDV的感染。本试验为研制用于预防BVDV感染的嗜酸乳杆菌活载体疫苗提供依据。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年06期)

吴建红,汪东亚,盛璐,陈凯,孙忠全[10](2019)在《NGF基因重组慢病毒载体的构建及其在人脐带血间充质干细胞的表达》一文中研究指出目的:构建神经生长因子(NGF)的慢病毒表达载体,并观察其转染人脐带间充质干细胞后的表达情况。方法:采用实时定量PCR(RT-PCR)方法获取NGF基因编码片段,并将构建的慢病毒载体质粒与包装质粒和包膜质粒共转染293T细胞,包装生产慢病毒。应用相同滴度的慢病毒转导等量间充质干细胞(MSCs),观察转染后细胞的生长形态及生长曲线,再采用RT-PCR、Western Blot方法检测NGF m RNA、蛋白质的表达水平。结果:经PCR、酶切和测序结果证明成功构建NGF基因重组慢病毒载体。同时NGF基因重组慢病毒载体能够成功转染人脐带间充质干细胞,转染率达95.35%,转染后干细胞在NGF m RNA及蛋白质的表达方面较对照组明显升高,同时经倒置显微镜观察及生长曲线实验证实转染后干细胞的生长与对照组相比无明显差异。结论:重组NGF的慢病毒表达载体能够高效的转染人脐带间充质干细胞,基因转染后干细胞的增殖分化能力与未转染细胞差异无统计学意义,可作为一种高效的干细胞转染方法。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年11期)

基因重组论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

1998年自主研发基因重组人胰岛素问世基因重组人胰岛素是治疗糖尿病的专项药。1998年,我国自行研制的基因重组人胰岛素及其注射液通过卫生部鉴定首次进入临床应用。中国成为继美国、丹麦之后第3个能生产和销售基因重组人胰岛素的国家。20世纪50年代,那时的中国不要说蛋白质,就连氨基酸制造的经验都仅仅停留在制造味精这种调味品上。在这样的背景下,1958年,中国科学院上海生化所正式确定了人工合成胰岛素项

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

基因重组论文参考文献

[1].张明亮,孙长江,顾敬敏,崔子寅,韩文瑜.铜绿假单胞菌F_(190-342)-I_(21-83)基因重组鼠伤寒沙门氏杆菌生物学特性研究[J].黑龙江畜牧兽医.2019

[2]..从人工合成牛胰岛素到基因重组人胰岛素[J].中国卫生.2019

[3].丁鹏,王志全,范懿娜.猪圆环病毒不同基因型毒株间在自然条件下发生基因重组的研究进展[J].中国畜禽种业.2019

[4].孟佳丽,龙雨清,林静,李昕,尚翠玲.mTERT和mTyr双启动子联合调控HN基因重组腺病毒对B16动物模型的抑瘤作用[J].中国兽医学报.2019

[5].李铭.为基因重组人胰岛素标上“中国制造”[N].吉林日报.2019

[6].罗栩伟,李艳,冯刚,苟林,白亦光.GDF-5基因重组腺病毒修复人退变髓核细胞的实验研究[J].西部医学.2019

[7].闫可心,伍生军,赵云,王淼,许应天.表达猪附红细胞体ENO基因重组腺病毒的构建及免疫原性分析[J].中国畜牧兽医.2019

[8].唐俭,陈旭昕,樊重阳,韩志海.大鼠paralemmin-3基因重组慢病毒载体构建及其在肺泡巨噬细胞中的表达[J].天津医药.2019

[9].陈颖彬,李林,夏颖,王紫嫣,刘义磊.牛病毒性腹泻病毒E0基因重组嗜酸乳杆菌pMG36e-E0-LA-5对犊牛的免疫保护作用[J].中国兽医学报.2019

[10].吴建红,汪东亚,盛璐,陈凯,孙忠全.NGF基因重组慢病毒载体的构建及其在人脐带血间充质干细胞的表达[J].现代生物医学进展.2019

论文知识图

小鼠生殖细胞发育及相关的表观遗传修饰发酵罐补料分批培养Fig.2-7Thefed-...含CYP6ab4基因5'调控区系列缺失片段质...细胞×200转染质粒后的293T细胞×200由ExPASyScanProsite预测的GmFNSFig.1...

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