昆虫离体细胞论文_康薇,郑进,伊友明,洪华珠

导读:本文包含了昆虫离体细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:昆虫,细胞,离体,敏感性,夜蛾,细胞系,条带。

昆虫离体细胞论文文献综述

康薇,郑进,伊友明,洪华珠[1](2010)在《基于昆虫离体细胞的转Bt植株的毒力测定》一文中研究指出研究了转Bt抗虫杨的蛋白质提取液对离体培养的粉纹夜蛾Trichoplusia ni细胞(Hi5细胞)的毒性。结果表明,Bt抗虫杨的蛋白质提取液对Hi5细胞的形态有明显影响,相对于正常细胞,蛋白浓度为2 000μg/mL时,0.5 h后Hi5细胞表现为变圆、膨大,1 h后细胞破裂,2 h后大部分细胞解体,与鳞翅目昆虫细胞感染Bt毒素的典型病变相一致;同时,Bt抗虫杨蛋白质液抑制了Hi5细胞的增殖,并表现为随着Bt抗虫杨蛋白质液浓度的升高,其死亡率越大。表明可以利用离体细胞测定Bt抗虫植物对靶标昆虫的毒性。(本文来源于《中国森林病虫》期刊2010年05期)

张寰[2](2006)在《昆虫脂肪体细胞体外增殖方法及同源病毒敏感脂肪体细胞系建立研究》一文中研究指出昆虫细胞系具有非常广泛而重要的科学和应用价值。本研究参考动物细胞培养中植块培养的方法,从昆虫幼虫脂肪体细胞的原代培养入手,系统研究了以昆虫脂肪体组织为实验材料建立昆虫细胞系的方法,并初步探讨了昆虫细胞在体外增殖的机制,试图为更多昆虫脂肪体细胞系的建立提供有效的技术手段。研究中选用健康的光肩星天牛(Anoplophora glabripennis)幼虫脂肪体组织为实验材料进行原代培养,通过比较不同虫龄、不同取材部位的大小和完整性、不同培养表面、不同培养液种类和pH、不同血液中酚氧化酶原抑制物的种类和添加比例、原代培养物的贴壁处理等因素对原代培养结果的影响,以及传代方式、条件、时机等对传代培养结果的影响,试图探索出一套特有的昆虫脂肪体细胞建系方法。实验结果表明,由脂肪体组织建立昆虫细胞系,最佳的取材为末龄或进入预蛹期幼虫体内完整的脂肪体组织,优先使用一次性塑料培养瓶,原代细胞培养液的最佳配制比例为:TNM-FH(80%),胎牛血清(10%),苯基硫脲(10%),pH6.2~6.8。决定昆虫脂肪体细胞是否成系的关键因素包括:原代培养的组织能否同培养器皿表面紧密接触(贴壁),紧密贴壁的组织块倾向于游离出分裂能力较强的细胞群;在新生细胞长满瓶底时,处理好第一次或前几次转瓶、传代的步骤非常重要。最佳的初次传代方式是轻轻摇晃,将较易脱壁的细胞以较高的密度传入新的培养瓶中,同时注意不要扰动原组织块,减小对细胞的剪切力。原代培养换液量也需要根据细胞的生长状况而定,一般为换液量的50%。 运用上述方法,本研究共建立了7株昆虫幼虫脂肪体细胞系(IOZCAS-Spex-Ⅱ,IOZCAS-Spex-Ⅲ,IOZCAS-Spex-Ⅳ,IOZCAS-Spex-Ⅴ,IOZCAS-Spex-Ⅵ,IOZCAS-Spex-Ⅶ,IOZCAS-Ha-Ⅰ),其中6株来自甜菜夜蛾(Spodoptera exigua),1株来自棉铃虫(Helicoverpa aimigera)。7株细胞系的细胞均以圆形为主;新建立的细胞系IOZCAS-Spex-Ⅱ和IOZCAS-Ha-Ⅰ的第10代细胞群体倍增时间分别为108.8h和65.2h;IOZCAS-Spex-Ⅱ和IOZCAS-Ha-Ⅰ染色体符合典型的鳞翅目染色体数目较多的特点,多数细胞为多倍体。使用DAF-PCR的方法,鉴定了新建立的细胞系分别来自其同源的昆虫,而与实验室保存的其它昆虫细胞系PCR扩增谱带不同。细胞长期冻存在-80℃的环境下,并保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,且多次复苏成功。新建细胞系均对同源核型多角体病毒敏感,但敏感程度各不相同,对其它非同源种类的核型多角体病毒不敏感。对已建的细胞系IOZCAS-Spex-Ⅱ进行了单细胞克隆,当前正在进行放大培养。 使用5'-BrdU掺入法标记了光肩星天牛脂肪体细胞在体内和体外的短期增殖情况,(本文来源于《中国林业科学研究院》期刊2006-06-13)

