2014-2018年中国家禽H10、H11亚型禽流感病毒的部分生物学特性研究

论文摘要

近年来,在禽流感病毒的流行病学监测中,不断从家鸭中分离到H10、H11亚型的禽流感病毒,为了更清楚的了解H10、H11亚型禽流感病毒最新的分布流行情况、来源以及致病性特点,对2014年-2018年从中国家禽中分离的H10、H11亚型禽流感病毒进行了生物学特性研究。在2014年-2018年期间,从中国活禽市场的家鸭中分离到36株H10亚型禽流感病毒和26株H11亚型禽流感病毒,但并未能在其他家禽中分离该亚型的禽流感病毒,表明家禽中的家鸭是该亚型禽流感病毒稳定存在的重要宿主。不同年份分离毒株的进化关系表明,从我国家禽中监测分离到的H10、H11亚型禽流感病毒呈现明显的遗传多样化,基因来源复杂多样,与其他亚型的禽流感病毒存在基因重排现象,基于H10、H11亚型禽流感病毒基因的多样性,H10、H11亚型禽流感病毒可划分16种和14种不同的基因型,但是该亚型的毒株之间的抗原性差异并不明显,值得注意的是,部分H10亚型禽流感病毒和H11亚型禽流感病毒能够感染哺乳动物模型小鼠,受体结合特性分析表明,H10、H11亚型禽流感病毒同时具备结合禽源受体和人源受体的特性,存在跨种间感染的风险,在未来的监测过程中要更加关注该类亚型的禽流感病毒的宿主变化。本研究对我国禽流感病毒监测中分离到的H10、H11亚型禽流感病毒的遗传演化以及流行趋势、抗原性特点和跨物种间的感染进行了系统研究。对禽流感病毒生物学特性的研究是掌握其流行和演化较为重要的方法,同时也可以不断丰富和积累禽流感病毒流行的相关数据,本研究对于指导禽流感病毒防控具有重要意义。

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Abstract

第一章前言

1.1 研究背景

1.1.1 禽流感病毒的病原学

1.1.2 禽流感病毒的遗传和变异

1.1.3 H10、H11亚型禽流感病毒的流行病学

1.1.4 禽流感病毒生物学特性改变的重要氨基酸位点

1.2 本研究的目的及意义

第二章 H10、H11亚型禽流感病毒的遗传演化分析

2.1 材料和方法

2.1.1 病毒的命名

2.1.2 病毒及SPF鸡胚

2.1.3 试剂及器材

2.1.4 1%鸡红细胞的制备

2.1.5 病毒的鸡胚分离和鉴定

2.1.6 病毒纯化

2.1.7 病毒RNA的提取和反转录

2.1.8 病毒序列的测定与进化分析

2.1.9 病毒基因型的划分

2.2 结果

2.2.1 H10 亚型AIV表面基因HA序列与进化分析

2.2.2 H11 亚型AIV表面基因HA序列与进化分析

2.2.3 H10、H11 亚型AIV表面基因NA的进化分析

2.2.4 H10、H11亚型AIV内部基因序列分析和进化分析

2.2.5 H10、H11亚型AIV基因型的划分

2.3 讨论

第三章 H10、H11亚型禽流感病毒的抗原性分析

3.1 材料与方法

3.1.1 病毒

3.1.2 SPF鸡胚与SPF鸡

3.1.3 主要的试剂及器材

3.1.4 灭活疫苗及抗病毒血清的制备

3.1.5 交叉血凝抑制

3.1.6 抗原性差异分析

3.1.7 .抗原作图法

3.2 结果

3.2.1 交叉血凝抑制试验结果

3.2.2 抗原差异性分析结果

3.2.3 抗原作图法分析结果

3.3 讨论

第四章 H10、H11亚型禽流感病毒对小鼠的感染性分析

4.1 材料与方法

4.1.1 病毒及实验动物

4.1.2 病毒EID50的测定

4.1.3 病毒对小鼠的感染性实验

4.2 结果

4.2.1 影响H10、H11亚型禽流感病毒毒力和聚合酶活性的氨基酸位点

4.2.2 小鼠感染H10、H11亚型禽流感病毒后的体重变化

4.2.3 小鼠攻毒三天后的脏器病毒滴度

4.3 讨论

第五章 H10、H11亚型禽流感病毒的受体结合特性分析

5.1 材料与方法

5.1.1 病毒

5.1.2 试剂及器材

5.1.3 超速离心浓缩病毒

5.1.4 固相ELISA实验分析病毒受体结合特性

5.2 结果

5.2.1 H10、H11亚型禽流感病毒HA蛋白上影响受体结合的关键氨基酸位点

5.2.2 H10、H11亚型AIV病毒的受体结合特性分析结果

5.3 讨论

第六章全文结论

参考文献

致谢

附录Ⅰ

作者简历及在读期间的科研成果

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 张元成

导师: 邓国华,余兴龙

关键词: 禽流感病毒,亚型,抗原性,遗传演化,感染性,受体结合

来源: 湖南农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 湖南农业大学

分类号: S852.65

DOI: 10.27136/d.cnki.ghunu.2019.000709

总页数: 86

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