乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌的实时荧光定量PCR检测方法

论文摘要

目的:为快速准确检测乳酸菌饮料中的嗜酸乳杆菌,建立实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR)检测方法。方法:根据嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR保守区域设计特异性引物与探针,借助建立的实时荧光定量PCR方法进行特异性、灵敏度、重复性以及抗干扰能力验证,并利用模拟样品对方法进行检验,最后对市售的实际样品进行检测。结果:该方法的特异性较好;方法的绝对灵敏度达到3 pg,相对灵敏度达103 CFU/mL;重复性检测表明相对标准偏差在2.6%以下。同时进行杂菌干扰实验,在纯基因组水平和培养物水平混合大肠杆菌,扩增均无明显影响,表明建立的方法抗干扰能力较好。利用建立的实时荧光定量PCR方法对模拟样品进行检测并建立标准曲线,得出R~2为0.987,线性较好,可进行实际样品的检测。对市售的11份样品进行检测,其中6份含有嗜酸乳杆菌菌株,5份不含嗜酸乳杆菌菌株,标记嗜酸乳杆菌的样品全部检测出嗜酸乳杆菌且含量在5.83×10~2～3.68×1~04 CFU/mL之间。结论:建立的实时荧光定量PCR方法可快速、准确地检测出乳酸菌饮料中嗜酸乳杆菌。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张娜娜,刘洋,俞漪,赵渝,窦同海,徐琼,段文锋,翁史昱

关键词: 实时荧光定量,嗜酸乳杆菌,定量,检测

来源: 食品科学 2019年08期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,轻工业手工业

单位: 上海市质量监督检验技术研究院国家食品质量监督检验中心(上海),上海师范大学生命与环境科学学院,复旦大学生命科学学院,上海市质量管理科学研究院(上海)

基金: 国家自然科学基金青年科学基金项目(31301486),上海市自然科学基金项目(13ZR1439600),国家质量监督检验检疫总局科研项目(2017QK167)

分类号: TS275.4;O657.3

页码: 27-32

总页数: 6

文件大小: 1803K

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