外泌体透射电镜样品的制备方法

外泌体透射电镜样品的制备方法

论文摘要

目的为了达到更好的透射电镜观察效果,总结出一种适用于外泌体等超微结构样品的制备方法。方法以巨噬细胞外泌体为例,培养巨噬细胞RAW264. 7并提取上清液,超速离心纯化外泌体。磷酸缓冲液重悬后稀释5倍、10倍、20倍3个浓度梯度,在碳覆膜铜网上分别滴加样品,吸附90 s,醋酸铀染液负染30 s,透射电镜下观察并总结外泌体样品制备方法。结果透射电镜下可以看到,300目铜网上的外泌体浓度在1. 0×1011/ml左右时,外泌体数量适中,直径在100 nm左右,能明显看到圆盘状,膜结构完整,轮廓清晰。结论相较于常规超薄切片法,这种电镜样品制备方法用于外泌体、核酸、小分子蛋白、人工合成蛋白、纤维、纳米材料等超微结构样品的制备,更有利于透射电镜观察。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 材料与试剂
  •     1.1.2 耗材设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 外泌体的获取
  •     1.2.2 样品制备及观察
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 蔺萌,王亚婷,朱美霖,雷宁静

    关键词: 外泌体,透射电镜,样品制备

    来源: 山西医科大学学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 郑州大学基础医学院形态学实验中心微生物与免疫实验室,郑州大学基础医学院免疫学教研室

    基金: 河南省重点研发与推广专项(科技攻关)项目(182102310115),河南省高等学校重点科研项目(18A310008)

    分类号: Q-336

    DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2019.10.027

    页码: 1482-1484

    总页数: 3

    文件大小: 812K

    下载量: 561

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