吉林省猪致病性链球菌的分离与鉴定

吉林省猪致病性链球菌的分离与鉴定

张桂荣[1]2003年在《吉林省猪致病性链球菌的分离与鉴定》文中指出猪链球菌病是分布范围极广常见的猪的传染病之一,危害严重,世界各国均有发生,也是多年来一直困扰我国养猪业的主要传染病之一。由于链球菌血清型较多,抗原结构复杂,在临床上又可呈现不同的症状,如败血症、脑膜脑炎、心内膜炎、肺炎、化脓性淋巴结炎、关节炎等,还常常与其他疾病发生合并感染。近几年来,该病的发病率和死亡率有逐年上升趋势。链球菌的致病性已引起临床工作者和科研人员的广泛关注和重视。本病在我国各省、市不同猪场均有发生,特别是在集约化养猪场中,其发生率有不断上升趋势,目前已成为我国猪场最常见的细菌性传染病之一。国外于1945年首次报道本病。国内是于1949年在上海首次发现本病,自20世纪60年代初期开始大面积流行,70年代末遍及全国大部分省、市。国外一些大猪场目前也受到本病严重扰乱。该病是我国法定二类动物疫病。据近几年的临床调查得知,我国的大小猪场均有发生,但主要集中在春秋两季的哺乳仔猪中,发病率为2%~5%,死亡率为40%左右。 目前,对我省猪链球菌病的发生规律、病原特性以及防治措施还不十分清楚,单纯靠药物又不能有效的控制该病的发生和蔓延。因此我们从病原学着手研究,以便为控制该病提供理论依据。2001~2002年我们对长春市、吉林市,延边市、四平等市、县较大的猪场所发生的急性、热性、败血性传染病进行了流行病学调查、临床诊断、病理检剖。在初步诊断为猪败血性链球菌病的基础上,从诸多病料中进行了病原分离,得到了20株猪源致病性链球菌。结合培养特性、生化特性及血清学反应等对其进行了分群鉴定。结果表明其形态、染色、培养特征及理化特性符合链球菌的特点,大多具有α或β溶血,生化试验结果不一致,根据检测结果初步认为:5株为兰氏分类法中的C群,9株为D群,3株为E群,1株为A群,2株未能定群。在病原性实验中15株链球菌对小鼠有性强弱不同致病,本试验可证实吉林省地方性猪链球菌病病原菌血清型已不局限于原有的C群链球菌。通过对15株病原性菌株的药敏性试验得知:大多数菌株对常用抗菌药有耐药性。 研制本地区的多价灭活苗是控制该病发生的根本方法。在吉林省地区性猪链球吉林农业大学硕士学位论文吉林省猪致病性链球菌的分离与鉴定菌流矛洲朱检测的基础上,我们湘匕迄了有代表性的F6菌株进行了全面的生化特性鉴定,为研制了多价灭活苗提供了参考依据。 目前,美国、英国、法国、俄罗斯、日本、印度、丹麦、荷兰、加拿大等国均有关于猪链球菌分离鉴定及血清型分型的报道,从患败血症和脑炎的猪体内分离的链球菌主要是R群的猪链球菌H型,和S群的猪链球菌I型,只有少数C群、D群和L群引起心内膜炎和败血症的病原菌。这与我们的分离菌株的血清型是有一定差异的。

张炎炎, 杨晓杰, 张媛, 李颖, 刘清河[2]2005年在《吉林省猪致病性链球菌的分离鉴定及其部分特性研究》文中提出从吉林省几个地区及山东省烟台地区的疑似链球菌病死猪体内分离到14株链球菌,通过培养特性、菌落形态、染色特性、生化试验等一系列鉴定,确定这14株链球菌中有12株为类猪链球菌,1株为猪链球菌,1株怀疑为海豚链球菌。致病性试验结果表明:有10株链球菌呈β溶血,4株呈α溶血,呈β溶血的菌株对小白鼠的致死性为100%。选择4株有代表性的链球菌对2只青年公兔进行了免疫原性试验,首免后28d血清凝集价上升了10个滴度,说明这4株链球菌有较好的免疫原性,可以作为疫苗候选株。这14株链球菌对红霉素、麦迪霉素不敏感或抗药,对其它13种抗菌素呈不同程度的敏感性。

