长链非编码RNA H19对缺血性脑卒中神经元SH-SY5Y细胞活力与自噬影响的探究

长链非编码RNA H19对缺血性脑卒中神经元SH-SY5Y细胞活力与自噬影响的探究

论文摘要

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)H19对缺血性脑卒中神经元系SH-SY5Y细胞活力和凋亡的影响,并探究其和神经元自噬过程的相关性。方法选用神经元SH-SY5Y细胞系,进行氧糖剥夺/复氧建模(OGD/R),依据缺氧时间的不同(4h,8h和12h),分为缺氧4h组、缺氧8h组和缺氧12h组,同时建立未经过缺氧处理的对照组(n=3),测定细胞活力,采用实时PCR检测LncRNA H19表达水平。另外,将细胞在普通培养液中培养24h,取对数生长期的SH-SY5Y细胞分为正常对照(N)组、OGD/R组、OGD/R+H19siRNA组以及OGD/R+对照siRNA(NC)组,OGD/R缺氧出时间为8h,采用Western blot检测微管相关蛋白1转链3(LC3)Ⅱ、Beclin1及P62蛋白定量。结果缺氧8h组和缺氧12h组细胞活力明显低于对照组和缺氧4h组,缺氧8h组LncRNA H19表达水平明显低于对照组(P<0.05)。与N组比较,OGD/R组、NC组和H19siRNA组LC3Ⅱ(0.88±0.13、0.90±0.15和0.48±0.05 vs 0.50±0.08,P<0.05)及OGD/R组和NC组Beclin1表达(0.91±0.11和0.86±0.11 vs 0.28±0.04,P<0.05)明显增加,OGD/R组和NC组P62蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(0.50±0.09和0.44±0.08 vs 0.88±0.12,P<0.05)。结论 LncRNA H19的表达上调;LncRNA H19的上调显著增加细胞活性,降低其死亡率;LncRNA H19参与神经元自噬过程,可能对于缺血性脑卒中起保护作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验试剂与仪器
  •   1.2 实验分组
  •     1.2.1 实时PCR实验的分组
  •     1.2.2 Western blot检测分组
  •   1.3 实验细胞与模型的建立
  •   1.4 细胞活力测定
  •   1.5 实时PCR检测LncRNA H19表达水平
  •   1.6 细胞转染
  •   1.7 Western
  •   1.8 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 各组LncRNA H19表达的比较
  •   2.2 4组自噬相关蛋白表达的比较
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈江波,李时光,冯丽君,杨霄鹏,王昆,罗小娜,刘新生

    关键词: 卒中,神经元,细胞凋亡,自噬,缺氧

    来源: 中华老年心脑血管病杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 神经病学

    单位: 河南大学附属郑州市第一人民医院神经内科,郑州大学第二附属医院神经内科

    基金: 河南省医学科技攻关计划(201503089),郑州市科技发展计划(20150005)

    分类号: R743.3

    页码: 1318-1321

    总页数: 4

    文件大小: 228K

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