新生幼虫期特异性基因论文_苗雅娟,冯爽,王学林,冯小静,于申业

导读:本文包含了新生幼虫期特异性基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:旋毛虫,幼虫,特异性,新生,基因,丝氨酸,线虫。

新生幼虫期特异性基因论文文献综述

苗雅娟,冯爽,王学林,冯小静,于申业[1](2012)在《旋毛虫新生幼虫期特异性基因T668主要抗原表位短肽的筛选》一文中研究指出为进一步从T668基因编码的蛋白中寻找到敏感性及特异性较高的抗原表位,对T668主要抗原表位区进行抗原表位作图,进一步设计了一套共16条覆盖整个抗原表位决定区的短肽,并与GST融合表达,用Western blot筛选具有高反应原性的短肽。结果显示,N5EM4、N5EM5、N5EM7、N5EM8、N5EM9、N5EM116条融合短肽与感染旋毛虫的猪血清有强阳性反应条带,但均表现出较明显的假阳性。将筛选出的6条短肽人工合成后与牛血清白蛋白偶联,利用Dot blot进一步验证,结果显示融合短肽N5EM11-BSA表现出良好的反应原性和特异性。此抗原短肽的发现对进一步确定T668蛋白虫体定位、功能及旋毛虫病诊断试剂盒的研发奠定了基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2012年08期)

高长玲,刘明远,郭恒,孙树民,付宝权[2](2006)在《旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定》一文中研究指出根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显示成功克隆到N10基因。将重组质粒pMD-18T-N10进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star(DE3),用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白,相对分子质量为38700,诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15%。从N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白,对其生物学特性初步鉴定结果表明,具有类似脱氧核糖核酸酶的活性。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2006年03期)

任瑞文,徐晓立,卢强,刘明远[3](2003)在《旋毛虫新生幼虫期特异性基因丝氨酸蛋白酶的结构预测与功能分析》一文中研究指出我国旋毛虫病患者数及死亡率居叁大食源性人兽共患寄生虫病之首[1 ] 。旋毛虫新生幼虫肠型期 (NBL )为非细胞内寄生并在血液中移行 ,对宿主的免疫作用较敏感。利用基因工程技术制备 NBL抗原用于旋毛虫病的诊断和预防具有重要意义。本文对旋毛虫新生幼虫 c(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2003年01期)

徐晓立,刘明远,卢强,任瑞文[4](2002)在《旋毛虫新生幼虫期特异性基因糖蛋白表达载体的构建》一文中研究指出根据旋毛虫新生幼虫 (NBL)期特异性全长cDNASSC1基因序列 ,PCR扩增目的基因 ,克隆入pMD18T后 ,根据其读码框架 ,克隆入表达载体pET2 8b ,构建其原核表达载体pET2 8b -SSC1。分别用SalI和XhoI、SmaI和HindIII双酶切 ;XbaI单酶切鉴定重组子 ,结果均与预期相符 ,进一步测序结果也表明重组载体读码框架正确 ,为进一步亚克隆和表达奠定基础(本文来源于《塔里木农垦大学学报》期刊2002年03期)

刘明远,卢强,付宝权,吴秀萍,J.F.Fabien[5](2001)在《中国旋毛虫种类鉴定、基因变异性分析及其新生幼虫期特异性基因的分离与鉴定》一文中研究指出以8个国际旋毛虫标准虫种作对照,对我国的12株旋毛虫分离株进行了系统的生物学(形态学、新生幼虫产出率、繁殖力指数、种间杂交、宿主保姆形成时间及对寒冷抵抗力)、生物化学(同工酶分析)及分子生物学(基因探针、(本文来源于《新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册)》期刊2001-09-13)