叶雯[3](2006)在《以脂多糖诱导昆虫离体细胞产生抗菌肽及其抗菌活性的研究》一文中研究指出抗菌肽是近年来发现的广泛存在于自然界的一类具有抗菌活性的分子,它们在宿主先天性免疫和适应性免疫中起着重要作用。多数抗菌肽具有分子小、带正电、两亲性、抗菌谱广等共同特点。在诱导和非诱导的情况下,昆虫能产生各种类型的抗菌肽。抗菌肽的大量表达是昆虫受外物入侵或受伤后的特异性免疫反应,参与机体对入侵病原微生物的免疫应答反应,在昆虫的免疫防疫系统中占有重要的地位。抗菌肽对细菌、真菌、病毒和原虫都具有作用,甚至对癌细胞也具有杀伤作用。由于离体细胞在分子水平研究基因性质的优越性,越来越多的研究者尝试用离体培养的昆虫细胞来研究昆虫抗菌肽的诱导和表达。实验已证明用脂多糖、昆布多糖、鞭毛蛋白以及热灭活的大肠杆菌等物质诱导果蝇、棕尾别麻蝇、墨西哥棉铃象、白纹伊蚊、粉纹夜蛾等昆虫的细胞系表达了抗菌肽。 本实验尝试用10~(-3)mg/ml大肠杆菌细胞壁的脂多糖组分、色氨酸、热灭活的酵母菌和热灭活的小麦赤霉病菌等四种诱导源诱导粉纹夜蛾、白纹伊蚊、草地贪夜蛾、斜纹夜蛾、菜青虫、小菜蛾等六种离体培养的昆虫细胞,发现诱导后在细胞的上清中产生了抗菌活性物质。诱导细胞的上清液经叁氯乙酸沉淀提取诱导蛋白,采用琼脂糖孔穴扩散法和比浊法测定了这些细胞的诱导上清对多种细菌和真菌的抗菌活性。比较了不同诱导时间和诱导浓度对产生抗菌活性物质的影响。结果如下: (1)实验证明,LPS是一种较为有效的诱导源,可诱导多种细胞产生抗菌活性物质。 (2)使用LPS诱导细胞,581、C7-10、SF-9、SL四种细胞经诱导后均能产生抗菌活性物质,Px和Pr-49两种细胞的诱导上清则未检测到抗菌活性。其中581细胞经诱导后产生的抗菌活性物质的活力最强。 (3)对581、C7-10、SF-9、SL细胞测定诱导物浓度与细胞上清液抗茵肽活力的关系,结果发现不同浓度的LPS诱导细胞产生的抗菌肽活性不同,不同细胞的最佳诱导浓度也不完全一致。其中581、SF-9、SL细胞的最佳诱导浓度是10~(-3)mg/ml,C7-10细胞的最佳诱导浓度是10~(-4)mg/ml;当诱导浓度达到1mg/ml时,细胞会出现破裂死亡。 (4)选取581、C7-10、SF-9叁种细胞测定诱导时间与细胞产生的抗菌活性物质的活力关系,研究发现诱导时间不同,细胞上清液的抗菌活性不同。诱导4-8h后细胞上清液开始出现抑菌活性,随着时间延长,抗菌活力逐渐上升,581、SF-9(本文来源于《华中师范大学》期刊2006-05-01)

刘凯于,阎江洪,康薇,郑进,洪华珠[4](2005)在《一些化学物质对苏云金芽孢杆菌Cry1Ac毒素与昆虫离体细胞相互作用的影响》一文中研究指出为探讨苏云金芽孢杆菌Bacillusthuringiensis(Bt)杀虫晶体蛋白与昆虫细胞的相互作用,以BtCry1Ac毒素和对该毒素敏感的粉纹夜蛾Trichoplusiani离体细胞BTITN5B14为材料,研究了一些化学物质对Cry1Ac毒素与昆虫离体细胞相互作用的影响。结果表明:N-糖基化抑制剂衣霉素、蛋白质合成抑制剂放线菌酮、胞吞作用抑制剂莫能菌素和胰蛋白酶预处理,都能不同程度地提高BTITN5B14细胞对Cry1Ac毒素的敏感性,其中胰蛋白酶预处理的作用最明显;而N-乙酰半乳糖胺不能抑制Cry1Ac毒素对这种离体细胞的毒力。(本文来源于《昆虫知识》期刊2005年05期)

