重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定

重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定

论文摘要

通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体的重链和轻链DNA序列,分别构建表达载体pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV,将表达载体共转染HEK-293细胞后,与C6胶质瘤细胞共培养,并将所得蛋白进行分离纯化.实验结果表明:pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV共转染HEK-293F细胞,可显著抑制C6细胞增殖(P<0.01);转染24~144h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达;所得纯化蛋白和标准品一致;纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖(P<0.05~0.01),与标准品抑制效果相似.

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 HEK-293F瞬时转染
  •     1.2.2 抗体蛋白分离纯化
  •     1.2.3 SDS-PAGE检测蛋白表达
  •     1.2.4 细胞共培养
  •     1.2.5 抗体蛋白活性检测
  •     1.2.6 MTT检测细胞增殖
  •     1.2.7 统计学分析
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 设计并优化抗VEGF抗体重链及轻链基因序列
  •   2.2 构建表达载体
  •   2.3 VEGF抗体大量表达特性
  •   2.4 重组基因表达产物活性检测
  •   2.5 VEGF抗体分离纯化及检测
  •   2.6 VEGF抗体生物活性检测
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚,殷玉和,吴丛梅

    关键词: 密码子优化,单克隆抗体,纯化,生物活性

    来源: 吉林大学学报(理学版) 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

    专业: 有机化工,药学

    单位: 长春工业大学化学与生命科学学院,东北农业大学生命科学学院

    基金: 吉林省科技发展计划项目(批准号:20160209015YY)

    分类号: R945

    DOI: 10.13413/j.cnki.jdxblxb.2018461

    页码: 1538-1543

    总页数: 6

    文件大小: 603K

    下载量: 167

    相关论文文献

    • [1].迈新·PD-L1 研思有成[J]. 临床与实验病理学杂志 2020(02)
    • [2].全球单克隆抗体药物研发现状及发展趋势[J]. 中国生物工程杂志 2019(03)
    • [3].单克隆抗体的发展与应用[J]. 中国新通信 2019(08)
    • [4].治疗性单克隆抗体药物与临床检验[J]. 海峡药学 2017(09)
    • [5].治疗性单克隆抗体药物与临床检验[J]. 海峡药学 2017(10)
    • [6].贝伐珠单抗研究现状及临床应用[J]. 科学中国人 2016(35)
    • [7].基于生物膜干涉技术的单克隆抗体高通量定量检测方法的建立[J]. 福建医科大学学报 2020(03)
    • [8].单克隆抗体的出现与发展[J]. 科学通报 2020(Z2)
    • [9].我国单克隆抗体药物产业化进展浅谈[J]. 生物产业技术 2019(02)
    • [10].抗EGFR单克隆抗体稳定性的影响因素研究[J]. 化学试剂 2019(09)
    • [11].单克隆抗体药物耐药机制的研究进展[J]. 实用药物与临床 2017(01)
    • [12].重要危害因子单克隆抗体的制备及其食品安全快速检测技术应用[J]. 食品与生物技术学报 2017(03)
    • [13].植物表达单克隆抗体的研究进展[J]. 生物产业技术 2012(04)
    • [14].基于单克隆抗体的癌症疗法汇总[J]. 中学生物教学 2015(08)
    • [15].兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品 2012(09)
    • [16].单克隆抗体药物与血液系统恶性肿瘤的治疗[J]. 中国细胞生物学学报 2011(09)
    • [17].单克隆抗体药物在抗血栓治疗中的应用及研究进展[J]. 中国医院药学杂志 2010(09)
    • [18].单克隆抗体药物临床应用进展[J]. 检验医学 2019(05)
    • [19].GⅡ.17型诺如病毒单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国生物制品学杂志 2017(11)
    • [20].化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床比较[J]. 中国卫生产业 2014(36)
    • [21].化学法、单克隆抗体法和联合免疫法检测便隐血的临床比较[J]. 当代医学 2015(07)
    • [22].培养能力 落实素养 提升复习效率——以“动物细胞培养与单克隆抗体”复习为例[J]. 教学考试 2020(24)
    • [23].对《单克隆抗体的制备》教学的几点建议[J]. 新课程(中学) 2015(01)
    • [24].“神秘的”单克隆抗体[J]. 抗癌之窗 2011(04)
    • [25].抗EGFR单克隆抗体药物纯度分析[J]. 周口师范学院学报 2013(02)
    • [26].治疗性狂犬病病毒单克隆抗体的研究进展[J]. 中国生物制品学杂志 2009(10)
    • [27].单克隆抗体及其在畜禽传染病诊治中的应用研究进展[J]. 河南畜牧兽医(综合版) 2009(05)
    • [28].单克隆抗体药物的技术发展和应用进展[J]. 山东化工 2020(06)
    • [29].抗VEGF单克隆抗体生物学活性分析方法的建立及其应用[J]. 中国医药生物技术 2017(01)
    • [30].抗乙型肝炎病毒单克隆抗体药物的临床前药效学评价[J]. 微生物与感染 2013(04)

    标签:;  ;  ;  ;  

    重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定
    下载Doc文档

    猜你喜欢