禽流感病毒H7亚型竞争ELISA抗体检测方法的建立

禽流感病毒H7亚型竞争ELISA抗体检测方法的建立

论文摘要

将禽流感病毒H7亚型标准抗原作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫合格的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合。通过血凝抑制试验,筛选得到12株杂交瘤细胞上清具有HI效价,且与禽流感病毒H7亚型阳性血清间具有较好的竞争效果。将竞争效果最好的1H11细胞扩大培养后制备腹水,获得的单克隆抗体具有效价高、特异性好等特点。使用H7标准抗原包被ELISA板,将HRP标记的单克隆抗体作为竞争抗体,建立了一种禽流感病毒H7亚型竞争ELISA抗体检测方法。利用该方法对待检血清进行测试,与HI试验有99.3%的符合率,说明试制的禽流感病毒H7亚型竞争ELISA抗体检测试剂盒可以用来检测禽流感病毒H7亚型抗体,且操作简便快捷,可批量操作,大样本检测鸡群抗体水平。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞与试验动物
  •   1.2 主要试剂与试剂盒
  •   1.3 禽流感病毒H7亚型单克隆抗体的制备
  •   1.4 禽流感病毒H7亚型抗体竞争ELISA检测方法的建立
  • 2 结果与分析
  •   2.1 单克隆抗体的筛选
  •   2.2 竞争ELISA抗体检测方法的初步建立
  •   2.3 特异性试验
  •   2.4 敏感性试验
  •   2.5 与HI试验符合率比较试验
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 范俊青,魏燕鸣,邹忠,李冉,孙小美,金梅林

    关键词: 禽流感病毒亚型,单克隆抗体,竞争,抗体检测

    来源: 养殖与饲料 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 武汉科前生物股份有限公司,华中农业大学动物医学院

    基金: 国家重点研发计划“种禽场高致病性禽流感,新城疫,禽白血病,沙门氏菌病综合防控与净化技术集成与示范”(2016YFD0501600)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.13300/j.cnki.cn42-1648/s.2019.01.011

    页码: 32-36

    总页数: 5

    文件大小: 92K

    下载量: 211

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