成肌发生论文_顾羊林,朱国兴,施克勤,杨玉生,陈鹏

导读:本文包含了成肌发生论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:软骨,细胞,发生,形态,蛋白,转染,基因治疗。

成肌发生论文文献综述

顾羊林,朱国兴,施克勤,杨玉生,陈鹏[1](2013)在《转化生长因子β1联合软骨源性形态发生蛋白-2体外诱导成肌细胞向软骨细胞的分化》一文中研究指出目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)联合软骨源性形态发生蛋白-2(CDMP-2)体外诱导犬成肌细胞向软骨细胞表型定向分化的可行性。方法:取成年比格犬大腿股直肌肌肉,以机械分解法与二步酶消化法分离获得成肌细胞,取第4代成肌细胞,以2.0×104细胞/cm2的密度接种于24孔培养板,使用含CDMP-2和(或)TGF-β1的完全培养液诱导分化成肌细胞,观察细胞生长情况。诱导14 d后获取细胞,进行HE染色、甲苯胺蓝染色,观察细胞形态及胞内高硫酸化的蛋白聚糖变化。免疫细胞化学染色检测II型胶原蛋白着色情况。RT-PCR检测I型、II型胶原蛋白、aggrecan及Sox9 mRNA表达。阿尔新蓝法定量检测细胞糖胺聚糖(GAG)含量。结果:3个加入细胞因子的实验组成肌细胞形态由长梭形向多角形、类圆形转变;HE染色、甲苯胺蓝染色和软骨特异性I型和Ⅱ型胶原免疫组化法检测及RT-PCR检测中,实验组均有不同程度的阳性表达;TGF-β1与CDMP-2联合应用组糖胺聚糖含量明显高于其他叁组(P<0.05)。结论:CDMP-2和TGF-β1可以单独诱导高密度单层培养的犬成肌细胞向软骨细胞分化,表达软骨细胞特异性细胞表型,并且CDMP-2和TGF-β1有协同作用。(本文来源于《中国运动医学杂志》期刊2013年01期)

徐文进,王伟,王毅,李宇,段大波[2](2012)在《软骨源性形态发生蛋白2基因转染自体成肌细胞表达软骨细胞表型的实验研究》一文中研究指出目的研究软骨形态发生蛋白-2(CDMP-2)对小鼠成肌细胞向软骨分化的作用。方法体外培养小鼠成肌细胞,贴壁细胞传代,取第3代细胞,对照组(A组)以无血清L-DMEM培养液培养,实验组(B、C、D组)以无血清L-DMEM培养液培养,分别加入透明质酸钠、CDMP-2(100ng/mL)和CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞,14d后终止培养,倒置相差显微镜观察细胞形态,甲苯胺蓝染色糖胺聚糖(GAG),行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、灰度值分析和Western blot检测。结果培养14d后转染组和诱导组可见成肌细胞形态由梭形向软骨细胞的多边形转变。甲苯胺蓝染色示糖胺聚糖(GAGs)均匀分布于基质中,免疫组织化学染色和Western blot示实验组Ⅱ型胶原表达阳性,且CDMP-2基因转染组细胞表达Ⅱ型胶原水平高于单独给予CDMP-2,且具有统计学意义;对照组和透明质酸钠组未见阳性表达。结论 CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞能够更好的表达软骨特异性Ⅱ型胶原。(本文来源于《中国医学工程》期刊2012年02期)

徐文进[3](2011)在《软骨源性形态发生蛋白2基因转染小鼠成肌细胞表达软骨细胞表型的实验研究》一文中研究指出目的1.研究软骨形态发生蛋白-2(cartilage-derived morphogenetic protein-2)体外对小鼠成肌细胞向软骨细胞分化的可行性。2.构建软骨形态发生蛋白-2基因转染小鼠成肌细胞,检测转染后小鼠成肌细胞的特异性表达,探讨成肌细胞作为软骨组织工程种子细胞的可行性。方法对小鼠成肌细胞进行体外培养传代,取第3代细胞进行实验处理,对照组(A组)为无血清L-DMEM培养液+小鼠成肌细胞;实验组(B组)为无血清L-DMEM培养液+透明质酸钠(10g/L)+小鼠成肌细胞;实验组C组为无血清L-DMEM培养液+CDMP-2(100ng/ml)+小鼠成肌细胞;实验组D组为无血清L-DMEM培养液+CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞。16天后终止细胞培养,应用倒置相差显微镜观察细胞形态,进行甲苯胺蓝糖胺聚糖(GAGs)染色,行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、灰度值分析和Western blot检测。结果细胞培养16天后可见转染组和诱导组的成肌细胞形态由长梭形向软骨细胞的多角形转变。甲苯胺蓝染色显示遇甲苯胺蓝变为蓝色的糖胺聚糖(GAGs)均匀分布于细胞基质中;免疫组织化学染色显示经SP法处理后变为棕褐色的Ⅱ型胶原蛋白均匀分布于镜下,对照组与透明质酸钠组未见着色。Western blot显示转染组和诱导组Ⅱ型胶原蛋白表达阳性,且CDMP-2基因转染组细胞表达Ⅱ型胶原蛋白水平高于CDMP-2诱导组,具有统计学意义;对照组和透明质酸钠组阴性表达。结论CDMP-2体外能够诱导成肌细胞向软骨细胞分化,CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞能够分泌软骨细胞分泌的特异性蛋白及多糖,且CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞能够更好的表达软骨特异性Ⅱ型胶原及糖胺多糖。(本文来源于《辽宁医学院》期刊2011-12-01)