徐红星,俞晓平,陈建明,吕仲贤,郑许松[5](2004)在《昆虫离体细胞生测法在杀虫剂研究中的应用》一文中研究指出传统杀虫剂的毒力测定是在活体昆虫模型上进行的,劳动密集且耗费时间,而离体昆虫细胞生物测定法则因具有药量少、快速、高效和灵敏等特点而愈来愈受到关注。本文综述了昆虫离体细胞生物测定法的研究进展,并展望了其应用前景。(本文来源于《当代昆虫学研究——中国昆虫学会成立60周年纪念大会暨学术讨论会论文集》期刊2004-06-30)

邱彤,李婷,吴刚,杜曼丽,蒋才富[6](2004)在《RAPD技术用于昆虫离体细胞鉴定的初步探讨》一文中研究指出探讨利用RAPD技术对昆虫离体培养进行快速鉴定的可能性。实验中所选用的细胞材料是美国棉铃虫 (HeliothisZea)细胞株Hz—AM3 (简称Hz)、粉纹夜蛾 (Trichoplusiani)细胞株BTI—TN5B1- 4 (简称 5B1)、斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)卵巢细胞株SL1,利用RAPD技术找出叁种细胞的差异条带 ,从而证明RAPD技术在昆虫离体细胞的快速鉴定中很有前景(本文来源于《生物技术》期刊2004年03期)

蒋才富,刘凯余,洪华珠,彭蓉,郑进[7](2004)在《昆虫离体细胞总膜蛋白的提取及双向电泳分析》一文中研究指出探讨适用于双向电泳的昆虫离体细胞总膜蛋白提取技术及适于双向电泳染色的高灵敏度蛋白质银染技术。以粉纹夜蛾细胞系BT1-TN - 5B1- 4为材料 ,比较了传统的Kwa法和Sigma公司的ProteoPropTM MEMBRANEEXTRACTIONKIT提取BT1-TN - 5B1离体细胞总膜蛋白 ,SDS -PAGE及双向电泳结果表明Sigma公司试剂盒提取的总膜蛋白效果较好 ,并且适用于双向电泳分析 ;比较了两种蛋白银染方法 ,确定并优化了一种灵敏度较高适于双向电泳的银染方法 ,得到了理想的膜蛋白 2 -DE图谱。(本文来源于《生物技术》期刊2004年01期)

郑丙莲,杨红,洪华珠,彭建新,周青春[8](2000)在《八种昆虫离体细胞系对灭多威农药的敏感性研究》一文中研究指出采用MTT法 ,研究了灭多威农药对八种昆虫离体细胞系敏感性的差异。结果显示 ,同一浓度处理下 ,不同细胞系细胞病变的程度不同 ,敏感性差异很大。LC50 值在 10 2 ~ 10 5μg/ml范围内变化 ,其中 ,白纹伊蚊细胞系是最敏感的 ,而小菜蛾细胞系几乎不敏感(本文来源于《生物技术通报》期刊2000年05期)

潘星华,梁嘉靖[9](1998)在《突变基因体细胞纯合的一种新机制——从双翅目昆虫到人类的体联会》一文中研究指出一般来说,染色体联会是减数分裂过程中染色体重组/交换的表现,因而体染色体交换可能导致杂合突变基因的体细胞纯合;且回溯文献发现,体联会不仅在双翅目昆虫中普遍存在,最近在人类也有报道.因此,这一现象可为抑癌基因的体纯合突变机制提供一种值得注意的解释.(本文来源于《自然杂志》期刊1998年06期)

周世力,王家坤,洪华珠[10](1997)在《昆虫离体细胞质膜的提纯》一文中研究指出利用蔗糖密度梯度的漂浮技术,把样品置于蔗糖密度梯度37%、41%、45%、48%(W/W)的最底层,在64800g条件下离心1.5h,在37%~41%蔗糖界面收集膜蛋白,其产率可达到3.975%.质膜纯度为:5’-AMPase活力提高了11倍,G-6-Pase活力降低了3倍.(本文来源于《武汉教育学院学报》期刊1997年03期)

