PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

论文摘要

为建立鉴别检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）和猪轮状病毒（PRoV）的方法,本研究分别针对PEDV N基因、TGEV M基因、PDCoV M基因和PRoV VP6基因设计特异性引物和TaqMan探针,经过优化反应条件,建立了同时检测4种病毒的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法仅特异性扩增PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV,与猪其它主要病毒无交叉反应,特异性较强;对PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV的质粒标准品的最低检出限分别为2.06×102拷贝/μL、2.06×102拷贝/μL、2.06×101拷贝/μL、2.06×103拷贝/μL,具有较高敏感性;组内与组间变异系数均小于1.1%,具有良好的重复性。应用该方法和普通多重RT-PCR检测临床采集的243份腹泻病料样品,两者的符合率为96.71%。本研究建立的方法为临床PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的鉴别检测及流行病学调查提供了一种快速、特异、敏感、高效的技术手段。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 施开创,王睿敏,黎宗强,谢守玉,尹彦文,陆文俊,屈素洁

关键词: 猪流行性腹泻病毒,猪传染性胃肠炎病毒,猪德尔塔冠状病毒,猪轮状病毒,荧光定量

来源: 中国预防兽医学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 广西动物疫病预防控制中心,广西大学动物科学技术学院

基金: 广西水产畜牧科技项目(桂渔牧科201528017),广西科技重大专项(桂科AA17204057),广西农业科技项目(Z201954)

分类号: S852.65

页码: 595-600

总页数: 6

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