祝令伟, 纪雪, 李丽红, 周伟, 刘军[3]2017年在《屠宰场猪链球菌分离菌株分型及其致病性和耐药性分析》文中研究说明为了解吉林省猪链球菌的流行情况,从屠宰场采集的猪咽拭子和鼻拭子样品中分离鉴定猪链球菌,并进行菌株血清型、基因型和毒力表型的鉴定,以及致病性和耐药性的分析。结果表明,从100份样品中共分离鉴定猪链球菌104株,其中29株鉴定为血清2型、9型和1型等几种常见的致病性血清型,其他75株不属于常见的致病性血清型。血清2型的菌株中,2株经鉴定为ST1基因型和mrp+epf+sly+毒力型,并经动物试验鉴定为强毒菌株;其他菌株均为ST28基因型和mrp+epf-sly-毒力型,具有中等毒力。血清9型的菌株,均为mrp-epf-sly-毒力型,动物试验鉴定均为强毒菌株。根据Kirby-Bauer纸片扩散法的药敏试验结果,98%的猪链球菌分离株对四环素耐药;对大环内酯类、克林霉素和链霉素的耐药率都在50%以上;对β-内酰胺类、氯霉素和喹诺酮类抗生素的耐药率小于20%。总体分析,从屠宰场分离的猪链球菌强毒菌株所占的比例并不高,但是菌株多重耐药的情况非常严重。

姜成刚[4]2006年在《猪链球菌对大环内酯类药物耐药机制研究》文中进行了进一步梳理随着养猪业的迅猛发展,猪链球菌病也在世界范围内广泛传播。猪链球菌病是由猪链球菌引起的一种重要人畜共患病,尤其是血清2型猪链球菌,不仅对猪的致病性最强,而且可感染特定人群并致死,给人类公共卫生和养猪业带来巨大影响。猪链球菌病表现为许多临床症状,如脑膜炎、关节炎、心内膜炎以及败血症。另外,健康猪只在鼻腔、扁桃体、上呼吸道和支气管也可以携带猪链球菌,加速了这种疾病的扩散和传播。大环内酯类药物是由链霉菌产生的一类化学结构和抗菌作用相近的抗生素,他们都有一个大内酯环,这个内酯环通常为12~20元环。14元环包括红霉素、克拉霉素、罗红霉素;15元环为阿齐霉素;16元环有麦迪霉素、螺旋霉素、交沙霉素。兽医临床最常用的是红霉素和泰乐菌素。由于大环内酯类药物的临床应用和在饲料中添加预防亚治疗剂量该类药物,其耐药性也随之广泛产生,猪链球菌对大环内酯类的耐药率达50%以上。由于猪链球菌耐药性的产生往往导致治疗失败,且耐药基因可以在不同种属细菌间传播,引起多重耐药,后果严重。猪链球菌对大环内酯类药物产生耐药的机制主要有叁种,一种是结合靶位的甲基化,可以阻止药物与靶位的结合,其主要是由erm基因编码所产生的;第二种是细菌细胞膜的泵机制,将药物主动外排,使菌体内药物浓度降低,而产生耐药,其主要是由mef基因编码所产生的;第叁种是核糖体蛋白发生基因突变,导致耐药。由于与抗生素结合靶位核糖体甲基化,可以导致链球菌对大环内酯类药物、林可酰胺类药物以及链阳菌素B产生交叉耐药性,所以常把这种耐药统称为MLSB耐药表型。甲基化可以导致核糖体50S亚基的构象发生改变,降低结合效率。大环内酯类药物、林可酰胺类药物及链阳菌素B可能有相似的结合位点,产生交叉耐药。根据表达方式的不同,MLS耐药性又可分为内在型(constitutive macrolide lincosamide streptogramin,cMLS)和诱导型(inducible macrolide lincosamide streptogramin,iMLS)耐药,ermB基因上游调控区决定了ermB的内在或诱导表达。对14、15、16元环大环内酯类药物、林可酰胺类药物及链阳菌素B均耐药,系cMLS型耐药菌;对14、15元环大环内酯类药物耐药,而对16元环大环内酯类药物及林可酰胺类药物及链阳菌素B仍敏感,系iMLS型耐药菌。诱导耐药性仅表现为对大环内酯类药物低水平耐药,一旦耐药基因ermB被完全诱导表达,则表现为内在耐药性,即对所有大环内酯类药物、林可酰胺类药物和链阳菌素B高水平耐药。在肺炎链球菌中发现另一种耐药表型,对14、15元环大环内酯类药物低水平耐药而对16元环大环内酯类药物、克林酰胺类药物和链阳菌素B敏感,即M型,其主要介导主动外排系统产生耐药性。耐药基因mef编码的外排蛋白是一个能量依赖的膜蛋白,由405个氨基酸组成,含12个跨膜区域,mef依靠质子运动力泵出14、15元环大环内酯类药物。另外,在肺炎链球菌中发现核糖体蛋白L4及L22或23S rRNA发生突变,也可以导致其对大环内酯类药物产生耐药性。本试验从河南、黑龙江、辽宁、广州、上海、湖北、湖南、山东及吉林等全国各地,采集疑似猪链球菌感染猪只病变组织样本1500余份,包括肺、肝、脾、肾、脑、扁桃体及淋巴结等,共分离猪链球菌52株,其中2型猪链球菌3株。用链球菌乳胶凝集试剂盒对分离的猪