任瑞文[6](2001)在《旋毛虫新生幼虫期特异性基因的筛选与表达》一文中研究指出旋毛虫新生幼虫(NBL)是旋毛虫生活史中唯一非细胞内寄生并在血液中移行,对宿主免疫作用最为敏感的时期。因此,加强NBL抗原分子水平的研究,利用基因工程技术来制备NBL有效抗原对于旋毛虫病的诊断和预防具重要意义。本实验在已构建好的NBL差减文库的基础上,用southern杂交鉴定了NBL差减文库cDNA片段T_(68),结果显示其仅与NBLcDNA文库杂交,为NBL期特异性cDNA片段。用地高辛标记此期特异性片段,采用两步噬菌斑原位杂交从NBL cDNA文库中调取其全长cDNA,获得一1609bp全长序列SSC2,其中包含1395bp的开放阅读框架。登陆国际NCBI基因数据库进行同源性检索未见相似序列。登陆NCBI蛋白数据库进行相似性比较,该编码蛋白与旋毛虫丝氨酸蛋白酶相似性最高,达38%。蛋白位点和序列模式分析显示可将其归类为胰蛋白酶家族丝氨酸蛋白酶。蛋白序列分析软件包ANTHEPROT 4.3分析其编码蛋白,结果显示其编码蛋白分子量为50.1kDa、等电点为9.775,N末端30~64个氨基酸可能为其信号肽区域,C末端亲水性较高,其抗原活性也较高。分别用GORⅠ、Gibrat、DPM、Predator方法预测其二级结构显示其结构较复杂,初步将其划分为信号肽区-绞合区-功能区-无规则卷曲区四个区域。登陆SMISS-MODEL自动蛋白质同源模建服务器,搜索、优化后初步预测了编码蛋白3D结构模型。根据测序及对其编码蛋白分析结果,利用ZAP表达系统,初步表达了该编码蛋白的抗原活性区片段,SDS-PAGE电泳显示与对照比较于30.5kDa处出现一特异性带,与预期结果相符,表达量在20%以上,为进一步研究其特性奠定了基础。 根据本室提供的NBL期特异性T_(3-1)D_4全长cDNA SSC1,由其信号肽下游设计上游引物PT_(3-1)D_4(AGGTCGACGTTGCAACATGCAAAAACG),并于其5’端加一SalⅠ酶切位点,下游引物采用ZAP Express载体自带T7引物(TAATA CGACTCACTATAGGG)扩增目的基因,克隆入pMD18 T载体后,用SalⅠ和XhoⅠ切下,根据目的片段的读码框架,克隆入表达载体pET28b,构建其原核表达载体pET28b-SSC1。分别用SalⅠ和XhoⅠ、SmaⅠ和Hind Ⅲ双酶切;XbaI单酶切鉴定重组子,结果均与预期相符,进一步测序结果也表明重组载体读码框架正确,可用于进一步诱导表达。(本文来源于《中国人民解放军军需大学》期刊2001-06-01)

新生幼虫期特异性基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显示成功克隆到N10基因。将重组质粒pMD-18T-N10进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star(DE3),用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白,相对分子质量为38700,诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15%。从N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白,对其生物学特性初步鉴定结果表明,具有类似脱氧核糖核酸酶的活性。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

新生幼虫期特异性基因论文参考文献

[1].苗雅娟,冯爽,王学林,冯小静,于申业.旋毛虫新生幼虫期特异性基因T668主要抗原表位短肽的筛选[J].动物医学进展.2012

[2].高长玲,刘明远,郭恒,孙树民,付宝权.旋毛虫新生幼虫期特异性基因N10的表达及鉴定[J].中国兽医学报.2006

[3].任瑞文,徐晓立,卢强,刘明远.旋毛虫新生幼虫期特异性基因丝氨酸蛋白酶的结构预测与功能分析[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2003

[4].徐晓立,刘明远,卢强,任瑞文.旋毛虫新生幼虫期特异性基因糖蛋白表达载体的构建[J].塔里木农垦大学学报.2002

[5].刘明远,卢强,付宝权,吴秀萍,J.F.Fabien.中国旋毛虫种类鉴定、基因变异性分析及其新生幼虫期特异性基因的分离与鉴定[C].新世纪新机遇新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册).2001

[6].任瑞文.旋毛虫新生幼虫期特异性基因的筛选与表达[D].中国人民解放军军需大学.2001

论文知识图

2重组表达质粒的PCR结果M.DNA标...猪抗旋毛虫血清的吸附试脸白色斑点即阴...重组质粒pET 28a-N 10酶切鉴定1.pET 28...PCR产物的酶切分析的寄重组蛋白的Western-blotting检测Fig....差减与未差减cDNA的比较 1.Marker

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