肌蛋白基因论文_李彦瑛

导读:本文包含了肌蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:成虫,线虫,蛋白,雌性,广州,基因,夜蛾。

肌蛋白基因论文文献综述

李彦瑛[1](2017)在《斜纹夜蛾飞行肌蛋白flightin基因的克隆、表达及RNAi》一文中研究指出斜纹夜蛾Spodoptera litura F.是我国粮、棉、烟草、蔬菜等作物的重要害虫,其成灾因子主要是繁殖力高,爆食性、杂食性,世代重迭以及迁飞性。斜纹夜蛾具远距离迁飞能力,这是其异地爆发成灾的主要原因,也是目前斜纹夜蛾防治的制约因素。本研究旨在通过斜纹夜蛾飞行肌蛋白flightin基因的研究,探索斜纹夜蛾飞行的分子机制,为斜纹夜蛾防治研究提供思路。本研究通过PCR及RACE技术,获得了斜纹夜蛾flightin全长mRNA序列,该序列全长805bp,其开放阅读框(ORF)483bp,可编码一个有160个氨基酸残基的蛋白。斜纹夜蛾flightin与冬尺蠖蛾等鳞翅目昆虫的flightin具有较高的同源性(>75%),但与鞘翅目,双翅目等昆虫的flightin的同源性较低(<40%)。通过实时荧光定量技术检测了flightin在斜纹夜蛾各个发育阶段的相对表达量,结果显示flightin在斜纹夜蛾中自幼虫至成虫期均有表达,在幼虫期表达量低,蛹期开始激增,在刚羽化成虫中表达量达到了最高值。雌虫flightin相对表达量比雄虫高。进一步检测了flightin在雌雄成虫羽化后0d、1d、2d不同组织中的相对表达量,结果表明在羽化后叁天时间里flightin的相对表达量均为:头部>胸部>生殖系统。在雌虫和雄虫胸部,flightin的表达在0d最高,随后急速下降。在雌虫生殖系统,flightin的表达在0d最低,但在随后两天里显着升高。在雄成虫生殖系统,flightin表达量在羽化后叁天里维持在相同水平。进一步通过dsRNA饲喂和注射对成虫flightin干扰效率进行了研究。结果显示,饲喂dsRNA后所有成虫均不羽化。注射5μg及7.5μg fllightin dsRNA成功干扰了flightin表达,干扰后flightin表达下降情况为:5μg处理雌虫31%,5μg处理雄虫39%,7.5μg处理雌虫50%,7.5μg处理雄虫51%。本研究首次获得了斜纹夜蛾flightin全长mRNA序列。表达分析发现在成虫胸部,flightin的表达呈先高(0d)后低(1d、2d)模式,与迁飞行为发生相符。首次发现斜纹夜蛾flightin在成虫生殖系统表达,且在雌虫生殖系统表达量随日龄的变化呈先低(0d)后高(1d、2d)模式(与其在胸部表达量变化趋势相反),与该蛾的性成熟与生殖行为发生呈正相关。本研究具有创新性,研究结果为斜纹夜蛾flightin基因的功能研究提供了新的启示。(本文来源于《云南大学》期刊2017-05-01)

李素丽,詹希美,李海飞[2](2014)在《广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1基因的克隆表达及免疫学效应分析》一文中研究指出目的对广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp-1)基因的开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫学效应分析,评价其重组蛋白在免疫学诊断中的应用前景。方法逆转录聚合酶链反应扩增目的基因,克隆至原核表达载体pET-30a-c(+),重组质粒转化至大肠埃希菌E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍离子亲和层析(Ni-IDA)纯化分离表达产物。免疫印记(Western-blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析重组蛋白的免疫性。结果广州管圆线虫Ac-fmp-1基因的编码区有1 251个碱基,编码417个氨基酸。原核表达载体pET-Ac-fmp-1构建成功,IPTG诱导表达获得了体外高效表达的重组融合蛋白,经亲和层析得到纯化蛋白。融合蛋白可被感染广州管圆线虫的SD大鼠血清及病人血清所识别;作为包被抗原用于ELISA检测大鼠血清其敏感性与特异性均为100%,与粗抗原无差别;检测广州管圆线虫病人血清敏感性为100%,与粗抗原有差别;检测其他寄生虫病人血清与正常病人血清其特异性为100%和98%,与粗抗原相比特异性较高。结论广州管圆线虫Ac-fmp-1基因在原核表达系统获得高效表达,编码蛋白可能是虫体的重要抗原成分,在免疫学诊断方面有潜在的应用前景。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2014年06期)

