成骨细胞膜色谱/超高效液相色谱-飞行时间质谱法快速筛选六味地黄汤抗骨质疏松活性成分

成骨细胞膜色谱/超高效液相色谱-飞行时间质谱法快速筛选六味地黄汤抗骨质疏松活性成分

论文摘要

采用成骨细胞建立了细胞膜色谱/超高效液相色谱-飞行时间质谱(CMC/UPLC-TOF/MS)的分析方法。该法可快速筛选中药方剂六味地黄汤中潜在的抗骨质疏松活性成分,通过细胞试验和斑马鱼骨质疏松模型试验验证了筛选结果梓醇的体内外药效作用。以六味地黄汤水提物(90 g/L)为样品,通过CMC/UPLC-TOF/MS分析,快速鉴别细胞膜色谱柱保留成分群,高选择性获取六味地黄汤中16种潜在活性成分。该文以前沿色谱法分析梓醇、丹皮酚、齐墩果酸与细胞膜色谱固定相的亲和强度,选择亲和强度和含量较高的梓醇进行体内外药效验证,发现梓醇在对小鼠成骨细胞有显著促生长作用,能提高骨质疏松斑马鱼头部骨矿化面积。CMC/UPLC-TOF/MS筛选方法能在复杂中药方剂中快速得到抗骨质疏松活性成分,具有操作简便、快速、高效灵敏的优势。

论文目录

  • 1 实验部分
  •   1.1 仪器、试剂与材料
  •   1.2 实验条件
  •     1.2.1 样品制备
  •     1.2.2 成骨细胞膜色谱固定相的制备
  •     1.2.3 CMC筛选实验条件
  •     1.2.4 UPLC-TOF/MS条件
  •     1.2.5 CMC亲和强度试验
  •     1.2.6 药效评价试验
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 CMC/UPLC-TOF/MS的适用性考察
  •   2.2 CMC固定相的结构表征
  •     2.2.1 红外光谱表征
  •     2.2.2 扫描电镜表征
  •     2.2.3 元素分析
  •   2.3 六味地黄汤中抗骨质疏松活性成分的筛选
  •   2.4 亲和强度分析
  •   2.5 药效验证
  •     2.5.1 体外细胞活性试验
  •     2.5.2 体内药效验证试验
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吴灿,许平翠,姚伟宣,寿旦,朱岩,王娜妮

    关键词: 细胞膜色谱,骨质疏松症,六味地黄汤,中药方剂

    来源: 色谱 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

    专业: 化学,中药学

    单位: 浙江大学化学系,浙江省中医药研究院中药研究中心,浙江警察学院刑事科学技术系浙江省毒品防控技术研究重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(81603252),浙江省自然科学基金(LQ17H280002)~~

    分类号: R285;O657.63

    页码: 305-312

    总页数: 8

    文件大小: 1947K

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