谭涛[5]2004年在《猪链球菌随机扩增多态性DNA分析及多价疫苗研制》文中进行了进一步梳理猪链球菌病是由链球菌(Streptococcus)感染所引起的猪的一类疾病的总称,是一种分布范围极为广泛的猪传染病,目前20多个国家和地区已有该病的报道。在我国华南、西南、华东、江西及江苏等地曾大面积爆发流行过,其发病率也有逐年上升的趋势,给养殖业造成了巨大经济损失,是多年来困扰养猪业发展的重要传染病之一。本研究是在对吉林省分离的猪链球菌菌株分离、鉴定基础上,应用随机扩增多态性DNA(RAPD)方法对分离株进行基因分型,并根据菌株间的遗传距离,挑选出具有代表性的菌株作为疫苗株,研制多价灭活疫苗用于本地区该病的免疫防制。现总结如下: 1.对吉林省离的12株猪链球菌进行了鉴定和分群,初步证实该地区的猪链球菌流行株以D群、C群链球菌为主,还有G群链球菌存在。 2.采用随机扩增多态性DNA方法对分离菌株进行分析,优化了RAPD对猪链球菌分型的反应条件,确立了最佳反应体系。在所采用的20条随机引物,有7引物可产生较好的多态性条带。 3.RAPD分型所得到的不同菌株之间的遗传距离并据此将12株猪链球菌分为3个聚类群。从而在分子水平上为猪链球菌病流行病学调查和防制提供了理论依据。 4.RAPD分型结果表明,不同血清群的菌株具有不同的指纹图谱,同一血清群的菌株指纹图也存在差异,由此说明RAPD分型比传统分型方法更能反映病原菌菌株间的亲缘关系,从分子水平上揭示了不同菌株之间的遗传距离,是人畜疾病分子流行病学调查非常有用的工具。 5.应用RAPD方法挑选出的疫苗株制成的多价灭活疫苗,经免疫效力试验证实,该方法挑选的疫苗株与常规方法挑选的疫苗株相比更能反映出菌株间的亲缘关系,因而更具代表性。 6.本实验研制的多价灭活疫苗经临床初步应用,安全性好、免疫效力高,能够用于吉林省猪链球菌病的防治,具有较好的免疫效果,值得推广。

佚名[6]2013年在《畜牧兽医科技文摘》文中提出牛支原体免疫相关性蛋白硫锌酰胺脱氢酶的筛选与鉴定/孙文静(东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030),李媛,宋志强…//中国预防兽医学报.-2012,34(10).-761-765为鉴定牛支原体(M.bovis)菌体免疫相关蛋白及其免疫原性,本实验以M.bovis湖北株为样品,通过建立M.bovis全菌蛋白的双向电泳体系,获得了分辨率及重复性良好的双向电泳(2-DE)

孙景发, 孙考取[7]2008年在《吉林省猪禽疫病情况调研》文中研究指明为推进生猪家禽产业健康发展、保障畜禽产品有效供给和维护公共卫生安全,全面摸清猪禽疫病现状,分析流行规律和特点,我们组织开展了吉林省猪禽疫病调查,调查的期间为2007年4月至2008年4月。在调查的同时,有重点地进行了点

参考文献:

[1]. 吉林省猪致病性链球菌的分离与鉴定[D]. 张桂荣. 吉林农业大学. 2003

[2]. 吉林省猪致病性链球菌的分离鉴定及其部分特性研究[J]. 张炎炎, 杨晓杰, 张媛, 李颖, 刘清河. 吉林农业大学学报. 2005

[3]. 屠宰场猪链球菌分离菌株分型及其致病性和耐药性分析[J]. 祝令伟, 纪雪, 李丽红, 周伟, 刘军. 中国兽医学报. 2017

[4]. 猪链球菌对大环内酯类药物耐药机制研究[D]. 姜成刚. 东北农业大学. 2006

[5]. 猪链球菌随机扩增多态性DNA分析及多价疫苗研制[D]. 谭涛. 吉林农业大学. 2004

[6]. 畜牧兽医科技文摘[J]. 佚名. 中国畜牧兽医文摘. 2013

[7]. 吉林省猪禽疫病情况调研[J]. 孙景发, 孙考取. 吉林畜牧兽医. 2008

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