李素丽,詹希美,谢建生[3](2013)在《广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1基因的克隆及生物信息学分析》一文中研究指出目的对广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp-1)基因的开放读码框进行克隆,分析序列结构、功能特征及编码蛋白的理化性质,并构建体外表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应和T-A克隆方法克隆Ac-fmp-1基因的开放读码框全长;运用NCBI网站和ExPaSy等生物信息学在线工具分析Ac-fmp-1基因编码序列及其编码氨基酸的理化性质、结构及功能;采用基因克隆技术定向克隆至原核表达载体pET-30a-c(+),构建Ac-fmp-1基因重组表达质粒。结果扩增和克隆了广州管圆线虫Ac-fmp-1基因开放读码框序列,此序列大小为1 251bp,与GenBank数据库中Acfmp-1基因的编码序列同源性为99.6%,编码417个氨基酸。ProtParam预测该基因编码蛋白在溶液中不稳定、保守性差,未发现跨膜区域。PHD法二级结构预测该蛋白质分子为α-螺旋型,于氨基酸残基346~404位点处含有一个锌指结构,Signal P软件预测该蛋白分子无信号肽序列,具有较强的亲水性。该基因编码蛋白的氨基酸序列中,含有16个潜在的B细胞抗原表位。构建的原核表达载体pET-Ac-fmp-1成功定向插入了Ac-fmp-1基因。结论成功扩增和克隆了广州管圆线虫Ac-fmp-1基因,编码蛋白可能是广州管圆线虫的重要抗原成分,可作为广州管圆线虫病的疫苗候选分子和药物靶标。构建了用于体外表达的原核表达载体,为进行Ac-fmp-1功能研究奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2013年10期)

杜兵,陈蓓蓓,王西明,段秋红,何善述[4](2007)在《低氧内皮细胞条件培养液和DDPH对肺动脉平滑肌细胞骨桥蛋白基因及α平滑肌肌蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:研究低氧内皮细胞条件培养液(HEC-CM)和DDPH对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)骨桥蛋白(OPN)基因表达和α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的影响,进而探讨DDPH对增殖后PASMC的逆转效应。方法:利用HECCM建立猪PASMC的增殖模型;采用细胞培养、改良的四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、免疫细胞化学染色测定α-SM-actin、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测OPN基因表达等方法观察HECCM的促PASMC增殖作用,以及DDPH对增殖后PASMCα-SM-actin和OPN表达的影响。结果:(1)HECCM促PASMC增殖后,PASMC的α-SM-actin含量降低而其OPN基因表达上调;(2)HECCM促PASMC增殖后,加入DDPH可使PASMC的α-SM-actin含量回升,OPN表达下调。结论:DDPH对HECCM促PASMC增殖有逆转效应,可使增殖后PASMC由合成表型逆转为正常收缩表型。(本文来源于《中国临床药理学与治疗学》期刊2007年09期)

陈代雄,沈浩贤,李小敏,陈新宇[5](2003)在《广州管圆线虫感染的观察与成虫特异性肌蛋白-1基因的扩增》一文中研究指出目的 观察广州管圆线虫在非适宜宿主体内的移行过程 ,探寻该病新的更有效的诊断方法 .方法 用广州管圆线虫第叁期幼虫 ,经灌胃和腹腔注射两种方式感染小鼠 .分别于感染后第 4、2 0、30天随机抽取小鼠进行解剖 ,观察其脑组织的病理改变 ;并从脑组织分离和计数虫体 ;同时采集小鼠的全血、血清和脑脊液样本待检 .根据广州管圆线虫成虫特异性肌蛋白 - 1基因的序列 ,设计半嵌套式PCR引物扩增成虫DNA和检测感染小鼠样本 .结果 ①小鼠感染以 30条幼虫 /鼠为宜 ,经灌胃与经腹腔注射感染无显着性差异 ;②感染后 30天从小鼠脑组织内检获的虫体数较 2 0天时显着下降 ;③感染后第 30天小鼠脑组织病理改变及其程度类似第 2 0天或略轻 ;④PCR扩增产物经测序证实 :其与广州管圆线虫基因序列完全一致 .结论 ①广州管圆线虫在非正常宿主体内也会出现类似在适宜宿主体内的移行过程 ,只是向脑组织外的移行在时间上明显延迟 .②用PCR方法扩增成虫DNA获得成功 ,但用该方法未能从感染小鼠的样本中探测到期望的目标(本文来源于《现代临床医学生物工程学杂志》期刊2003年03期)