张力,王伟[4](2011)在《负载转基因成肌细胞和骨形态发生蛋白组织工程化骨修复骨缺损》一文中研究指出背景:近年来有报道提出了睫状神经营养因子能够抑制成肌细胞体外成肌分化,可保持成肌细胞去分化状态的理论。两者可通过基因工程技术结合为组织工程化骨的构建提供种子细胞,联合骨形态发生蛋白在一定条件下促进骨缺损的修复。目的:探讨转染睫状神经营养因子基因成肌细胞与骨形态发生蛋白通过透明质酸钠凝胶载体结合修复兔桡骨节段性缺损的效果。方法:新西兰大白兔制备左侧桡骨中段造成1.0cm的节段性骨缺损,缺损处以1.4cm硅胶管桥接固定,管内植入负载骨形态发生蛋白与转睫状神经营养因子基因成肌细胞的透明质酸凝胶(实验组)、仅复合骨形态发生蛋白的透明质酸凝胶(对照组)或仅植入透明质酸凝胶(空白组)。结果与结论:动物体内实验表明实验组的X射线阻射密度、大体标本以及病理组织学观察情况均优于对照组和空白组,对照组也优于空白组。说明应用透明质酸钠凝胶复合转基因成肌细胞和骨形态发生蛋白因子作为膜内填充物构建组织工程化骨具有可行性,其应用于修复兔桡骨节段性缺损效果理想。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2011年42期)

杨民,蔡善保,马庆军,郭均,党耕町[5](2005)在《重组人骨形态发生蛋白7腺病毒载体构建及在小鼠成肌细胞中的表达》一文中研究指出目的:构建重组人骨形态发生蛋白7的腺病毒载体(AdBMP7),并观察其在小鼠成肌细胞C2C12细胞中的表达情况。方法:实验于2004-05/10在北京大学医学部完成。RT-PCR方法从HKE293细胞中克隆出hBMP7cDNA并亚克隆入穿梭质粒pAdtrackcmv中,构建pAdtrackcmv-hBMP7质粒。该质粒和腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183菌中进行同源重组后挑选阳性重组体pAd-hBMP7质粒。线性化pAd-hBMP7质粒转染293A细胞后检测病毒噬斑形成情况,并于转染后9d收获病毒,大量扩增并制备高纯度、高滴度的AdBMP7。将AdBMP7按MOI=100来感染C2C12细胞,48h后分别应用RT-PCR和免疫组化方法来检测hBMP7在mRNA和蛋白水平的表达。结果:成功克隆出hBMP7cDNA,酶切鉴定pAdtrackcmv-hBMP7和pAd-hBMP7质粒正确重组,获得纯化后滴度达到5×1012vp/mL的AdBMP7。AdBMP7能有效感染C2C12细胞并表达hBMP7蛋白。结论:应用AdEasy-1腺病毒载体系统可在短期内制备高滴度的携带GFP和hBMP7的重组腺病毒AdBMP7,并在为进一步研究BMP7基因治疗促进骨愈合打下基础。(本文来源于《中国临床康复》期刊2005年06期)

成肌发生论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的研究软骨形态发生蛋白-2(CDMP-2)对小鼠成肌细胞向软骨分化的作用。方法体外培养小鼠成肌细胞,贴壁细胞传代,取第3代细胞,对照组(A组)以无血清L-DMEM培养液培养,实验组(B、C、D组)以无血清L-DMEM培养液培养,分别加入透明质酸钠、CDMP-2(100ng/mL)和CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞,14d后终止培养,倒置相差显微镜观察细胞形态,甲苯胺蓝染色糖胺聚糖(GAG),行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、灰度值分析和Western blot检测。结果培养14d后转染组和诱导组可见成肌细胞形态由梭形向软骨细胞的多边形转变。甲苯胺蓝染色示糖胺聚糖(GAGs)均匀分布于基质中,免疫组织化学染色和Western blot示实验组Ⅱ型胶原表达阳性,且CDMP-2基因转染组细胞表达Ⅱ型胶原水平高于单独给予CDMP-2,且具有统计学意义;对照组和透明质酸钠组未见阳性表达。结论 CDMP-2基因转染的小鼠成肌细胞能够更好的表达软骨特异性Ⅱ型胶原。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

成肌发生论文参考文献

[1].顾羊林,朱国兴,施克勤,杨玉生,陈鹏.转化生长因子β1联合软骨源性形态发生蛋白-2体外诱导成肌细胞向软骨细胞的分化[J].中国运动医学杂志.2013

[2].徐文进,王伟,王毅,李宇,段大波.软骨源性形态发生蛋白2基因转染自体成肌细胞表达软骨细胞表型的实验研究[J].中国医学工程.2012

[3].徐文进.软骨源性形态发生蛋白2基因转染小鼠成肌细胞表达软骨细胞表型的实验研究[D].辽宁医学院.2011

[4].张力,王伟.负载转基因成肌细胞和骨形态发生蛋白组织工程化骨修复骨缺损[J].中国组织工程研究与临床康复.2011

[5].杨民,蔡善保,马庆军,郭均,党耕町.重组人骨形态发生蛋白7腺病毒载体构建及在小鼠成肌细胞中的表达[J].中国临床康复.2005

论文知识图

一5成肌发生的信号途径图成肌发生过程及调节因子(Bentz...α-SMA的免疫荧光染色(×400)一3:成肌细胞的分化过程对各组大鼠非梗死区心肌胶原含量的...肌纤维形成的调控模型

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成肌发生论文_顾羊林,朱国兴,施克勤,杨玉生,陈鹏
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