多聚赖氨酸在悬浮细胞转染中的应用

多聚赖氨酸在悬浮细胞转染中的应用

论文摘要

目的:悬浮细胞的转染较贴壁细胞存在一定难度,用多聚赖氨酸包被的细胞培养板培养悬浮细胞使其贴壁,用脂质体2000按照贴壁细胞转染的方法转染悬浮细胞,提供一种高效的转染悬浮细胞的方法。方法:悬浮细胞Jurkat或CCRF-CEM培养于包被了0.1 mg/mL多聚赖氨酸的细胞培养板,16 h后洗掉未贴壁的细胞,用脂质体2000分别将pWPXLd质粒或靶向人ABL1基因的小干扰RNA(siRNA)转染细胞,24 h后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白印迹鉴定siRNA的干扰效率。结果:pWPXLd成功转染2种细胞,siRNA成功抑制了ABL1的表达。结论:质粒和siRNA均能成功转染,提供了一种高效可行的转染悬浮细胞的方法。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 siRNA设计
  •   1.3 PDL工作浓度的摸索
  •     1.3.1 PDL包被细胞培养板
  •     1.3.2 细胞培养
  •     1.3.3 悬浮细胞贴壁情况统计
  •     1.3.4 PDL对细胞活性的影响
  •   1.4 转染pWPXLd
  •   1.5 转染siRNA
  • 2 结果
  •   2.1 PDL最适浓度的确定
  •   2.2 PDL对细胞活性的影响
  •   2.3 2种细胞转染效率检测
  •   2.4 siRNA转染及干扰效率检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王俊婷,落继先

    关键词: 悬浮细胞,转染,多聚赖氨酸,小干扰,白血病

    来源: 生物技术通讯 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 山西大学生命科学学院

    分类号: Q78

    页码: 89-92

    总页数: 4

    文件大小: 3847K

    下载量: 156

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