谷亚鹏,谢平,刘美莲,宋惠萍[6](2002)在《骨胳肌蛋白磷酸酶1调节亚基基因3′非翻译区多态性与2型糖尿病相关性研究》一文中研究指出蛋白质磷酸酶 1(proteinphosphatase 1,PP1)在胰岛素作用下可通过脱磷酸作用激活糖原合成酶〔1〕,促进葡萄糖摄取和糖原合成〔2〕。PP1由一个催化亚基 (PP1catalyticsubunit,PP1C)和糖原目标亚基 (又称调节亚(本文来源于《中华内分泌代谢杂志》期刊2002年05期)

肌蛋白基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的对广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1(Ac-fmp-1)基因的开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫学效应分析,评价其重组蛋白在免疫学诊断中的应用前景。方法逆转录聚合酶链反应扩增目的基因,克隆至原核表达载体pET-30a-c(+),重组质粒转化至大肠埃希菌E.coli BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍离子亲和层析(Ni-IDA)纯化分离表达产物。免疫印记(Western-blot)和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析重组蛋白的免疫性。结果广州管圆线虫Ac-fmp-1基因的编码区有1 251个碱基,编码417个氨基酸。原核表达载体pET-Ac-fmp-1构建成功,IPTG诱导表达获得了体外高效表达的重组融合蛋白,经亲和层析得到纯化蛋白。融合蛋白可被感染广州管圆线虫的SD大鼠血清及病人血清所识别;作为包被抗原用于ELISA检测大鼠血清其敏感性与特异性均为100%,与粗抗原无差别;检测广州管圆线虫病人血清敏感性为100%,与粗抗原有差别;检测其他寄生虫病人血清与正常病人血清其特异性为100%和98%,与粗抗原相比特异性较高。结论广州管圆线虫Ac-fmp-1基因在原核表达系统获得高效表达,编码蛋白可能是虫体的重要抗原成分,在免疫学诊断方面有潜在的应用前景。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

肌蛋白基因论文参考文献

[1].李彦瑛.斜纹夜蛾飞行肌蛋白flightin基因的克隆、表达及RNAi[D].云南大学.2017

[2].李素丽,詹希美,李海飞.广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1基因的克隆表达及免疫学效应分析[J].中国人兽共患病学报.2014

[3].李素丽,詹希美,谢建生.广州管圆线虫雌性成虫肌蛋白-1基因的克隆及生物信息学分析[J].中国病原生物学杂志.2013

[4].杜兵,陈蓓蓓,王西明,段秋红,何善述.低氧内皮细胞条件培养液和DDPH对肺动脉平滑肌细胞骨桥蛋白基因及α平滑肌肌蛋白表达的影响[J].中国临床药理学与治疗学.2007

[5].陈代雄,沈浩贤,李小敏,陈新宇.广州管圆线虫感染的观察与成虫特异性肌蛋白-1基因的扩增[J].现代临床医学生物工程学杂志.2003

[6].谷亚鹏,谢平,刘美莲,宋惠萍.骨胳肌蛋白磷酸酶1调节亚基基因3′非翻译区多态性与2型糖尿病相关性研究[J].中华内分泌代谢杂志.2002

论文知识图

基因在不同组织中表达Fig.13Tiss...和LIMK1siRNA共转染对HRVE...地黄肌动蛋白基因核苷酸序列及推导的...一102子又滋CTZ编码区的扩增人.去斤刀d...一10油余种于肌动蛋白基因的BLASTN比对...ZjACT基因组DNA序列的结构示意图

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

肌蛋白基因论文_李彦瑛
下载Doc文档

猜你喜欢