一株PRRSV N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

论文摘要

为了制备具有阻断能力的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的单克隆抗体（MAb）,本研究以PRRSV SD53株感染Marc-145细胞后的上清作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得一株稳定分泌抗PRRSV MAb的杂交瘤细胞株（1H4）。鉴定结果显示,1H4 MAb是Ig G1亚类,轻链为κ链。1H4细胞上清经间接免疫荧光（IFA）检测其效价是1∶40,腹水的IFA效价是1∶3 200。阻断ELISA试验显示1H4 MAb与病毒的结合能够被PRRSV阳性血清阻断。Western blot试验显示1H4 MAb可以特异性识别PRRSV的N蛋白,经截短表达N蛋白鉴定该MAb的抗原识别序列为N蛋白末端aa 107～aa 123。该抗原表位在美洲型PRRSV中高度保守,该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的PRRSV阻断ELISA检测方法奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李敏华,王倩,田志军,金涛

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒,单克隆抗体,细胞融合,蛋白,表位鉴定

来源: 中国预防兽医学报 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 黑龙江大学生命科学学院/微生物黑龙江省高校重点实验室,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

基金: 国家自然科学基金项目(31502097)

分类号: S852.651

页码: 279-283

总页数: 5

文件大小: 707K

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标签：猪繁殖与呼吸综合征病毒论文;  单克隆抗体论文;  细胞融合论文;  蛋白论文;  表位鉴定论文;