PCV2b Cap蛋白重组杆状病毒的构建及鉴定

PCV2b Cap蛋白重组杆状病毒的构建及鉴定

论文摘要

猪圆环病毒(PCV)能够引起多种综合征和疾病,给养猪业造成了较大的经济损失。PCV2毒株在2003年后以PCV2b取代PCV2a成为临床感染的猪群中最为流行的基因型。PCV基因组为单股负链环状DNA,其中ORF2编码病毒核衣壳蛋白Cap蛋白,Cap蛋白是主要的免疫原性蛋白。本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统将PCV2b的Cap蛋白基因克隆到杆状病毒载体中,通过制备杆粒、转染sf9细胞,获得表达PCV2b Cap蛋白的重组杆状病毒毒株,从IFA、SDS-PAGE及Western-blotting分析结果可以看出,该重组杆状病毒毒株成功表达了PCV2b Cap蛋白,为制备PCV2b Cap蛋白亚单位疫苗打下基础。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 试验流程
  •     1.2.2 序列合成
  •     1.2.3 PM-P10-Fastdual-2b质粒构建和验证
  •     1.2.4 重组rBacmid-2b构建和鉴定
  •     1.2.5 重组杆状病毒的获得与病毒扩增
  •     1.2.6 间接免疫荧光 (IFA) 鉴定2b-Cap蛋白表达
  •     1.2.7 SDS-PAGE及Western-blotting鉴定2b-Cap蛋白表达
  • 2结果和讨论
  •   2.1 PM-P10-Fastdual-2b质粒构建和鉴定
  •   2.2 重组Bacmid-2b构建和鉴定
  •   2.3 重组病毒的获得与IFA鉴定
  •   2.4 重组蛋白表达鉴定
  •     2.4.1 SDS-PAGE鉴定
  •     2.4.2 Western-blotting鉴定2b-Cap表达
  • 3 结果和讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘喜凤,黄丹丹,张学贤

    关键词: 蛋白,转染,杆状病毒

    来源: 福建畜牧兽医 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 北京大北农科技集团股份有限公司动物医学研究中心,北京市畜禽生物制品工程技术研究中心

    基金: 动物基因疫苗北京市工程实验室资助项目资助

    分类号: S852.65

    页码: 3-7

    总页数: 5

    文件大小: 1437K

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