昆虫离体细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

昆虫细胞系具有非常广泛而重要的科学和应用价值。本研究参考动物细胞培养中植块培养的方法,从昆虫幼虫脂肪体细胞的原代培养入手,系统研究了以昆虫脂肪体组织为实验材料建立昆虫细胞系的方法,并初步探讨了昆虫细胞在体外增殖的机制,试图为更多昆虫脂肪体细胞系的建立提供有效的技术手段。研究中选用健康的光肩星天牛(Anoplophora glabripennis)幼虫脂肪体组织为实验材料进行原代培养,通过比较不同虫龄、不同取材部位的大小和完整性、不同培养表面、不同培养液种类和pH、不同血液中酚氧化酶原抑制物的种类和添加比例、原代培养物的贴壁处理等因素对原代培养结果的影响,以及传代方式、条件、时机等对传代培养结果的影响,试图探索出一套特有的昆虫脂肪体细胞建系方法。实验结果表明,由脂肪体组织建立昆虫细胞系,最佳的取材为末龄或进入预蛹期幼虫体内完整的脂肪体组织,优先使用一次性塑料培养瓶,原代细胞培养液的最佳配制比例为:TNM-FH(80%),胎牛血清(10%),苯基硫脲(10%),pH6.2~6.8。决定昆虫脂肪体细胞是否成系的关键因素包括:原代培养的组织能否同培养器皿表面紧密接触(贴壁),紧密贴壁的组织块倾向于游离出分裂能力较强的细胞群;在新生细胞长满瓶底时,处理好第一次或前几次转瓶、传代的步骤非常重要。最佳的初次传代方式是轻轻摇晃,将较易脱壁的细胞以较高的密度传入新的培养瓶中,同时注意不要扰动原组织块,减小对细胞的剪切力。原代培养换液量也需要根据细胞的生长状况而定,一般为换液量的50%。 运用上述方法,本研究共建立了7株昆虫幼虫脂肪体细胞系(IOZCAS-Spex-Ⅱ,IOZCAS-Spex-Ⅲ,IOZCAS-Spex-Ⅳ,IOZCAS-Spex-Ⅴ,IOZCAS-Spex-Ⅵ,IOZCAS-Spex-Ⅶ,IOZCAS-Ha-Ⅰ),其中6株来自甜菜夜蛾(Spodoptera exigua),1株来自棉铃虫(Helicoverpa aimigera)。7株细胞系的细胞均以圆形为主;新建立的细胞系IOZCAS-Spex-Ⅱ和IOZCAS-Ha-Ⅰ的第10代细胞群体倍增时间分别为108.8h和65.2h;IOZCAS-Spex-Ⅱ和IOZCAS-Ha-Ⅰ染色体符合典型的鳞翅目染色体数目较多的特点,多数细胞为多倍体。使用DAF-PCR的方法,鉴定了新建立的细胞系分别来自其同源的昆虫,而与实验室保存的其它昆虫细胞系PCR扩增谱带不同。细胞长期冻存在-80℃的环境下,并保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,且多次复苏成功。新建细胞系均对同源核型多角体病毒敏感,但敏感程度各不相同,对其它非同源种类的核型多角体病毒不敏感。对已建的细胞系IOZCAS-Spex-Ⅱ进行了单细胞克隆,当前正在进行放大培养。 使用5'-BrdU掺入法标记了光肩星天牛脂肪体细胞在体内和体外的短期增殖情况,

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

昆虫离体细胞论文参考文献

[1].康薇,郑进,伊友明,洪华珠.基于昆虫离体细胞的转Bt植株的毒力测定[J].中国森林病虫.2010

[2].张寰.昆虫脂肪体细胞体外增殖方法及同源病毒敏感脂肪体细胞系建立研究[D].中国林业科学研究院.2006

[3].叶雯.以脂多糖诱导昆虫离体细胞产生抗菌肽及其抗菌活性的研究[D].华中师范大学.2006

[4].刘凯于,阎江洪,康薇,郑进,洪华珠.一些化学物质对苏云金芽孢杆菌Cry1Ac毒素与昆虫离体细胞相互作用的影响[J].昆虫知识.2005

[5].徐红星,俞晓平,陈建明,吕仲贤,郑许松.昆虫离体细胞生测法在杀虫剂研究中的应用[C].当代昆虫学研究——中国昆虫学会成立60周年纪念大会暨学术讨论会论文集.2004

[6].邱彤,李婷,吴刚,杜曼丽,蒋才富.RAPD技术用于昆虫离体细胞鉴定的初步探讨[J].生物技术.2004

[7].蒋才富,刘凯余,洪华珠,彭蓉,郑进.昆虫离体细胞总膜蛋白的提取及双向电泳分析[J].生物技术.2004

[8].郑丙莲,杨红,洪华珠,彭建新,周青春.八种昆虫离体细胞系对灭多威农药的敏感性研究[J].生物技术通报.2000

[9].潘星华,梁嘉靖.突变基因体细胞纯合的一种新机制——从双翅目昆虫到人类的体联会[J].自然杂志.1998

[10].周世力,王家坤,洪华珠.昆虫离体细胞质膜的提纯[J].武汉教育学院学报.1997

论文知识图

诱导后不同培养时间培养基上清液的抑菌...细胞被终浓度为1俨m留耐的LPs处理后...电压柑作用于卵毋细胞示意图8种昆虫细胞系对灭多威农药的敏感性差...高等林业教育高等林业院校科学研究工作(2)高等林业教育高等林业院校科学研究工作(1)

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