论文摘要
米黑根毛霉脂肪酶（RML）具有较高的合成活性、热稳定性、溶剂耐受性以及sn-1,3位置专一性等一系列适合工业化推广的特点。本研究通过密码子优化改造RML编码基因,并将其克隆、转化到毕赤酵母GS115菌株,经诱导发酵156 h,酶活达到3.77 U/mL。为了进一步改善RML脂肪酶的重组表达,通过定点突变的方式去掉潜在的Kex2酶切位点,结果显示:RML突变体表达量均显著低于野生型的RML脂肪酶,表明"-Arg196-Arg197-"序列并不影响RML的重组表达。通过对RML蛋白结构分析,Kex2酶切位点的肽键被包埋在蛋白内部,这表明该位点区域的折叠在进入分泌途径时已基本完成。本研究对异源蛋白的酵母重组表达具有一定参考价值。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 蔡海莺,沈灵智,赵敏洁,李杨,毛建卫,冯凤琴
关键词: 米黑根毛霉脂肪酶,重组表达,毕赤酵母,密码子优化,位置专一性
来源: 中国食品学报 2019年04期
年度: 2019
分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学
专业: 生物学
单位: 浙江科技学院生物与化学工程学院,浙江省农业生物资源生化制造协同创新中心,浙江大学生物系统工程与食品科学学院
基金: 浙江省自然科学基金一般项目(LY18C200006),浙江省教育厅科研一般项目(Y201737161),浙江省重大科技专项(2012C12005-2)
分类号: Q78
DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.04.010
页码: 85-91
总页数: 7
文件大小: 548K
下载量: 160
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标签：米黑根毛霉脂肪酶论文; 重组表达论文; 毕赤酵母论文; 密码子优化论文; 位置专一性论文;