化学低氧诱导剂二氯化钴对PC12细胞自噬的影响

化学低氧诱导剂二氯化钴对PC12细胞自噬的影响

论文摘要

文章研究化学性低氧诱导剂二氯化钴(CoCl2)对PC12细胞自噬的影响。体外培养PC12细胞,用不同浓度CoCl2处理PC12细胞24 h。首先通过MTT实验选取后续的CoCl2处理浓度,用荧光定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction, q-PCR)实验检测不同浓度CoCl2处理PC12细胞24 h后细胞内HIF-1α基因表达水平。用Western Blot方法检测CoCl2处理后自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白表达水平。结果表明,400、800μmol/L CoCl2处理PC12细胞24 h不仅能显著降低细胞存活率,并且能显著提高HIF-1α基因表达,即表明用CoCl2造模确实可以模拟细胞体外缺氧。此外,800μmol/L CoCl2处理组的Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白表达量出现显著降低,表明CoCl2处理抑制了细胞自噬,并且该种抑制是呈时间依赖的。研究结果表明,CoCl2引起的化学性缺氧会损伤PC12细胞,并且会抑制细胞正常的自噬,该异常的自噬可能参与了CoCl2致PC12细胞的损伤。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 仪器和设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 PC12细胞的培养
  •     1.3.2 实验分组
  •     1.3.3 细胞存活率检测(MTT法)
  •     1.3.4 q-PCR实验
  •     1.3.5 Western Blot实验
  •   1.4 统计学分析
  • 2 实验结果
  •   2.1 CoCl2浓度对PC12细胞存活率的影响
  •   2.2 CoCl2对HIF-1α基因表达水平的影响
  •   2.3 CoCl2对Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的影响
  •   2.4 不同处理时间对PC12细胞自噬影响
  • 3 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 韩苗苗,叶丹蕾,吴玉兰,汪惠丽

    关键词: 二氯化钴,缺氧,细胞,自噬,抑制

    来源: 合肥工业大学学报(自然科学版) 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅱ辑,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,化学

    单位: 合肥工业大学食品与生物工程学院

    基金: 国家自然科学基金面上资助项目(81773475)

    分类号: Q25;O614.812

    页码: 1411-1414

    总页数: 4

    文件大小: 1020K

    下载量: 124

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