酶切保护论文_陈佳,高存继,张海娟,李湛,邱洪灯

导读:本文包含了酶切保护论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:受体,蛋白质,转染,磷灰石,脱氧核糖核酸,类化合物,当量。

酶切保护论文文献综述

陈佳,高存继,张海娟,李湛,邱洪灯[1](2016)在《末端保护原理结合酶切循环放大策略构建WS_2纳米传感器用于小分子-蛋白质的超灵敏检测》一文中研究指出小分子和相应受体蛋白之间的特异性识别作用在临床诊断与治疗、生物医学、药物研发等方面起着至关重要的作用。如何实时、动态、快速、灵敏的获取相关信息,已成为分析化学研究者们面临的重大挑战。为了克服这一问题,本工作发展了一种准确度好、灵敏度高,特异性好、分析成本低的分析新方法用于小分子和受体蛋白之间的作用研究。本工作以链霉亲和素-生物素为模型分析物,首次结合层状的WS_2纳米片,末端保护的小分子连接DNA以及Nt.Bst NBI酶辅助的循环放大策略构建了一个超灵敏的荧光纳米传感器,具体原理如Fig.1。采用荧光光谱验证了该方法的可行性,并对WS_2纳米片的浓度、动力学行为、酶切反应时间等条件进行了优化。在最优条件下,测得该方法的线性范围为7.6 p M~30 nM,检测限为5.3pM。该方法可成功应用于实际样品的分析,具有很好的特异性。另外,整个检测过程都是在均相溶液中进行,具有操作简单、分析成本低等优势,通过改变DNA链的末端小分子(生物素),可以将本方法成功应用于其它目标物的检测。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第叁分会:纳米传感新原理新方法》期刊2016-07-01)

王康,曹雷,夏兴华[2](2012)在《Morpholino对其互补DNA的抗酶切保护作用的电化学研究》一文中研究指出本文研究了核酸类似物Morpholino对其互补DNA在金电极表面上的抗酶切保护作用。我们通过在金电极表面分别修饰DNA和相应序列的morpholino单链,然后分别同标有亚甲基蓝的DNA单链杂交,之后将该电极在含有脱氧核糖核酸I型酶(DNaseI)的溶液中进行酶切反应,同时用循环伏安法实时测定电化学信号(本文来源于《中国化学会第28届学术年会第10分会场摘要集》期刊2012-04-13)

李丽,徐顺清[3](2007)在《利用酶切保护PCR检测鱼肉中二吨恶英类化合物》一文中研究指出目的探讨利用酶切保护PCR分析(EPM-PCR)检测鱼肉中二吨恶英类化合物(DLCs)的毒性当量(TEQs)的可行性。方法将2份1g鱼肉样本经过硝化、提取及净化步骤以后,采用EPM-PCR分析方法检测其中TEQs,并与高分辨率气相色谱-高分辩率质谱联用技术(HRGC-HRMS)的检测结果进行比较。结果两份鱼肉样本经酶切保护PCR分析得到的TEQs值分别是10.92pg/g和39.61pg/g,相当于HRGC-HRMS标准方法的2.91倍和3.68倍。结论EPM-PCR可作为有效的筛选鱼肉样本中DLCs的一种手段。(本文来源于《华中医学杂志》期刊2007年05期)

