戴西艳1董明驹2
（1襄阳市第四人民医院检验科湖北襄阳441021;2襄阳市第一人民医院检验科湖北襄阳441000）
【摘要】目的观察AMI患者血浆AT-Ⅲ活性的变化及其临床价值。方法用凝固时间法测定81例AMI患者血浆AT-Ⅲ活性与184例健康人进行比较。结果AMI组AT-Ⅲ活性为61.4%±21.3%明显低于健康人组AT-Ⅲ活性106.4%±19.7%，有非常显著性差异(P＜0.01）。结论凝固时间法测定血浆中AT-Ⅲ活性可作为AMI患者判断疗效的重要指标之一。
【关键词】抗凝血酶Ⅲ急性心肌梗死凝固时间法
急性心肌梗死（acutemyocardialinfarction,AMI）与高凝状态或血栓形成的关系日益受到重视。抗凝血酶-Ⅲ（antithrombin-Ⅲ,AT-Ⅲ）是主要的生理性血浆抗凝物质，尤其对凝血酶的灭活能力占所有抗凝蛋白的70～80%[1]。血浆中AT-Ⅲ浓度降低可影响凝血-抗凝血平衡而出现高凝血症，AT活性或抗原测定是临床上评估高凝状态良好的指标。研究AMI患者血浆AT-Ⅲ活性的变化有助于反映体内高凝的状态，选择治疗方法和评价疗效。因此，利用凝固时间法测定AMI患者血浆AT-Ⅲ活性，并与健康人比较观察其临床价值，现将结果报告如下。
1材料与方法
1.1仪器
BOCA单通道血凝仪，武汉中太生物技术有限公司生产；ACL200自动血凝仪，美国Coulter公司生产;LD4-2A离心机北京医用离心机厂生产。
1.2试剂
凝血酶由武汉中太生物技术有限公司提供，批号：100125；纯品纤维蛋白原由天津市川页生化制品有限公司提供，批号：091227；肝素天津生物化学制药厂，批号：20090103。肝素缓冲液（含HEPES0.025mol/L、肝素20IU/ml）；校正血浆（AT-Ⅲ活性为100%）美国IL公司产品，批号：N0526565。抗凝血酶Ⅲ活性测定试剂盒美国IL公司产品，批号：N0633237。
1.3实验对象
选择襄阳市第一人民医院和襄阳市第四人民医院心血管内科住院AMI患者81例，均符合1979年ISFC/WHO制定的诊断标准，男46例，女35例，年龄44-79岁，平均57岁,采血前10天以内未服用阿司匹林或其它抗凝药，排除其它疾患;AMI患者未进行溶栓或抗凝治疗。门诊中、老年健康体检者184例，经体格检查、B超、心电图、血常规、尿常规、肝功能、血脂、肾功能等检查均正常者。其中男性82例，女性102例；年龄32～74岁，平均55岁。
1.4方法
1.4.1标本采集：所有AMI患者取晨间静脉血检查，健康对照组清晨空腹取血,抗凝剂为枸橼酸钠，混匀以2500g离心15min取血浆进行检测。
1.4.2检测方法：将校正血浆（AT-Ⅲ活性为100%）用缓冲液按1：24、1：30、1：60、1：120稀释，分别取100ul加入纯品纤维蛋白原溶液100ul，37℃温浴5分钟后，加入100ul凝血酶试剂，同时开始计时，记录凝固时间，并以AT-Ⅲ活性为横坐标,凝固时间为纵坐标制作标准曲线。待测血浆用肝素缓冲液1：30稀释，测定凝固时间，在标准曲线查得AT-Ⅲ活性。
1.4.3数据处理：各组计量资料均以均值?标准差（x-±s）表示，经统计学分析，组间比较采用两样本均值行t检验。
2结果
184例健康人和81例AMI患者血浆AT-Ⅲ活性的实验结果见表1。
表1健康组和AMI组血浆AT-Ⅲ活性实验结果（x-±s）
组别nAT-Ⅲ活性（%）P
健康组184106.4%±19.7%t=16.18
AMI组8161.4%±21.3%P＜0.01
测定的81例AMI患者血浆AT-Ⅲ活性为61.4%±21.3%，184例健康人血浆AT-Ⅲ活性为106.4%±19.7%；与中，老年健康对照组比较，AMI患者血浆AT-Ⅲ活性明显下降，有非常显著性差异（p＜0.01）。
3讨论
抗凝血酶是一种球蛋白，单链糖蛋白，相对分子质量为60000，沉淀系数为46s,血浆浓度约2μmol/L，提纯的AT含碳水化合物13.4%，是一单链糖蛋白，除肝以外，其他脏器如肺、脾、肾、心、肠、脑等也有合成AT的能力，巨核细胞和血管内皮细胞也是AT的合成场所，半衰期为2.8天［1，2］。人体内只有AT-Ⅰ、AT-Ⅲ、AT-Ⅵ三种亚型的AT具有生理意义，但由于AT-Ⅰ实际上是纤维蛋白、AT-Ⅵ为纤维蛋白（原）的降解产物，只有AT-Ⅲ才真正具有AT的功能。有文献[3]证明血浆AT-Ⅲ水平改变,除对DIC、肝脏病、败血症以及口服避孕药等其活性降低外，对冠心病病情严重程度的判断具有一定的价值。为此，临床上常常以测定血浆AT-Ⅲ的活性水平作为判断血栓形成性疾病的原因，也有助于选择治疗方法和评价疗效。
抗凝血酶是凝血过程各阶段中所产生的丝氨酸蛋白酶的主要抑制剂，先天或获得性的AT-Ⅲ缺失会造成机体发生血栓的危险性上升。正常情况下，机体凝血，抗凝系统处于动态平衡，当受到某种刺激激活了凝血系统时抗凝系统也同时会被激活而消耗[4]。AMI患者AT-Ⅲ活性降低是由于体内产生的凝血酶与AT-Ⅲ结合，形成TAT造成AT-Ⅲ被消耗所致。此时，患者体内抗凝能力降低，血栓形成是AMI的发病机理之一[5]。及早、持续、充分的开通梗死相关动脉是急性心肌梗死最重要的治疗原则，溶栓治疗是开通梗死相关动脉的一种有效方法[6]。AT-Ⅲ缺乏的最佳治疗方法是用AT-Ⅲ浓缩制剂替代，在其治疗期间用药不足或过量都将导致治疗失败。此外曾有学者观察AT-Ⅲ活性的变化对AMI患者预后的影响,认为AT-Ⅲ活性过低或过高的冠心病患者死亡率高于AT-Ⅲ活性基本正常者[7]。为此，及时测定血浆中AT-Ⅲ的活性是非常重要的,血浆中AT-Ⅲ活性可作为AMI患者溶栓治疗和疗效判断的有效指标。
参考文献
[1]谭齐贤，张树平，王鸿利.临床血液学和血液检验.第3版.北京：人民卫生出版社，2003：278～279.
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[7]胡俊斌,张金枝,宋善俊等.冠心病患者抗凝血酶Ⅲ抗原与活性比值的变化.临床心血管病杂志,1995,11(3):148-150.