T-2毒素快速定量检测试纸条的研究

T-2毒素快速定量检测试纸条的研究

论文摘要

为研制一种快速定量检测玉米中T-2毒素含量的胶体金试纸条,对T-2毒素单克隆抗体进行标记并对胶体金试纸条性能进行研究。用胶体金标记T-2毒素单克隆抗体,通过测定加入不同量碳酸钾后吸光度值的变化,确定标记的最佳p H值,通过与抗原进行正交试验确定最佳组合条件,应用胶体金定量读数仪通过检测线和对照线的对比,检测试纸条的性能。结果表明,单克隆抗体标记的最佳pH值为8.5,最佳标记浓度为20μg/m L,抗原的包被浓度为0.5 mg/mL,羊抗鼠IgG的包被浓度为1.0 mg/mL,试纸条检测T-2毒素标准品的检测限为5μg/kg。T-2毒素胶体金快速定量检测试纸条检测方法可得出具体数据,与常见真菌毒素无交叉反应,回收率在77%~117.6%之间,批内和批间重复性检测变异系数小于10%,玉米中T-2毒素的检测结果与高效液相法检测结果一致。T-2毒素胶体金快速定量检测试纸条可用于玉米中T-2毒素含量的快速定量检测。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 T-2毒素单克隆抗体的制备
  •     1.3.2 T-2毒素单克隆抗体的纯化鉴定
  •     1.3.3 胶体金标记抗体最适pH值的确定
  •     1.3.4 金标抗体的制备
  •     1.3.5 抗体最佳标记浓度和抗原最佳包被浓度
  •     1.3.6 快速检测卡的组装与检测
  •     1.3.7 标准曲线的建立
  •     1.3.8 样品前处理方法的确定
  •     1.3.9 回收试验
  •     1.3.1 0 特异性检测
  •     1.3.1 1 重复性检测
  •     1.3.1 2 样品检测
  •   1.4 数据统计
  • 2 结果与分析
  •   2.1 T-2单克隆抗体效价的测定
  •   2.2 T-2毒素单克隆抗体的纯化鉴定
  •   2.3 胶体金标记抗体最适pH的确定
  •   2.4 金标抗体的质量鉴定
  •   2.5 抗体最佳标记浓度和抗原最佳包被浓度
  •   2.6 标准曲线的建立
  •   2.7 回收试验
  •   2.8 特异性检测
  •   2.9 重复性检测
  •   2.1 0 方法比对
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 许会静,李玉杰,张馨月,王弘瑞,苗茁,柳玉,李艳,王会岩,董媛

    关键词: 毒素,单克隆抗体,免疫层析,胶体金,快速检测,试纸条

    来源: 食品研究与开发 2019年19期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 吉林医药学院检验学院,吉林医药学院抗体中心

    基金: 国家科技重大专项(2012ZX09103-301-003),吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(吉教科合字[2015]第397号),吉林省大学生创新训练项目(201731,201831)

    分类号: TS210.7

    页码: 175-180

    总页数: 6

    文件大小: 370K

    下载量: 140

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