林霞[4](2005)在《纳米基因载体酶切保护机理的研究及新型基因载体的制备与应用》一文中研究指出无论是在基因表达调控与基因功能等基础研究方面,还是在以基因作为药物进行临床疾病的治疗即基因治疗方面,基因载体都具有非常重要的作用。无机纳米颗粒类非病毒型基因载体因其稳定性好、生物亲和性好、安全、有效、无免疫原性等优点,已引起广泛关注。但是人们对此类基因载体在基因传递过程中的各种关键因素还缺乏深入的了解,而且其转染效率普遍不高。本论文针对上述问题开展研究,取得了如下进展:(1)深入研究了氨基化二氧化硅纳米颗粒基因载体的酶切保护机理。外源基因在细胞内的酶切保护问题是影响基因转染成败的重要因素之一。氨基化二氧化硅纳米颗粒作为新型的非病毒型基因载体,其酶切保护效应已有大量报道,但目前缺乏深入研究。本文以氨基化二氧化硅微米颗粒为对照,从酶反应环境以及结合的DNA链长的角度,研究了氨基化二氧化硅纳米颗粒基因载体的酶切保护机理,得到如下结论:相比于氨基化二氧化硅微米颗粒,氨基化二氧化硅纳米颗粒对结合的DNA在所有的酶切反应中均表现出更优良的酶切保护效应。该结论为纳米基因载体的发展提供了有益的理论支持。(2)发展了两种基于二氧化硅微颗粒的基因转染新方法。本文以粒径为几百纳米大小的二氧化硅微颗粒为基础,发展了两种基因转染新方法。其一是将二氧化硅微颗粒与多聚赖氨酸通过静电结合制备出多聚赖氨酸-二氧化硅微颗粒复合物作为基因载体,进行基因转染; 其二是在多聚赖氨酸介导的基因转染中加入二氧化硅微颗粒作为转染伴侣,进行基因转染。这两种基因转染方法均快速、简便而且转染效率高(后者在转染效率上更胜一筹),在基因功能研究以及相关基因工程研究中具有重要的应用前景。(3)发展了一种基于微乳液体系制备低团聚的针状羟基磷灰石颗粒的新方法,并成功地开展了其在基因转染中的应用。羟基磷灰石是一种极有应用前景的材料,其制备工艺也颇受关注。传统的液相沉淀法应用广泛,但制备的颗粒易产生团聚,分散性差。本文从改变反应体系的角度对传统方法加以改进,发展了一种基于微乳液体系进行化学沉淀制备针状(本文来源于《湖南大学》期刊2005-07-01)

王先良,王小利,苏艳华,张迟,张莉君[5](2005)在《一种新的基于适体和酶切保护分析的超灵敏蛋白质检测方法》一文中研究指出以凝血酶适体(aptamer)为例,利用适体和核酸外切酶特性,通过定量PCR扩增建立一种高灵敏的蛋白质检测方法.首先合成3段寡核苷酸序列即凝血酶适体探针,上游连接子和下游连接子.将适体探针与凝血酶温育结合后,再加入核酸外切酶I降解未能结合的探针.接着将保护下来的探针与连接子杂交、连接和对连接产物进行定量PCR .分别建立连接产物标准品浓度与Ct 值的标准曲线和凝血酶浓度与连接产物浓度的标准曲线,通过定量PCR对凝血酶进行定量.结果显示,基于适体的外切酶保护凝血酶检测方法灵敏度较高,连接产物标准品浓度的对数值和Ct 值之间的方程为y =- 2 95x + 33 6 5 (R2 =0. 990 ,P <0 .0 1) ;凝血酶浓度和连接产物浓度对数值之间的方程为y =0 94x - 0 . 2 9(R2 =0 . 998,P <0 . 0 1) ,还对可能影响检测的有关参数举行了探讨.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2005年03期)

孙晞,李芳,孙纳,王小利,陈启政[6](2005)在《酶切保护聚合酶链反应检测多环芳烃受体与特异性DNA的结合》一文中研究指出目的 建立一种改进的核酸外切酶保护聚合酶链反应 (PCR)检测DNA 蛋白质结合物。方法 将 1pmol/L至 10nmol/L二英溶液 (TCDD)与 100μl含不同浓度多环芳烃受体的SD大鼠肝细胞溶质温育,再与 1fmol至 100nmol含二英反应元件的寡核苷酸探针作用形成复合物,用核酸外切酶Ⅲ和S1核酸酶进行消化后进行PCR,通过琼脂糖电泳检测PCR产物。同时设阴性对照(二甲基甲砜,DMSO)和空白对照。结果 在实验组用琼脂糖电泳可以检测到期望大小片段 (285bp)的DNA, 而对照组均为阴性。在一定范围类TCDD浓度与结合DNA之间存在剂量 效应关系。检测到的最小受体量为 2. 5fmol,最小DNA量为 2fmol。结论 核酸外切酶保护PCR无放射性污染,灵敏度和特异性高,简便易行,可作为DNA 蛋白质结合物的定性检测方法。(本文来源于《中华预防医学杂志》期刊2005年02期)

