土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养直接生产热凝胶低聚糖

土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养直接生产热凝胶低聚糖

论文摘要

为提高热凝胶低聚糖生产效率,构建了土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养体系,其中土壤杆菌代谢产物热凝胶可被毕赤酵母分泌的内切-β-1,3-葡聚糖酶利用直接生产热凝胶低聚糖。用基于不同启动子(AOX1,GAP,FLD)调控的毕赤酵母重组菌株分泌表达内切-β-1,3-葡聚糖酶BGN13.1a,验证其均能有效水解热凝胶得到热凝胶低聚糖。在此基础上,选取GAP启动子调控的毕赤酵母工程菌与土壤杆菌耦合培养,通过设计两种物种之间的共生关系实现稳定共培养并生产聚合度为17~22的热凝胶低聚糖,产量为4.278 g/L。

论文目录

  • 1 前言
  • 2 实验
  •   2.1 材料与试剂
  •   2.2 实验设备与分析仪器
  •   2.3 实验方法
  •     2.3.1 重组质粒构建及转化子筛选
  •     2.3.2 土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养方法
  •     2.3.3 内切β-1, 3-葡聚糖酶活力测定与分析
  •     2.3.4 发酵液中葡萄糖浓度测定
  •     2.3.5 热凝胶低聚糖浓度测定
  •     2.3.6 TLC-串联MALDI-TOF MS分析
  • 3 结果与讨论
  •   3.1 重组菌株的构建与筛选
  •   3.2 适用于耦合培养体系的毕赤酵母启动子选择
  •   3.3 耦合培养氮源的筛选
  •   3.4 土壤杆菌-毕赤酵母耦合培养生产热凝胶低聚糖
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李菲菲,金树霞,朱莉,詹晓北,赵玥,刘丽萍,高敏杰

    关键词: 热凝胶低聚糖,耦合培养,内切,葡聚糖酶,土壤杆菌,毕赤酵母

    来源: 过程工程学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,无锡格莱克斯生物科技有限公司

    基金: 国家自然科学基金资助项目(编号:31301408),江南大学自主科研计划重点项目(编号:JUSRP51632A),江苏省政策引导类计划(产学研合作)前瞻性联合研究项目(编号:BY2016022-15)

    分类号: TQ920.6

    页码: 801-808

    总页数: 8

    文件大小: 1122K

    下载量: 59

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