人诱导多能干细胞体外多向分化能力的方法验证

人诱导多能干细胞体外多向分化能力的方法验证

论文摘要

目的探讨人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)体外多向分化能力的方法。方法 iPSC通过形成拟胚体(embryonic body,EB)的阶段,将其诱导为间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)样细胞,倒置显微镜下观察诱导过程中细胞形态的变化,流式细胞术检测iPSC来源的MSCs(iPS-MSCs)表面标志物的表达,并进一步将iPSC-MSC诱导为成骨、软骨细胞;或直接EB接种,将其诱导成神经细胞。通过上述方法验证iPSC的多向分化能力。结果诱导后的iPSC-MSC逐渐向外生长变为长梭形; CD29、CD105在iPSC-MSCs中表达阳性,而CD34、CD45则为阴性;碱性磷酸酶、甲苯氨兰染色结果表明iPSC-MSCs具有成骨、成软骨的能力; iPSC亦可直接从EB阶段诱导成神经细胞。结论通过上述方法,可成功诱导iPSC为成骨、成软骨、成神经细胞,为iPSC进一步的研究与应用提供了技术基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 i PSC的培养
  •     1.2.2 流式细胞术鉴定细胞表面标志
  •     1.2.3 成骨诱导分化及检测
  •     1.2.4 成软骨诱导
  •     1.2.5 成神经细胞诱导
  • 2 结果
  •   2.1 i PSC及诱导后细胞形态的变化
  •   2.2 细胞表面标志物的鉴定
  •   2.3 i PSC-MSCs分化能力的鉴定
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 冯顶丽,卓丽丹,芦笛,李红,郭红延

    关键词: 诱导多能干细胞,间充质干细胞,细胞分化

    来源: 武警医学 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 解放军总医院第三医学中心口腔科,山西医科大学口腔医学院·口腔医院,解放军总医院整形科,军科院军事医学研究所

    基金: 国家自然科学基金(81571619)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.14010/j.cnki.wjyx.2019.04.007

    页码: 303-307

    总页数: 5

    文件大小: 216K

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