孙晞,李芳,陈启政,孙纳,王小利[7](2004)在《一种新的酶切保护PCR分析方法及其在二恶英类化合物检测中的应用》一文中研究指出背景与目的:建立一种灵敏、快速、无放射性污染的生物方法来检测环境样本中的二恶英类化合物。 材料与方法 :二恶英类化合物可以活化胞浆内芳香烃受体(AhR)使之与一段包含特定序列的双链DNA结合 ,结合的DNA因受蛋白质保护可抵抗核酸外切酶消化而保留下来 ,痕量的保留DNA通过PCR检测出来。根据此原理本研究将TCDD溶液加入到含AhR及相关蛋白的细胞溶质中 ,在体外与含二恶英反应元件的DNA作用形成二恶英_AhR_DNA复合物 ,用核酸外切酶ExoⅢ和S1核酸酶进行消化后作PCR ,通过琼脂糖电泳可以检测目的DNA是否存在 ;同时以有机溶剂DMSO设为对照。结果 :在实验组用琼脂糖电泳可以检测到期望大小片段的DNA,而对照组为阴性。结论 :该方法可作为环境样本中二恶英污染的生物检测手段 ,具有灵敏、经济和快速的优点(本文来源于《癌变.畸变.突变》期刊2004年04期)

酶切保护论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文研究了核酸类似物Morpholino对其互补DNA在金电极表面上的抗酶切保护作用。我们通过在金电极表面分别修饰DNA和相应序列的morpholino单链,然后分别同标有亚甲基蓝的DNA单链杂交,之后将该电极在含有脱氧核糖核酸I型酶(DNaseI)的溶液中进行酶切反应,同时用循环伏安法实时测定电化学信号

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酶切保护论文参考文献

[1].陈佳,高存继,张海娟,李湛,邱洪灯.末端保护原理结合酶切循环放大策略构建WS_2纳米传感器用于小分子-蛋白质的超灵敏检测[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第叁分会:纳米传感新原理新方法.2016

[2].王康,曹雷,夏兴华.Morpholino对其互补DNA的抗酶切保护作用的电化学研究[C].中国化学会第28届学术年会第10分会场摘要集.2012

[3].李丽,徐顺清.利用酶切保护PCR检测鱼肉中二吨恶英类化合物[J].华中医学杂志.2007

[4].林霞.纳米基因载体酶切保护机理的研究及新型基因载体的制备与应用[D].湖南大学.2005

[5].王先良,王小利,苏艳华,张迟,张莉君.一种新的基于适体和酶切保护分析的超灵敏蛋白质检测方法[J].中国生物化学与分子生物学报.2005

[6].孙晞,李芳,孙纳,王小利,陈启政.酶切保护聚合酶链反应检测多环芳烃受体与特异性DNA的结合[J].中华预防医学杂志.2005

[7].孙晞,李芳,陈启政,孙纳,王小利.一种新的酶切保护PCR分析方法及其在二恶英类化合物检测中的应用[J].癌变.畸变.突变.2004

论文知识图

基于核酸适体/GO-nS对于ATP和GTP同时...对照组考马斯亮蓝染色的2维凝胶电泳图细胞与100nMFAM-ATP核酸适体/GO...细胞与100nMFAM-ATP核酸适体/GO-...基于核酸适体/GO-nS纳米复合物对于细...产物电泳图

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